171576. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gamma-L-glutamil-taurin izolálására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Bejelentés napja: 1974. IV. 29. (FE-928) Közzététel napja: 1977. IX. 28. Megjelent: 1978. IX. 30. 171576 Nemzetközi osztályozás: C07C 143/15, A 61 K 37/02 Feltalálók: Feuer László vegyész 62%, dr. Furka Árpád vegyész 15%, dr. Sebestyén Ferenc vegyész 11%, Hercsel Imréné vegyészmérnök 10%, Bendefy Istvánná vegyésztechnikus 2%, Budapest Tulajdonos: CHINOIN Gyógyszer és Vegyészeti Termékek Gyára Rt., Budapest Eljárás gamma-L-glutamil-taurin izolálására 1 A 169 462 lajstromszámú szabadalmunk egy, eddig ismeretlen, a mellékpajzsmirigyből kivonatolható, általunk Lit oral ónnak nevezett koncentrátum vagy keverék előállítására vonatkozik, mely igen értékes biológiai tulajdonságokkal rendelkezik. 5 Fenti találmányunk továbbfejlesztéseként megállapítottuk, hogy a Litoralon néven publikált koncentrátum hatóanyaga egy eddig ismeretlen aminosav-származék, melynek neve:gamma-L-glutamü- in -taurin. Jelen találmányunk tárgya a 169 462 lajstromszámú szabadalmunkban leírt eljárás továbbfejlesztéseként ezen tiszta, új hatóanyag izolálása a mel- 15 lékpajzsmirigy-kivonatból. A 169 462 lajstromszámú szabadalmunkban leírt eljárás szerint emlősök mellékpajzsmirigyét, vagy annak szövet-, vagy sejttenyészetét előnyösen por 20 formájában vízzel, vagy szervetlen ionokat tartalmazó vizes oldattal extraháljuk, majd a szűrt extraktot fehérjelecsapószerrel kezeljük, a csapadékot eltávolítjuk, majd a fehérjemenetesített vizes extraktot gélfiltráljuk és az így kapott koncentrá- 25 tumot alkalmazzuk. Jelen találmányunk tárgya szerint spektroszkópiai detektálás alapján kiválasztjuk ezen koncentrátumból a második csúcsot (B frakció) és ezt ioncserés oszlopkromatográfiával tisztítjuk, majd a kapott koncentrátumot elektroforézis- 30 nek vetjük alá, célszerűen pH 1,8 körüli értéken, nagy feszültséget alkalmazva, majd kromatográfiás módszerrel izoláljuk a kémialiag tiszta anyagot. Az ioncserés oszlopkromatográfiát előnyösen Dowex 50 (Dow Chem, USA) típusú, vagy ennek megfelelő típusú gyantával végezzük. A találmányunk szerint alkalmazott elektroforézis során tapasztalatunk szerint a gamma-L-glutamil-taurin az anód felé vándorol. A kromatográfiás elválasztás - amely izolálási módszerünk zárólépése - papírkromatográfiás vagy cellulózoszlopkromatográfiás eljárással célszerű elvégezni. Az izolálni kívánt aminosav-származék detektálása ebben a fázisban célszerűen ninhidrinnel történhet. Ilyen módon a száraz mellékpajzsmirigyporra vonatkoztatva mintegy tíz - százezerszeres koncentrálás után kaphatjuk a tiszta hatóanyagot. A tisztítási sor bármely frakciója elvileg alkalmas terápiás célra is. A tiszta hatóanyag elemi analízise és molekulsúlya igen jó egyezést mutat a C7 Hi4N 2 0 6 S bruttóképlettel és a C =33,07% N =11,02% S =12,61% elemi összetétellel. M = 254,27 H = 5,55% O = 37,75% 171576