171574. lajstromszámú szabadalom • Eljárás alkálifém- vagy ammónium-inzulin előállítására

MAGTAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1974. VII. 11. (Ef-553) Amerikai Egyesült Államok-beli elsőbbsége: 1973. VII. 16. (379. 695) Közzététel napja: 1977. IX. 28. Megjelent: 1978. IX. 30. 171574 Nemzetközi osztályozás: C07C 103/52, A 61 K 37/26 ? :• í r i;' G ti a \^y Feltaláló: Jackson Richard Lee kutatóvegyész, Indianapolis, Indiana, Amerikai Egyesült Allamok Tulajdonos: Eli Lilly and Company, Indianapolis, Indiana, Amerikai Egyesült Államok Eljárás alkálifém- vagy ammónium-inzulin előállítására 1 A találmány tárgya új eljárás alkálifém- vagy ammónium-inzulinok előállítására. A találmány szerinti eljárás értelmében vizes, lúgos oldatot készítünk, amely kétértékű cink-inzulint, a cinkkel kelátképző reagensként etilén-diamin-tetraecetsav- 5 -tetranátriumsót (továbbiakban EDTA) és alkálifémvagy ammóniumionokat tartalmaz. Az oldatban a cink-inzulin koncentrációja 10-1000 E/mg, az alkálifém- vagy ammóniumionok koncentrációja körülbelül 0,3-1,0 mól, az oldat pH-tartománya kö- 10 rülbelül 7,6-8,6 az EDTA koncentrációja körülbelül 0,0002-0,05 mól, a cink-inzulinban az EDTA és a cink aránya pedig legalább 3 :1, és a kapott alkálifém- vagy ammónium-inzulint kristályosítással elkülönítjük a reakcióelegyből. is A cukorbetegség kezelésére alkalmas jelenleg kapható kereskedelmi inzulinkészítményeket mint rövid, közepes vagy elhúzódó hatású vércukor-Szintcsökkentő anyagokat tartják számon. A cukorbetegség sok esetében -különösen a gyermek- 20 gyógyászatban - gyorsan ható és ugyanakkor hosszantartó vércukorszintcsökkentő hatású, azaz kettős-aktivitású inzulinkészítmény kívánatos. Az utóbbi években kettős-aktivitású inzulinkészítményt legalább két különböző inzulinkészít- 25 meny elegyítése útján állítottak elő. Dyen elegy jellemzően sertés-hasnyálmirigyből származó cink-inzulin oldatából és marha-hasnyálmirigyből előállított cink-inzulin szuszpenziójából áll. Más készítmények cink-inzulin-oldat és protamin-inzulin 30 vagy protamin-cink-inzulin szuszpenzió elegyét tartalmazzák. Az eddigi kettős-aktivitású inzulinkészítmények azonban problematikusak voltak, még ha bizonyos fokú kettős-aktivitással rendelkeztek is. Rendszerint problémát jelentett a tárolás, tartósítás, tisztaság, stabilitás, szín és vércukorszint-fokozó faktorral (glukagon), valamint nagymolekulájú antigén fehérjékkel való szennyezettség. A kereskedelmi kettős-aktivitású inzulinkészítményekkel járó legtöbb probléma - ha ugyan nem valamennyi — elkerülhető a 3 758 683 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírásban leírt, alkálifém- vagy ammónium-inzulint és protamint tartalmazó készítmények használata által. Az alkálifém- és ammónium-inzulinokat általában a 3 719 655 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás eljárásával állíthatók elő az eljárás szerint az inzulintartalmú oldat pH-ját körülbelül 7,2-10,0-ra és az alkálifém- vagy ammóniumion koncentrációját körülbelül 0,2-1,0 mólra állítják be, ami az alkálifém- vagy ammónium-inzulin kristályosodásához vezet. Bár a cink kristályosításával járó problémákat elkerülik azok a nem-inzulin-fehérjék, amelyek normálisan csak a cink kristályosításával távolíthatók el, együttmaradnak az alkálifém- vagy ammónium-inzulinnal. így kettős-aktivitású inzulinkészítményként vagy alkálifém- vagy ammónium-inzulint használnak, amely 171574