171719. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új antibiotikum előállítáásra
13 171719 14 ehető anyagok mellett tartalmazzák. Ehető anyagként például rozsliszt, kukoricaliszt, szójaliszt és mész jöhet szóba, adott esetben további tápanyagokkal, proteinekkel, ásványi sókkal és vitaminokkal együtt. A koncentrátumokat a szokásos keverési eljárásokkal állítjuk elő. Premixekben és takarmánykoncentrátumokban az antibiotikum adott esetben alkalmas anyaggal, például nemtoxikus viasszal képzett bevonattal levegő, fény és/vagy nedvesség ellen védve lehet. Baromfitáp-recept: búza 200 g kukorica 340 g szójadara 361 g marhafaggyú 60 g dikalciumfoszfát 15 g kalciumkarbonát 10 g jódozott konyhasó 4 g vitamin—ásvány-keverék 7,5 g hatóanyagpremix 2,5 g 1000,0 g Vitamin—ásvány-keverék: A vitamin 6000 NE D3 vitamin 1000 NE E vitamin 10 mg K3 vitamin 1 mg riboflavin 3 mg piridoxin 2 mg B12 vitamin 20 meg kalciumpantotenát 5 mg nikotinsav 30 mg kolinklorid 200 mg MnS04 • H2 0 200 mg ZnS04 -7H 2 0 140 mg FeS04 -7H 2 0 100 mg CuS04 5H 2 0 20 mg. • A hatóanyagpremix a hatóanyagot a kívánt mennyiségben tartalmazza. Összetétele például: 20 mg hatóanyag, 1 g DL-metionin, 1,48 g szójaliszt. Receptpélda sertéstakarmányra: 630 g takarmánygabonadara (= 200 g kukorica, 150 g árpa-, 150 g zab- és 130 g búzadara), 80 g halliszt, 60 g szójadara, 60 g tapióka-liszt, 38 g sörélesztő, 50 g vitamin—ásvány-keverék (összetétele például olyan lehet, mint a baromfitáp esetén), 30 g lentörkölyliszt, 30 g kukoricasikér, 10 g szójaolaj, 10 g cukornád-melasz, 2 g hatóanyagpremix (összetétel például a fent megadott) alapos keverés után 1 kg takarmányt ad. A megadott összetételű takarmány-keverékek főleg csibék, illetve sertések felnevelésére, illetve hizlalására alkalmasak, azonos vagy hasonló összetételű keverékek azonban egyéb állatok felnevelésére, hizlalására is alkalmazhatók. A találmány szerinti antibiotikum jó baktérium elleni hatását az alábbi kísérletek igazolják. a) in vitro kísérlet: \% glükózt tartalmazó Müller—Hinton féle tápfolyadékkal a találmány szerinti antibiotikumot 200 y.g/ml koncentrációra hígítjuk. A tápfolyadék 1 X 105—2 X 105 baktériumot tartalmaz milliliterenként. A kémcsöveket 18 órán át inkubáljuk, utána a folyadék zavarosságát határozzuk meg. Az antibiotikum hatékony, ha a folyadék zavarosságmentes. 200 txg/ml koncentráció mellett az alábbi baktériumkultúrák zavarosságmentesek: Escherichia coli 14; Escherichia coli 165; Proteus vulgaris 1017; Klebsiella K 10; Klebsiella 63; Salmonella sp.; Shigella sp.; Enterobacter sp.; Serratia sp.; Proteus indolnegativ sp.; Proteus indolpozitiv sp.; Pasteurella pseudotuberculosis; Brucella sp.; Bordetella bronchiseptica; Bacteroides sp.; Staphylococcus aureus 133; Neisseria catarrhalis sp.; Diplococcus pneumoniae sp.; Streptococcus pyogenes W.; Enterococcus sp.; Lactobacillus sp.; Corynebacterium diphteriae gravis; Corynebacterium pyogenes M; Clostridium botulinum; Clostridium tetani; Borrelia sp.; Pseudomonas aeruginosa sp.; Aeromonas hydrophila sp.; Mycoplasma sp. (sp. = „species" = közelebbről nem azonosított, de jellegzetes törzsek). b) in vivo kísérletek: A találmány szerinti antibiotikumot CF, törzsű fehér egereken próbáltuk ki. Az állatokat intraperitoneálisan az 1. táblázatban megadott baktériumokkal megfertőztük, majd a fertőzés után 30 perccel az antibiotikumot szubkután alkalmaztuk. Az ED50 dózist (azt a dózist, amelynek beadása után a kísérleti állatok fele túlélt) 24 óra elteltével határoztuk meg. 1. táblázat Baktérium ED50 mg/kg testsúly Escherichia coli 165 Staphylococcus aureus 1 X400 1X200 A találmány szerinti antibiotikum növekedés-serkentő hatását az alábbi kísérlet igazolja. Az etetési kísérlet során az antibiotikumot 10, illetve 25 ppm koncentrációban a baromfitápba kevertük. A kontrollcsoport adalékmentes eledelt kapott. A 14 napos kísérlet eredményeit az alábbi táblázatban közöljük. Állatok száma Átlagsúly Súly (%) Kontroll 10 ppm antibiotikum 25 ppm antibiotikum 24 24 24 358,2 372,5 383,7 100 104,0 107,1 Magyarázatok az 1—4. ábrához: Ábra Abszcissza Ordináta í. 2. 3. 4. hullámhossz (nm) 8 ppm-ben hullámszám (cm~') 8 ppm-ben abszorpció, abszorpció, % 1. ábra: ultraibolya abszorpciós színkép Az 1. ábra az antibiotikum ultraibolya színképét mutatja. ^max = 265 nm (c = 0,0091% ^metanol) EJ% 256 nm-nél = 164 2. ábra A 2. ábrában mutatott C13 magrezonancia-spektrumot az antibiotikum deuterizált metanollal készített oldatá-10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 7
