171083. lajstromszámú szabadalom • Eljárás L-3-(3',4' -dihidroxi-fenil)-2-metil -alanin-peptidek előállítására
9 171083 10 35 C° hőmérsékleten. Ezután a reakcióelegyet körülbelül 50 ml 2 n sósav-oldattal semlegesítjük és vákuumban a tetrahidrofuránt teljesen ledesztilláljuk. Körülbelül 40 ml víz hozzáadása után a nyers hidrolízis terméket 100 ml etilacetátban felvesszük, és az 1. példa I. változata szerinti módon feldolgozzuk. Dy módon 10,20 g (78,4%) vékonyrétegkromatográfiásán egységes N-benziloxikarbonil-O- b e nz il- L - szeril-L-3-(3 ',4'-dihidroxi-fenil)-2-metil-alanint kapunk színtelen por alakjában. Az N-benziloxikarbonil- és O-benzilcsoport hidrogenolízisét az 1. példa I. változata szerinti módon végezzük, ekkor 13,06 g (0,025 mól) N-benziloxikarbonil-0-benzil-L-szeril-L-3-(3',4'-dihidroxi-fenil)-2-metil-alanin 150 ml dioxánnal készített oldatát és 25 ml In sósav-oldatot frissen előhidrogénezett palládiumhoz adjuk (1,25 g palládiumoxid 90 ml dioxánban és 30 ml vízben) és a reakcióelegyen 25 C° hőmérsékleten körülbelül 6 órán keresztül hidrogéngázt áramoltatunk át. A katalizátor kiszűrése után a szűrletet körülbelül 25 ml In nátriumhidroxid-oldattal semlegesítjük, és vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot 70 ml vízben feloldjuk, és kristályosítás céljából 0C°-ra hűtjük. így 2,24 g (30,1%) színtelen, analitikailag és vékonyrétegkromatográfiásan tiszta L-szeril-L-3-(3',4'-dihidroxi-fenil)-2-metil-alanint kapunk, amely vákuum-exszikkátorban végzett szárítás után még 2,3 mól vizet tartalmaz, olvadáspont: 196-197 C° (bomlás), [aß0 =-4,4° (c = 1, ecetsavban). 7. példa LLeucü-L-3-(3',4'-dihidroxi-fenil)-2-rnetil-alanin 16,90 g (0,075 mól) L-3-(3',4'-dihidroxi-fenil)-2--metil-alanin-metilésztert és 21,87 g (0,083 mól) benziloxikarbonil-L-leucint ([a]j)° = -18,4° /c=l, ecetsavban/) 380 ml dioxánban 15,45 g (0,075 mól) N,N'-diciklohexilkarbodiimid jelenlétében reagáltatunk, majd kezelünk az 1. példa I. változata szerinti módon. így 35,4 g (100%) nyers terméket kapunk színtelen por alakjában. Oszlopkromatográfíásan végzett tisztítás után (az 1. példa I. változata szerinti módon) 21,70 g (61,4%) vékonyrétegkromatográfiásan tiszta benziloxikarbonil-L-leucil-L-3-(3', 4'-dihidroxi-fenil)-2-metil-alanin-metilésztert kapunk amorf por alakjában. 18,88 g (0,04 mól) benziloxikarbonil-L-leucil-L-3-(3,4-dihidroxi-fenil)-2-metil-alanin-metilésztert az 1. példa 1. változata szerinti módon 152 ml In nátriumhidroxid-oldattal 2 órán át hidrolizálunk szobahőmérsékleten, majd a reakcióelegyet feldolgozzuk, így 14,32 g (78,2%) vékonyrétegkromatográfiásan egységes benziloxikarbonil-L-leucil-L-3-(3',4'-dihidroxi-fenil)-2-metil-alanint kapunk amorf por alakjában. A benziloxikarbonilcsoport lehasítását az 1. példa I. változata szerint végezzük. 2,0 g palládiumoxidot 110 ml metanolban és 25 ml vízben előhidrogénezünk. Ezután hozzáadjuk 18,34 g (0,04 mól) benziloxikarbonil-L-leucil-L-3-(3',4'-dihidroxi-fenil)-2-metil-alanin 120 ml metanollal és 50 ml vízzel készített oldatát, és 2 órán át hidrogénezzük. A reakcióelegy feldolgozása után 13,0 g (100%) nyers terméket kapunk, amelyet 30 ml vízből átkristályosítunk. Kitermelés: 8,34 g színtelen, vékonyréteg-5 kromatográfiásan és analitikailag tiszta L-leucil-L-3--(3',4'-dihidroxi-fenil)-2-metil-alanint kapunk, amely vákuumexszikkátorban végzett szárítás után 2,5 mól vizet tartalmaz. Olvadáspont: 106-107 C° (leforrasztott csőben), [a]l° = -21,4° (c = 1, vízben). 10 8. példa L-Fenilalanil-L-3-(3',4'-dihidroxi-fenil)-2--metil-alanin 15 15,78 g (0,07 mól) L-3-(3\4'-dihidroxi-fenil)-2-metil-alanin-metilésztert és 23,92 g (0,08 mól) benziloxikarbonil-Lfenilalanint (olvadáspont: 85—87 C°, fájj}0 = +4,6° /c = 1,5, ecetsavban/) 350 ml dioxánban 20 14,42 g (0,07 mól) N,N'-diciklohexilkarbodiimiddel peptidszintézisnek vertjük alá. így 35,45 g (100%) nyers terméket kapunk színtelen habszerű anyag alakjában. Oszlopkromatográfiás tisztítással, amelyet az 1. példa I. változata szerinti módon végzünk, 25 33,67 g (95%) benziloxikarbonil-L-fenil-alanil-L-3--(3',4'-dihidroxi-fenil)-2-metil-alanin-rnetilésztert kapunk amorf por 'alakjában. 20,26 g (0,04 mól) benziloxikarbonil-L-fenilalanil-L-3-(3',4'-dihidroxi-fenil)-2-metil-alanin-metilésztert 30 az 1. példa I. változata szerinti módon 152 ml In nátriumhidroxid-oldattal 3 órán át hidrolizálunk szobahőmérsékleten, majd a reakcióelegyet feldolgozzuk, így 16,35 g (83%) benziloxikarbonil-L-fenilalanil-L-3-(3',4'-dihidroxi-fenil)-2-metil-alanint ka-35 punk sárgás színű, vékonyrétegkromatográfíásan egységes por alakjában. 19,70 g (0,04 mól) benziloxikarbonil-L-fenilalanil-L-3-(3',4'-dihidroxi-fenil)-2-metil-alanint a benziloxikarbonilcsoport hidrogenolízise céljából az 40 1- példa I. változata szerinti módon 5 órán át hidrogénezünk szobahőmérsékleten (2,0 g palládiumoxid 230 ml metanolban) és a reakcióelegyet feldolgozzuk. így 14,08 g (98,1%) nyers terméket kapunk. A terméket alkoholos oldatból éterrel 45 kicsapjuk, és 2 órán át 80 C° hőmérsékleten vákuumban foszforpentoxid felett szárítjuk. így 9,61 g tiszta L-fenilalanil-L-3-(3',4'-dihidroxi-fenil)-2--metil-alanin-monohidrátot kapunk, amelynek olvadáspontja 160-163 C° (bomlás), [aß 0 = + 8,1° 50 (c= 1, metanolban). 9. példa 55 L-Tirozil-L-3-(3',4'-dihidroxi-fenil)-2-metil-alanin 9,0 g (0,04 mól) L-3-(3'4'-dihidroxi-fenil)-2-metil-alanin-metilésztert és 22,08 g (0,063 mól) N-benzil-60 oxikarbonil-L-tirozin-dihidrátot ([a]o° = +3,8° /c=l,5, ecetsavban/) 200 ml dioxánban 11,3 g (0,055 mól) N,N'-diciklohexilkarbodiimiddel reagáltatunk, a reakcióelegyet az 1. példa I. változata szerinti módon dolgozzuk fel és oszlopon kromatog-65 rafáljuk. így 19,7 g (94,2%) benziloxikarbonil-L-tiro-5
