171572. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vinblasztin, leurozidin és leurozidin és leurokrisztin származékainak előállítására
15 171572 16 tisztítás után 4-dezacetil-leurozidin-3-amidot kapunk. A vegyület fizikai jellemzői a következők:^ infravörös abszorpciós maximum: 3400_cm 1 (H-N amid), 1740 cm-1 (észter), 1690cm -1 (amid), molekulaion spektrum: m/e = 753 (a C43H55N5O7 képlettel megegyezik), NMR spektrum: S 3,58 (Cl8 metil-észer), 6 3,78 (C16 metoxil), 6 2,88 (C, metil), 6 5,78 (C-3 amid hidrogén), 6 4,18 (C4 hidrogén). A megfelelő szulfátsót a bázis etanolos oldatának semlegesítésével, etanolos kénsavval állítjuk elő. A szulfátsó sárgásbarna amorf por. A leurozidin más amidjai hasonló módon állíthatók elő. Dezacetil-1-dezf ormil-1-alkanoil-származékok mindegyikét, valamint a 4-dezacetil-vinblasztint, leurokjisztint vagy leurozidin-3-karboxamidot, karboxhidrazid és az előbbiekben megadott reaktív csoportot tartalmazó amid kivételével, más anhidridekkel, mint klór-ecetsavanhidriddel, vajsavanhidriddel, 2-klór-propionsavanhidriddel és hasonlóval is reagáltathatjuk, például klór-ecetsavanhidrid alkalmazásával 3,4-bisz(klór-acetil)- és 4-klór-acetil-származékok keverékét kapjuk, mely szilikagéllel kezelve tiszta 4-klór-acetil-származékká alakítható. Más 4-acil-származék hasonló módon állítható elő. 8. példa Sók előállítása 10 15 20 25 30 35 Más sókat, beleértve a szervetlen anionok sóit, mint a kloridot, bromidot, foszfátot, nitrátot és hasonló aniont, valamint a szerves anionok sóit, mint az acetátot, klór-acetátot, triklór-acetátot, benzoátot, alkil- vagy arilszulfonátot és hasonló aniont, az 1. példa eljárásával analóg módon, 1%-os vizes kénsav helyett, erre alkalmas hígítószerben, megfelelő sav alkalmazásával amid-bázisokból állít- 40 juk elő. Amint ez a szakember számára nyilvánvaló, az indol-dihidroindol komponens más észter- és/vagy amidcsoportjainak jelenléte a sók előállításánál rendkívüli gondosságot igényel azért, hogy a magas 45 hőmérsékleten, erősen savas pH-n és hasonló körülmények között végbemenő hidrolízist, átészterezést vagy más reakciót elkerüljük. A találmány szerinti vegyületek a folt-megszüntetéses teszttel, szövettenyészet alkalmazásával [Siminoff: Applied Microbiology, 9, 66-72 (1961)] herpeszvírussal szemben in vitro vírusölő aktivitással rendelkeznek. Például a vinblasztin-3-karboxamid-szulfát 3 értékeléssel, 20 mm-es gátlási zónát ad anélkül, hogy 125 Mg/ml dózisban toxikus lenne. Ez a vegyület a kínai hörcsög petefészek-tenyészetében 2 x 10-2 - 2 x 10" s /Jg/ml dózistartományban képes a metafázis megállítását serkenteni. A metafázis megállítását sokkal aktívabban serkenti a 4-dezacetil-leurokrisztin-3-N-metil-karboxamid-szulfát, mely 10-6 Mg/ml dózis-nagyságrendben is hatásos. Ezen túlmenően a találmány szerinti vegyületek az átültetett egértumorral szemben in vivo aktivitást mutatnak. Például a 4-dezacetü-vinblasztin-3--karboxamid-szulfát, 4-dezacetil-vinblasztin-3-N-met il-karboxamid-szulfát, vinblasztin-3-karboxamid-szulfát, vinblasztin-3-N-metil-karboxamid-szulfát, 4-dezacetil-vinblasztin-3-N<2-hidroxi-etil)-karboxamid-szulfát, 4-dezacetü-vinblasztin-3-N,N-dimetil-karboxamid-szulfát, 4-dezacetil-leurozidin-3-amid-szulfát, 4-dezacetil-vinblasztin-3-N-benzil-karboxamid-szulfát és a 4-dezacetil-vinblasztin-3-karboxhidrazid, valamint az I általános képletű vegyületek körébe tartozó más vegyületek, ilyen aktivitással rendelkeznek. Különösen érdekes a találmány szerinti vegyületek, főleg a 4-dezacetil-vinblasztin-3--karboxamid-szulfát és ezek N-alkil- és N-hidroxi-alkil-származékainak aktivitása Ridgeway csontszarkómával (ROS) és Gardner limfoszarkómával (GLS) szemben. A találmány szerinti gyógyszerek, előbbiekben megadott tumorokkal szembeni aktivitásának vizsgálatában a gyógyszereket rendszerint intraperitoneálisan, a tumorral való beoltás után, a megadott dózisban 7-10 napon át adagoljuk. A következő I. táblázatban több kísérlet eredményét adjuk meg, melyben az egérbe átültetett tumort az I általános képletű vegyületekkel eredményesen kezeltük. A táblázat 1. oszlopa a vegyület nevét, a 2. oszlop az átültetett tumort, a 3. oszlop a dózisszintet vagy a dózistartományt és az adagolás naponkénti számát, és a 4. oszlop a tumornövekedés %-os gátlását tünteti fel. A táblázat rövidítései: ROS = Ridgeway csontszarkóma, GLS = Gardner limfoszarkóma, és CA 755 = mirigyrák. I. Táblázat Vegyület Tumor Dózis mg/kg. x nap %-os gátlás 4-Dezacetil-vinblasztin-3--N-metil-karboxamid-szulfát Vinblasztin-3-karboxamid-szulfát 4-Dezacetil-leurokrisztin-3-N-metil-karboxamid -szulfát C3 H emlős ROS GLS 0,25-0,3 x 9 0,15-0,3x10 0,05-0,4 x 8 35-49 48-100 60-100 ROS GLS 0,1-0,5 x 10 0,05-0,8x8 23-84 47-100 C3H emlős CA755 GLS ROS 1,0x9 1,0x9 0ä3-l,0x8 0,3-1,0x10 36 76 57-100 39-100 8
