172077. lajstromszámú szabadalom • Eljárás félszintetikus 7-amino-cef-3-em-4-karbonsav-származékok előállítására enzimes hidrolizissel és szintézissel

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1974. XII. 19. (SA-2731) Olaszország-béli elsőbbsége: 1973. XII. 20. (54 484 A/73) Közzététel napja: 1977. XI. 28. Megjelent: 1978. XII. 30. 172077 Nemzetközi osztályozás: C07B 29/02, C12D 13/10, C 07 G 7/028 Feltalálók: dr. Marconi Walter vegyészmérnök, San Donato Milanese, dr. Cecere Francesco vegyész, San Giovanni in Persiceto Olaszország Tulajdonos: Snamprogetti S.p.A., Milánó, Olaszország Eljárás félszintetikus 7-amino-cef-3-em-4-karbonsav-származékok előállítására enzimes hidrolízissel és szintézissel 1 A találmány tárgya új, mikrobiológiai eljárás I általános képletű 7-amino-cef-3-em-4-karbonsav-származékok előállítására a G-penicillin gyűrűjének kémiai kibővítéséből származó cefalosporinok enzimes hidrolízisével és enzimes szintézisére. 5 E képletben R jelentése hidrogénatom vagy III általános képletű csoport, ahol X' hidrogénatomot vagy hidroxilcsoportot, és 10 X" hidrogénatomot vagy aminocsoportot jelent, és Rí jelentése hidrogénatom vagy acetücsoport. Ismeretes, hogy az utóbbi években a félszintetikus cefalosporinszármazékok nagy fontosságra 15 tettek szert. A farmakológiában széles körben alkalmazzák őket a ß-laktamaznak (cefalosporináznak) nem ellenálló antibiotikumok helyettesítésére. E vegyületek előnye, hogy savas közegben is stabilak, jól elviselhetők és széles spektrumú 20 antibiotikumok. Az előállításukra jelenleg alkalmazott eljárás a következő kémiai lépésekből áll: a G-penicillin gyűrűjének kibővítése [lásd például a 750 558 és 747 118 számú belga, és a 25 3 275 626 és 3 544 581 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírásokat], a kapott termék hidrolízise, melyet például a 717 741 és 746 800 számú belga szabadalmi leírás mutat be, 30 a kiindulóanyag (7-dezoxi-acetil-cefalosporánsav, 7-ADCA) izolálása, ebből a kiinduló anyagból új termékek szintézise, acilezéssel. A dezoxi-acetil-származékok a fentiek szerint állíthatók elő, a 3-metilcsoport oxidálása a megfelelő oxi-acetil-származékot eredményezi, melynek szerkezete azonos a természetes cefalosporin (cefalosporin C) szerkezetével. Az E. coli törzsek 6-laktamáztermelő képességét pl. a C. A. 77, 72393 és 67, 51329 referátuma ismerteti. Az 1 442 059 számú Német Szövetségi Köztársaság-beli közzétételi irat említi az É. coli ATCC 9637 törzs penicillinaciláz-aktivitasát. Azt találtuk, hogy a félszintetikus" cefalosporinok előállítására szolgáló fenti lépések némelyike baktériumsejtek vagy -sejtkivonatok segítségével is elvégezhető, ami a módszer tökéletesítését, a kiindulóanyagok megtakarítását jelenti, mivel az eljárás kíméletesebb körülmények között ésAó kitermeléssel hajtható végre. / A sejteket anaerob körülmények között, egy szokásos fermentációs eljárással tenyésztjük. A sejtkivonatok könnyűszerrel előállíthatók a sejtek mechanikai feltörése útján. A felszabadult kívánt enzimet továbbtisztíthatjuk. A« enzimes lépésekkel helyettesíthető kémiai műveletek a következők: a) a benzil-penicillin-gyűrűjének kémiai kibővítése által kapott termék hidrolízise és 172077