171218. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 6-(alfa,alfa-diszubsztituált-acetamido)-2,2-dimetil-penám-3-karbonsavak előállítására

171218 9 10 I. táblázat MGK (E/ml) Vegyület Pseudomonas Pseudomonas Walter F41 IB példa szerinti 8 8 2C példa szerinti 4 4 8. példa szerinti 8 8—16 9. példa szerinti 16—32 8—16 10C példa szerinti 8—16 8—16 1 IC példa szerinti 16—64 16—64 14. példa szerinti 4—16 4—16 Ampicillin >400 >400 Carbenicillin 200 >200 Az IB sz. példa szerinti vegyület egyéb baktériumokra kifejtett hatását szintén az említett sorozatos hígítási módszerrel vizsgáltuk meg. Az alábbi II. táblázatban feltüntetett értékeket kaptuk. II. táblázat D-6-[a-/(4-metil-5-oxo-3-pirazolin-2-il)-karbonilamino/-a-fenil-acetamido]-2,2-dimetil-pénám-3-karbonsav nátriumsójának minimális gátló koncentrációi (E/ml): Escherichia coli B 32 Klebsiella pneumoniae 128 Escherichia Staphylococcus coli 26/6 1 aureus 133 0,5 Proteus morganii 128 Enterococcus Proteus vulgaris 128 ATCC 9790 32 A találmány szerinti vegyületeket a hatásspektrum kiszélesítése céljából, valamint a penicillinázt képező baktériumok esetén különösen kívánatos hatásnövelés elérésére egyéb penicillin-vegyületekkel, például penicillinázzal szemben ellenálló penicillinekkel, például oxacillinnel vagy dicloxacillinnel kombinálhatjuk. A találmány szerinti vegyületek a fentieken túlmenően további baktériumfajták ellen is hatékonyak, ahogy azt az alábbi kísérlet mutatja: Az 1. példa szerintt előállított vegyületet 0,1% glukózt tartalmazó Müller—Hinton féle tápközeggel 100 [xg/ml koncentrációra hígítottuk. A táptalajt kémcsövekbe töltöttük, amikoris mindegyik kémcsőbe milliliterenként 1—2 X 105 baktériumot juttattunk. A kultúrákat 24 órán át inkubáltuk, majd a zavarossági fokot megállapítottuk. Minden zavarosságtól mentes folyadék arra utal, hogy az a hatásos dózist tartalmazza. 100 [xg/ml koncentráció esetén az alábbi baktériumokkal készített kultúrák zavarosságtól mentesek voltak: Escherichia coli 14; Escherichia coli C 165; Proteus vulgaris 1017; Klebsiella K 10; Klebsiella 63; Salmonella sp.; Shigella sp.; Enterobacter sp.; Serratia sp.; Proteus, indolnegativ; Proteus, indolpositív, sp.; Pasteurella pseudotuberculosis; Brucella sp.; Haemophilus influenzae; Bordetella bronchiseptica; Bacteroides sp.; Staphylococcus aureus 133; Neisseria catarrhalis sp.; Diplococcus pneumoniae sp.; Streptococcus pyogenes W; Enterococcus sp.; Lactobacillus sp.; Corynebacterium diphteriae gravis; Corynebacterium pyogenes M; Clostridium botulinium; Clostridium tetani; Borrelia sp.; Pseudomonas aeruginosa sp.; Aeromonas hydrophila sp.; Állatkísérleteinkben CF, törzshöz tartozó fehér egereket az alábbi III. táblázatban megadott baktériumokkal intraperitoneálisan megfertőztünk, majd az 1. példa szerinti vegyülettel kezeltük. A kezelés után 24 órával megállapítottuk az EDJ0 értéket, vagyis azt a dózist, amely beadása után 24 órával a fertőzött állatok fele még élt. III. táblázat Baktérium ED*,,(E/kg testsúly; subcutan) Escherichia coli C 165 Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa W Pseudomonas aeruginosa F41 1 X 200 000* 1 X 40 000 4X 75 000** 4 X 100 000 * egyszeri kezelés a fertőzés után 30 perccel * * négyszeri kezelés a fertőzés után 30 perccel, 2, 4, illetve 6 órával. s = szingulett m = multiplett d = dublett AB — AB-rendszer t = triplett J = kölcsönhatás q = kvartett állandója Az infravörös színképeket nujol-szuszpenzióban vettük fel. 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 A találmányt az alábbi példákkal közelebbről meg-30 világítjuk. Mivel a szakirodalomban a penicillin-nomenklatúrát elterjedtebben használják, a példákban a találmány szerinti 6-/<x,a-diszubsztituált acetamido/-2,2-dimetil-penám-3-karbonsavakat, valamint a kiindulási anyagokat a penicillin-nomenklatura szerint nevezzük el. 35 Példa: az 1. példa végtermékét, a D-6-[oc-/(4-metil-5-oxo-3-pirazolin-2-il)-karbonilamino/-a-fenil-acetamido]-2,2--dimetil-penám-3-karbonsavat a fentiek értelmében tehát D-a-[(4-metil-5-oxo-3-pirazolin-2-il)-karbonilamino]-benzilpenicillánsavnak nevezzük. 40 A példákban használt oc-aminobenzilpenicillin mintegy 14% vizet tartalmazott, de vízmentes oc-aminobenzilpenicillin (lásd: 3 144 445 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás) szintén alkalmazható. 45 Az alkalmazott a-amino-p-hidroxi-benzil-penicillin mintegy 13% vizet tartalmazott; a vízmentes a-amino-p-hidroxi-benzil-penicillin alkalmazása azonban szintén lehetséges. „Ampicillin" kifejezésen olyan cc-aminobenzil-penicil-50 lint értünk, amelynek oldallánca D- ( = R-) konfigurációs. Ugyanaz az oldallánc-konfiguráció az „amoxicillin"-nek nevezett a-amino-p-hidroxi-benzilpenicillinre, valamint az ,,epicillin"-nek nevezett a-amino-a-/l,4--ciklohexadién-l-il/-metilpenicillinre is jellemző. 55 A találmány szerinti vegyületek NMR-spektrumait CDjOD-oldatban vettük fel. A zárójelben feltüntetett rövidítések az alábbi jelentésűek: 5