171139. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kölcsönös specifikus kötésre hajlamos anyagok kvantitatív meghatározására

9 171139 10 polimerekhez előnyösen alkalmazható kapcsolóreagensek a cián-halogenidek, i így például a brómcián, továbbá szerves vagy szervetlen cianátok, így például az alkálifém-cianátok, valamint az epihalohidrinek, például az epiklórhidrin. A brómciánnal reakcióképessé tett agaróz különösen előnyösen alkalmazható. Más alkalmazható kapcsolóreagensek közé tartoznak a diazo- és hidrazin-származékok, például azok, amelyekkel polisztirolok, akrilamidok és ezek származékai reakcióképessé tehetők, valamint a részben hidrolizált nylon reakcióképessé tételére alkalmas glutáraldehid. Az alkalmazható polimerek lehetnek diszpergált vagy szerkezetileg integrált formában, vagy e két állapot közötti bármely változatban. így a polimerek lehetnek például porok, gyanták vagy membránok formájában. A találmány értelmében alkalmazott oszlop, amely alapvetően úgy írható le, mint egy, a két végén nyitott megnyújtott üreges test. Az oszlop előnyösen szelektíven lezárható legalább az egyik végén. Az oszlop bármely olyan formában lehet, amely alkalmas a szilárd fázis tartalmazására és lehetővé teszi a folyékony fázisnak a szilárd fázishoz eljutását, illetve a mátrixon átfolyását. Ilyen forma például az egyenes vagy meghajlított cső, büretta, pipetta, valamint a hagyományos oszlop-típusú berendezés. Az oszlopnak olyan anyagból kell készülnie, amely közömbös a folyékony fázissal szemben abban az értelemben, hogy sem a meghatározandó anyag, sem a jelzett komponens nem képes adszorbeálódni magának az oszlopnak az anyagán. Ha a jelzett forma egy radioaktív jelzett forma, akkor az oszlop előnyösen meghatározott geometriájú annak érdekében, hogy az ilyen eszköz közvetlenül alávethető legyen radioaktivitásmérésnek. A szilárd fázis olyan eszközökkel tartható az oszlopban, mint például a pórusos korongok, szivacsos szerkezetű dugók vagy permeábilis membránok. További lehetőség e célra magának az oszlopnak megfelelő belső kialakítása például öntés útján. A szilárd fázist tartó eszköznek minden esetre pórusosnak és a folyékony fázissal szemben közömbösnek kell lennie annak érdekében, hogy az eszköz ne tartson vissza olyan zavaró anyagokat, mint a meg nem kötött meghatározandó anyag vagy a meg nem kötött jelzett komponens. A csatolt rajzon a találmány szerinti oszlop egy előnyös kiviteli alakjának perspektivikus ábrázolása látható. A hengeres csőszerű 11 test meghatározott geometriájú és egyik végén a 13 elvékonyodó csúcsrészben végződik. A hengeres csőszerű 11 test polipropilénből vagy más alkalmas anyagból készül és szelektíven lezárható a 13 elvékonyodó csúcsrészénél a 12 súrlódó zárósapkával, amely úgy van kialakítva, hogy kívánság szerint eltávolítható vagy felrakható. A 15 mátrix (amelyhez a specifikus kötésre hajlamos partner kötve van) egy adott mennyiségét a 11 test alsó részén elhelyezett 14 pórusos polietilénkorong tartja. All test felső részébe az ábrán látható módon szállítás és tárolás céljára valamilyen konzerváló elegyet, például valamilyen bakteriocid hatású vegyülettel adalékolt fiziológiás konyhasóoldatot, vagy pedig az eszköz alkalmazása során a folyékony fázis egy részét adhatjuk. All test felső vége kialakítható kifelé bővülő 17 karimaként abból a célból, hogy all testet függőleges helyzetben alkalmas állványon 5 tarthassuk. Az eltávolítható 18 dugó a 11 test lezárására szolgál tárolás és szállítás során. A (b) lépésben használt eluáló folyadéknak képesnek kell lennie a referenciamintából származó nem kötött jelzett komponens lényegében teljes 10 mennyiségének eluálására az oszlopból. Általában ez az eluáló folyadék egyszerűen elválasztja az oszlopban levő folyadéktól az oszlopot fizikai úton. Ez az eluáló folyadék előnyösen egy olyan puffer, amelynek puffer kapacitása elegendő a 15 specifikus kötésre hajlamos vegyületek reakciójához alkalmas pH-tartomány fenntartására. Az optimális pH-tartományt általában annak figyelembevételével állapítjuk meg, hogy az maximálja a specifikus kötésre hajlamos vegyület és ennek partnere 20 közötti kötési affinitást, illetve minimalizálja a zavaró anyagok hajlamát a mátrixanyaghoz való kötődésre. Használhatunk mind szerves, mind szervetlen puffereket, a konkrét esetben alkalmazott puffer megválasztása a végbemenő speci-25 fikus reakciótól függ. Célszerű lehet az eluáló folyadékhoz valamilyen felületaktív anyag adagolása annak érdekében, hogy a folyékony mintából a zavaró anyagok könnyen eluálhatók legyenek. Az oszlopot az (a) lépést megelőzően előnyösen 30 kiegyensúlyozzuk úgy, hogy az oszlopot valamilyen kiegyensúlyozó folyadékkal érintkeztetjük. Ez a folyadék előnyösen valamilyen puffer és lehetővé teszi az optimális körülményeket a specifikus reakcióhoz. Általában ez a folyadék a (b) lépésben 35 alkalmazott folyadékkal egyező. A szilárd fázist és a folyékony fázisokat úgy érintkeztetjük, hogy a folyékony fázisokat a fentiekben ismertetett eszközön átbocsátjuk. A két folyékony fázis, éspedig a referenciaminta és a 40 meghatározandó anyagot tartalmazó folyadékminta átbocsátása során az eszközbe egyik nyitott végén bejuttatjuk a folyékony fázisokat, amikor is azok érintkeznek a szilárd fázissal. A szilárd fázis és a folyékony fázisok közötti kontaktidőt a folyékony 45 fázisra gyakorolt erő nagysága és a szilárd fázis folyási tulajdonságai határozzák meg. A folyékony fázisokra az eszközön való áthaladás érdekében gyakorolt erőt kifejthetjük például mechanikus vagy pneumatikus szivattyúval, vagy pedig alkal-50 mázhatunk például vákuumos megszívatást. Előnyösen azonban a gravitáció hatására jut keresztül a folyékony fázis a szilárd fázison. Előnyösen a szilárd fázis folyási tulajdonságait úgy választjuk meg, hogy a gravitációs hatás alatt a 55 szilárd fázis adszorbeáló, folyadékvisszatartó képességgel rendelkezzék. A mátrix sűrűsége úgy választható meg rendszerint, hogy eleget tegyen ezeknek a követelményeknek. A mátrix által visszatartott folyadék azután pótolható az eszközbe 60 további folyadék adagolása útján. így ha már egyszer egy folyékony fázist adtunk a szilárd fázishoz és az azt visszatartja, akkor a két fázis kölcsönhatásban van mindaddig, míg egy újabb folyadékot, például puffert nem adagolunk az 65 eszközbe a visszatartott folyadék kiszorítására. 5