172446. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-[L-(-)-gamma-amino-alfa-hidroxi-butiril]-kanamicin A előállítására
19 172446 20 Oldószer-rendszer Rf-érték 6’-Cbz-kanamicin A Kanamicin A n-PrOH-piridin-AcOH-HÍ2 O (15:10:3:12) 0,42 (főtermék) 0,33 (kevesebb) 0,15 0,04 Aceton-AcOH-H2 O (20 : 6 : 74) 0,24 0,14 CHCI3 -MeOH-C.NH4 OH-H2 O (1 : 4 : 2 : 1) 0,76 0,50 AcOMe-n-PrOH-C.NH4 OH (45 : 105 : 60) 0,22x 0,04: x Antron-kénsav reagenssel kimutatva. 11. példa L-(-)-7-amino-a-hidroxi-vaj sav előállítása ambutirozin A vagy B vegyületekből vagy ezek keverékeiből 25 5,0 g ambutirozin A-t (3 541 078 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás) 30 160 ml 0,5 n nátriumhidroxiddal 1 órán át visszafolyatással forralunk. A hidrolizátumot 6 n sósavval semlegesítjük, és CG-50 (NH4+ típus) gyanta-oszlopon kromatografáljuk. A céltermék L-(—)*7-amino-a-hidroxi-vajsavat úgy különítjük el, hogy az 35 oszlopot vízzel eluáljuk, és a vizet fagyasztva-szárítással eltávolítjuk. A L-(-)-7-amino-a-hidroxi-vajsav kristályos termék, amelynek olvadáspontja 212,5— —214,5 C° (3 541 078 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás, 2, oszlop, 40 31-38. sor). L-(-)-7-Amino-a-hidroxi-vajsav előállítása DL-a-hidroxi-7-ftálimido-vajsavból A) Dehidroabietil-ammónium-L-a-hidroxi-7- -ftálimido-butirát 50 25 g (0,1 mól) 2-hidroxi-7-ftálimido-vajsav1 200 ml etanollal készített oldatához 29 g (0,1 mól) dehidroabietilamin 130 ml etanollal készített oldatát adjuk. Az oldatot 1 percig erélyesen rázzuk, 55 majd 5 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk, ezalatt finom tűkristályok válnak ki. A kristályokat kiszűrjük, 50 ml etanollal mossuk és levegőn szárítjuk. 30,1 g 56% dehidroabietilaminsó diasztereomert kapunk. Op.: 93-94 C°, [aß4: +15° (c = 2,5, 60 metanol). A terméket 300 ml etanolból átkristályosítva 23,2 g (43%) tiszta terméket kapunk. Op.: 94-95 0°, [aß4: +10,8° (c=2,5, metanol). További átkristályosítás az olvadáspontot és a fajlagos forgatóképességet nem befolyásolta. 65 Az analízis a C32H42N20S*H20 összegképletre: Számított: C =69,54%, H =8,02%, N = 5,07%, Talált: C = 69,58%, H = 8,08%, N = 5,07%. 1 Y. Saito és tsai: Tetrahedron Letters, 4863 (1970). B) L-(-)-7-Amino-a-hidroxi-vajsav 1,5 g (0,014 mól) nátriumkarbonát 40 ml vízzel készített oldatához 5,3 g (0,01 mól) dehidroabietilammónium-L - a -h idroxi-7-ft álimido-butirátot és 60 ml étert adunk. A reakcióelegyet erélyesen rázzuk, amíg minden szilárd anyag feloldódik. Ekkor az éteres fázist elkülönítjük, és a vizes fázist 2 x 20 ml éterrel mossuk, és csökkentett nyomáson 15ml-re bepároljuk. Ehhez a koncentrátumhoz 10 ml tömény sósavat adunk, és a keveréket 10 órán át visszafolyatással forraljuk. A reakciókeveréket lehűtjük, a kivált ftálsavat kiszűrjük, és a szűrletet csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot 10 ml vízben feloldjuk, és az oldatot szárazra pároljuk. Ezt a műveletet a feleslegben levő sósav eltávolítása céljából kétszer megismételjük. A maradék szirupot 10 ml vízben oldjuk, és a kismennyiségű oldhatatlan ftálsavat kiszűrjük. A szűrletet IR—120 (H+, 1 cm x 35 cm) gyantaoszlopra visszük, az oszlopot 300 ml vízzel mossuk, és 1 n ammóniumhidroxid-oldattal eluáljuk. Az eluátumot 15ml-es frakciókra osztjuk. A 10—16. számú, ninhidrinre pozitív frakciókat egyesítjük, és csökkentett nyomáson bepároljuk. Szirupot kapunk, amely fokozatosan kikristályosodik, a kristályokat etanollal eldörzsöljük, szűrjük és vákuumexszikkátorban szárítjuk. 0,78 g (66%) L-(—)-7-amino-a-hidroxi-vajsavat kapunk. Op.: 206-207 C°, [aß4: -29° (c = 2,5, víz). A termék IR spektruma az ambutirozinból kapott autentikus minta spektrumával azonos volt. 10
