170668. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antibakteriális hatású 7-[D- alfa-amino- alfa-(p-hidroxifenil)-acetamido]- 3-(1,2,3-triazol- 5- iltiometil)- 3-cefem-4-karbonsav-szeszkvihidrát előállítására
9 170668 10 átszűrjük és fagyasztva szárítjuk. Ily módon 0,9 g nyers 7-[D-a-amino-a-(p-hidroxifenil)acetamido]-3-(l,2,3-triazol-5-iltiometil)-3-cefem-4-karbonsavat kapunk, amelyet a következő módon kristályosítunk: 0,2 g nyersanyag 6 ml 99%-os metanollal készített szuszpenzióját egy próbacsőben forrásig melegítjük. Közvetlenül ezután megszüntetjük a melegítést és az olvadékot kristállyal beoltjuk, ekkor-az olvadék kristályos tömeggé szilárdul. Ily módon összesen 0,211 g 7-[D-a-amino-a-(p-hidroxifenil)acetamido]-3 -(1,2,3 -triazol-5 -iltiometil)-3 --cefem-4-karbonsavat kapunk 0,400 g nyersanyagból. Az anyagot 56 °C/0,1 Hgmm-en foszforpentoxid felett 20 órán át szárítjuk. Olvadáspont 200 °C felett van (bomlik). [R és NMR megerősíti a szerkezetet. Az NMR 1/3 mól metanol jelenlétét is mutatja. \nalizis C 18H 18 N 6 0 5 S 2 • H2 0 1/3 CH 3 OH képletre volatkoztatva: Számított: C =44,83; H=4,38; N = 17,10; S = 13,09%; Talált: C =43,97; H=4,36; N = 15,84; S=6,18%. Összesen 6,5 g (11,55 mmól) 7-[D-a-terc-butoxikar>onilamino-a-(p-hidroxifenii)acetamido]-3-(l,2,3-triazol-5-iltiometil)-3-cefem-4-karbonsavat feloldunk 175 ml '8—100%-os hangyasavban vízmentes körülmények ;özött. Az elegyet szobahőmérsékleten 2,5 óra hosszat leverjük. Az oldat egy részét, mégpedig 125 ml-t, csökentett nyomáson eltávolítjuk. így borostyánszínű olajat apunk, amelyet 70—70 ml toluollal háromszor azetróposan desztillálunk csökkentett nyomáson. A maadékot 700 ml 80 :20 arányú víz-metanol-elegyben zuszpendáljuk és a szuszpenziót 0,5 óra hosszat, a szitrd rész nagyobb részének a feloldódásáig keverjük, íajd szűrjük. A szűrletet 1,5 g („Darco" aktívszénnel örülbelül 20 percig kezeljük. Az aktívszenet egy „Celi:" szűrőbetéten szűrve elkülönítjük. Az oldatot fakasztva szárítjuk 9 elkülönített 100 ml-es gömblomikban. A fagyasztva szárított anyag súlya 2,415 g, -nelyet 0,200 g-os adagokban a fent leírt módon átristályosítunk és így összesen 0,923 g 7-[D-sc-amino-ap-hidroxifenii)acetarnido]-3-(l,2,3-triazol-5-iltiometil)-cefem-4-karbonsavat kapunk. NMR színkép 1/3 ól metanol jelenlétét mutatja. nalízis Ci8 H 18 N 8 O s S 2 • H2 0 • 1/3 CH3 OH képletre voitkoztatva: támított:C =44,83; H=4,38; N = 17,10; S = 13,09%; ilált: C =45,77; H=4,44; N = 16,61; S = 13,01%; C =44,36; H=4,34; N = 16,52; S = 13,01%. A 7-amino-3-(l ,2,3-triazol-5-iltiometil)-3-cefem-4-kar»nsav (7—TACA) BL—S640-né való acilezését metiíkloridban végezzük D-(—)-p-hidroxifenilglicilklorididrokloriddal. A BL—S640-metanolszolváttá való ilakulás hozama biopotencia alapon körülbelül 45%. 5 anyalúgban körülbelül 15% hatóerő van és körültül 25% oldhatatlan szilárd anyag található, amely igálatlan 7—TACA és a 7—TACA-nak lebomlott aktámmal való bomlásterméke. Az eljárás lényegében a 7—TACA-nak HMDS-sel ló szililezésével jár együtt, amely metilénkloridban •ténik, ezután megy végbe az acilezés savklorid-hidro»riddal 0—5 °C-on, amelyet metanollal állítunk meg. A metilénkloridot ezután lehajtjuk és a metanolos oldatot „Darco KB" aktívszénen kezeljük. A szűrletet vákuumban betöményítjük és a pH-t tömény ammónium -hidroxid-oldattal 4,8—5,0 értékre állítjuk, beoltjuk és 5 kristályosítjuk. A folyamatot az A) reakcióvázlaton mutatjuk be, az anyaghányadokat pedig a következőkben táblázatosan foglaljuk össze: Anyagok: (1,0 kg 7—TACA-ra vonatkoztatva) 10 Reagens 35 g ml mól 7—TACA 1000,0 ~3,20 D-(—)-p-hidroxifenilglicilklorid • HCl 797,0 ~3,60 15 HMDS (hexametildiszilazán) 965,0 1245,0 ~5,95 DMA • HCl (30% metilénkloridban) 320,0 20 DMA (dimetilanilin) 480,0 ~ 3,78 Metilénklorid (száraz -=0,01% KF) szükséges mennyiség Metanol 25 (száraz < 0,01% KF) szükséges mennyiség Ammóniumhidroxid „Darco KB" (aktivált szén) szükséges mennyiség Imidazol 21,8 0,32 30 A víztartalmat Karl Fischer módszerével mértük, erre vonatkozik a K. F. jelzés. Módszer 1. 1000 g (3,20 mól) 7—TACA-t hozzáadunk 25 liter száraz metilénkloridhoz (K. F. H2 O<0,01%). A kapott iszapot keverjük és 1245 ml (körülbelül 5,95 mól) HMDS-t adunk hozzá. 40 2. Az iszapot visszafolyatás közben melegítjük és száraz nitrogéngázt buborékoltatunk át rajta. A visszafolyatás közbeni melegítést mindaddig folytatjuk, ameddig teljes oldatot nem kapunk és leülepíthető szilárd anyag már nincs jelen. 7—TACA adagokat 12—22 óra 45 hosszat visszafolyatás közben melegítünk mindaddig, ameddig zavaros oldatot nem kapunk. 3. A szililezési lépés befejezése után az'oldatot körülbelül 15—20 "C-ra lehűtjük és 320 ml DMA • HCl-t (30% metilénkloridban adunk hozzá, ezt követően pedig 50 480 ml DM A-val (dimetilanilin) és 21,8 g imidazollal elegyítjük. A reakcióelegyet 0—5 °C-ra hűtjük és 797 g (3,60 mól) D-(—)-p-hidroxifenilglicilklorid • HCl-t adunk hozzá egy óra alatt növekvő adagban. A szuszpenziót 0—5 °C-on 10—12 óra hosszat vagy addig keverjük, 55 ameddig az összes savklorid oldatba nem megy. 4. A reakcióelegyet lassú ütemben 3 óra leforgása alatt 20 °C-ra melegítjük és 2 óra hosszat ezen a hőmérsékleten tartjuk. A savklorid teljes oldódását megállapítjuk. 60 5. 8,3 liter száraz metanolt (K. F.< 0,01 %) adunk alapos keverés közben egy perc alatt az oldathoz. Az elegyet 10—15 percig keverjük és közvetlenül ezután nagyon gyorsan szűrjük az oldhatatlan részek eltávolítása érdekében. (Laboratóriumban a szűrést Büch-65 ner tölcséren végezzük és a szűrőlepényt két rész meti-5
