171059. lajstromszámú szabadalom • Eljárás piridazinil-benzimidazolok előállítására
5 171059 6 D 2-metil-5(6)-(3-morfolino-6-piridazinil)-benzimidazol, E 2-(2-fluorfenil>5(6)-(3-oxo-4,5-dihidro--2H-6-piridazinü)-benzimidazol-hidroklorid, 5 F 2-trifluormetil-5(6)-(3-oxo-4,5-dihidro--2H-6-piridazinil)-benzimidazol, G 2-metil-5(6)-(2-metil-3-oxo-4,5-dihidro-2H-6-piridazinil)-benzimidazol-hidroklorid, 10 H 5(6)-(3-oxo-4,5-dihidro-2H-6-piridazinil)-benzimidazol, I 2-(4-metoxi-fenil)-5(6)-(3-oxo-4,5-dihidro--2H-6-piridazinil)^benzimidazol és K 2{4-metoxi-fenil)-5(6)-(3-oxo-2H-6- 15 -piridazinil)-benzimidazol-metánszulfonát. (1) A trombocita-aggregáció meghatározása Born és Cross szerint 20 [J. Physiol. 170, 397 (1964)] A trombocita-aggregációt egészséges kísérleti személyek lemezkegazdag plazmájában mértük. Az optikai sűrűség csökkenésének folyamatát kereske- 25 delmi kollagén (Sigma cég, St. Louis, USA), amely 1 mg kollagén-fibrillént tartalmaz ml-ként, hozzáadása után fotometrikusan mértük, és regisztráltuk. A sűrűség-görbe hajlásszögéből következtettünk az aggregáció sebességére (Vmax). A görbének a leg- 30 nagyobb fényáteresztő-képességet képviselő pontja szolgált az optikai sűrűség mértékéül („optical density", O.D.). A maximális aggregáció kiváltására 1 ml lemezkegazdag plazmához körülbelül 0,01 ml kollagén-oldatot adtunk. 35 A következő táblázat szemlélteti a kapott eredményeket. Vegyület Gátlás 10"4 mól/liter hozzáadása 40 után %-ban, O.D. A 100 B 100 D 89 F 100 H 100 I 100 55 (2) A vérnyomást csökkentő hatás meghatározása A vérnyomást csökkentő hatást 19-26 kg-os vegyesivarú korcs kutyákon határoztuk meg kloralóz- 60 -uretán (54 + 270 mg/kg i.v.) és nembutái (10 mg/kg i.v.) narkózisban. Az állatokat gégemetszés után Harvard-féle lélegeztető készülékkel mesterségesen a helyiség levegőjével lélegeztettük. Az artériás vérnyomást az arteria-femoralisban Statham-féle nyo- 65 másmérővel (P 23 De típus) mértük, és Grass-féle poligráffal regisztráltuk. A vizsgált anyagokat vizes oldatban intravénásán a véna saphenába fecskendeztük. A következő táblázat három vizsgálat átlagértékét tartalmazza: Vegyület Adag mg/kg Vérnyomáscsökkenés i.v. Hgmm 0,25 1,00 7/9 26/38 0,5 1,00 18/25 33/32 0,25 1,00 17/14 33/44 (3) A pozitív inotróp hatás meghatározása A pozitív inotróp hatást elkülönített, spontán verő tengerimalac-pitvarra gyakorolt kontrakciós hatásként vizsgáltuk. A friss tengerimalac-szívpitvart 100 ml szervfürdőbe helyeztük, amely 30C°-os Tyrode-oldatot tartalmazott. A fürdőn karbogént (95% oxigén és 5% széndioxid) vezettünk keresztül. A spontán összehúzódásokat izometrikusan Grass-féle Force-Displacement-Transducer-en (FT 03 C típus) keresztül Grass-féle poligráffal regisztráltuk. A pitvarok előnyújtása 1 g-os súllyal történt. 20-30 perces kiegyenlítődési idő után a vizsgált anyagokat 10""s g/ml koncentrációban adtuk a fürdőhöz. A következő táblázat legalább öt különböző pitvaron mért átlagértéket tüntet fel: Vegyület összehúzódás növekedése %-ban A 30 B 20 C 12 E 15 G 13 K 33 (4) Akut toxicitás A vegyületek akut toxicitását fehéregereken egyszeri perorális adaggal tájékozódásképpen határoztuk meg. A megfigyelési idő 14 nap volt. A D vegyület akut toxicitása perorálisan 250 mg/kg volt, és 5 állat közül egy sem pusztult el. Az I általános képletű új vegyületeket gyógyászati felhasználásra adott esetben egyéb hatóanyagokkal kombinálva a szokásos gyógyszerkészít-3
