171243. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új dotriakontapeptidamidok előállítására
5 171243 6 írt 2,2,2-trifluor-l-terc-butil-oxi-karbonil-amino- vagy -1-benzil-oxi-karbonil-amino-etil-csoport (Weygand). A hidroxilcsoportokat nem feltétlenül szükséges megvédeni. A ciszteincsoport merkaptocsoportja például acilezéssel vagy alkilezéssel megvédhető. Acilezéshez alkalmas például az acetil- vagy benzoilcsoport, az etil-karbamoil-csoport, vagy az adott esetben szubsztituált benzil-oxi-karbonil-csoport. Alkilezésre alkalmas többek között például a terc-butil- vagy benzil-tio-metil-csoport, vagy adott esetben szubsztituált aril-metil-csoportok, mint a benzil-, p-nitro-benzil-, difenil-metil-, dimetoxi-benzhidril- vagy tritil-csoport, továbbá a fenil-ciklohexil-, tienil(2)-ciklohexil-csoport [Ber. 101, 681 (1968)]; továbbá például valamely acilamino-metil-csoport [Tetrahedron Letters No. 26 (1968) 3057 oldal, vagy a 2,060.969 számú német szövetségi köztársaságbeli nyilvánosságra hozatali irat]. Acilamino-metil-csoport például valamely —CH2—NH— CO—R általános képletű csoport, mely képletben a —CO—R acilcsoport jelentése valamely karbonsavszármazék, mint valamely alifás, aromás, aralifás vagy heterociklikus karbonsav- vagy valamely szénsavszármazék acilcsoportja, mint szénsav-észter- vagy karbaminsavcsoport. R jelentése elsősorban adott esetben szubsztituált rövidszénláncú alkilcsoport, például metil-, etil-, propil-, izopropil-, n-butil- vagy terc-butil-csoport, melyek szubsztituensként például klóratomot, trifiuor-metil- vagy nitrocsoportot tartalmazhatnak. R jelentése továbbá például egy adott esetben szubsztituált, 3—8, előnyösen 5—6 gyűrűatomot tartalmazó cikloalkilcsoport, mint ciklopentil- vagy ciklohexilcsoport, vagy valamely adott esetben szubsztituált aromás vagy aralifás csoport, melyben az aromás gyűrű előnyösen benzolgyűrű, elsősorban adott esetben szubsztituált fenil- vagy benzilcsoport, például nem helyettesített, vagy a fenilcsoportban rövidszénláncú alkil-, rövidszénláncú alkoxi-, nitrocsoporttal vagy halogénatommal szubsztituált fenil- vagy benzilcsoport, vagy valamely adott esetben előbbiek szerint szubsztituált, előnyösen monociklikus heterociklilcsoport, például tienil- vagy furilcsoport. Acilamino-metil-csoport előnyösen az acetil-amino-metil-csoport. A hisztidin iminocsoportját nem kell feltétlenül megvédeni, azonban a csoport előnyösen például benzil-, tritil-, benzil-oxi-karbonil-, adamantil-oxi-karbonil-csoporttal, vagy az előbbiekben megnevezett Weygand-féle csoportokkal megvédhető. Ezek a védőcsoportok ismert módon lehasíthatok, így a benzil-oxi-karbonil-csoport hidrolízissel; az N-tritil-csoport ásványi savval, mint halogén-hidrogén-savval, például fluor-hidrogénnel vagy előnyösen klór-hidrogénnel, vagy valamely szerves savval, mint hangyasavval, ecetsavval, klórecetsavval, vagy trifluor-ecetsavval vizes vagy abszolút trifiuor-etanolban mint oldószerben, vagy vizes ecetsavban; a terc-butil-oxi-karbonil-csoport trifluor-ecetsavval vagy sósavval; a 2-(p-bifenilil)-izopropil-oxi-karbonil-csoport vizes ecetsavval, vagy például ecetsav, hangyasav (82,8 %-os) és víz (7:1:2) eleggyel lehasítható. A metil-észter hidrazin-hidráttal hidraziddá átalakítható. Hígított nátrium-hidroxid-oldattal a metil- vagy etil-észter-csoport hidrolizálható. A terc-butil-észter például trifluor-ecetsavval lehasítható, éppen úgy a terc-butil-éter is. A találmány szerinti eljárás a) eljárásváltozatánál az oldallánc karboxilcsoportjának, és adott esetben a véghelyzetű karboxilcsoport megvédésére előnyösen terc-butil-észter-csoportot; az oldallánc aminocsopprtjának megvédésére előnyösen terc-butil-oxi-karbonil-csoportot; a szerin-, treonin- és tirozincsoport hidroxilcsoport-5 jához, amennyiben ezeket egyáltalán megvédjük, előnyösen terc-butil-éter-csoportot; és amennyiben szükséges, a hisztidin iminocsoportjának megvédésére előnyösen 2,2,2-trifluor-1 -terc-butil-oxi-karbonil-amino-etil-csoportot használunk. Mindegyik ilyen védőcso-10 port, amennyiben kívánatos, savas hidrolízissel egy műveletben, például trifluor-ecetsavval, sósavval vagy fluor-hidrogénnel lehasítható. A találmány szerinti eljárás b) eljárásváltozatánál kiindulási anyagként alkalmazott nyíltláncú peptidek elő-15 nyösen az a) eljárásváltozatban megnevezett védőcsoportokkal ugyancsak előállíthatók. A merkaptocsoportok előnyösen benzil-, tritil- vagy acilamino-metil-csoporttal megvédhetők. Az S-tritil-csoportok a védett peptidekből szerves oldószerben szelek-20 tív módon, a trifluor-ecetsavval lehasítható csoportok megtartásával, higany(II)-acetáttal és kén-hidrogénnel lehasíthatok. A védett peptidekből az S-benzil-csoportok szelektív módon, nátriummal folyékony ammóniában lehasíthatok. A védett peptidekből az S-acilamino-25 -metil-csoportok vízoldható nehézfémsók, mint higany-, ezüst-, kadmium-, cink- és hasonlók acetátjainak és nitrátjainak vizes oldatában, előnyösen szobahőmérsékleten keverve, lehasíthatok. A vízen kívül más oldószerek, mint a metanol, dimetil-formamid, vagy ezen oldó-30 szerek keverékei is alkalmazhatók. Mindegyik esetben a védett peptid szabad merkaptocsoporttal állítható elő. A merkaptocsoportok védett diszulfiddá, például jóddal ecetsavban, dijód-etánnal szerves oldószerben, vagy levegő oxigénjével folyékony ammóniában, oxidálhatók. 35 Különösen előnyös a merkaptocsoportot tritil- vagy acilamino-metil-csoporttal megvédeni és ezt a védett peptidből, diszulfidhíd egyidejű képzése közben jóddal, például metanolban vagy ecetsavban, eltávolítani. A diszulfidhíd képzése a két ciszteincsoport egyikét tartal-40 mázó részszekvencia, például az 1—10 dekapeptidnek, vagy a dotriakontapeptid-amidnak az előállítási szakaszában történhet. A kapott peptidek önmagukban ismert módon, utólag savaddíciós sókká és/vagy komplexekké alakítha-45 tók. A savaddíciós sók képzése ismert módon történik. A komplexek ismert módon, vagy ezzel egyenértékű módszerekkel képezhetők. A peptidek szervetlen anyagokkal képezett komplexei, mint a cinkvegyületek komplexei, előnyösen az 50 ACTH-nál ismert analóg módon, például a megfelelő fém oldható sójával, például cink-kloriddal vagy cink-szulfáttal reagáltatva, és valamely alkálifém-foszfáttal és/vagy -hidroxiddal kicsapva, állíthatók elő. 55 A kiindulási anyagként alkalmazott peptidek előállítására az aminosavakat, amennyiben szükséges vagy kívánatos, könnyen lehasítható védőcsoport alkalmazásával az említett sorrendben egyenként, vagy előzőleg kisebb peptidegységeket képezve, összekapcsoljuk, 60 melynél adott esetben a szintézis valamely megfelelő szakaszában diszulfidhidat képezünk. Az eljárást célszerűen, tekintetbe véve a diszulfidhidat, a hosszúláncú peptidek előállítása szerinti megfelelő összekapcsolási módszerrel folytatjuk le, mint ahogy ez az irodalomból 65 ismert. 3
