170513. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új antibakteriális pszeudotriszaccharidok előállítására
21 170513 22 oldószerkstjrerék alsó fázisával végezve. A megfelelő eluátumokat egyesítjük és bepároljuk, így kapjuk az l-N-(4-ftálimido-butil)-sziszomicint. 0,5 g l-N-(4-ftálirrido-butil)-sziszomicinhez 5 ml 5%-os etanolos hidrazinhidrát-oldatot adunk, és az elegyet a visszafolyatás hőmérsékletén 3 órán át melegítjük. Ezután a reakcióoldatot nagy térfogatú tetrahidrofuránba öntjük, és a kivált csapadékot kiszűrjük. Ez a termék az l-N-(4-amino-butii)-sziszomicin. A vegyületet még a következőképpen is előállíthatjuk: 1. 4-Acetamido-butiraldehid 5 g 4-acetamido-butiraldehid-dietilacetált 75 ml desztillált vízben és 5 ml In kénsavban feloldunk. Az oldatot szobahőmérsékleten állni hagyjuk, amíg a hidrolízis a vékonyrétegkromatogram szerint tökéletesen végbemegy. Ekkor az oldatot nátriumhidrogénkarbonáttal semlegesítjük, majd nátriumkloriddal telítjük és kloroformmal extraháljuk. Az egyesített kloroformos extraktumokat desztilláljuk, a maradék a 4-acetamido-butiraldehid, amelyet a következő művelethez további tisztítás nélkül felhasználhatunk. 2. 1 -N-(4-acetamido-butil)-sziszomicin 3 g sziszomicin 120 ml desztillált vízzel készített oldatához 0,1 n kénsavat adunk, amíg az oldat pH-értéke körülbelül 5 lesz. Ekkor az előző példa szerint előállított 6 g 4-acetamido-butiraldehidet adunk az oldathoz, majd 10 perc múlva 600 g szilárd nátrium-cianobórhidridet. 2 óra múlva az oldatot kis térfogatra betöményítjük, és metanolba öntjük. A kivált csapadékot szűrjük, vízben feloldjuk, és a vizes oldatot Amberlite IRA 40IS (OH-) ioncserélő gyantán átengedjük. Az eluátumot bepároljuk, és a kapott maradékot szilikagélen kromatografáljuk, az eluálást kloroform-metanol 7%-os ammóniumhidroxid oldószerkeverék alsó fázisával végezve. Az eluátumot bepárolva, a maradék az 1 -N-(4-acetamido-butil)-sziszomicin. 3. l-N-(4-amino-butil)-sziszomicin Az előzőek szerint előállított l-N-(4-acetamido-butil)-sziszomicint 100C°-on 3 órán át 10%-os vizes káliumhidroxid-oldattal kezeljük, majd Amberlite IRC—50 ioncserélő gyantával semlegesítjük és 2n vizes ammóniumhidroxid-oldattal eluáljuk. Az eluátumot bepároljuk, a maradékot vízben feloldjuk és liofilizáljuk. így kapjuk az 1-N-(4-amino-butil)-sziszomicint. [aß6 =+109° (c = 0,3, víz). Tömegspektrum: (M+l)+ m/e 519, továbbá 127, 160, 197, 216, 234, 244, 256, 262, 342, 360, 375, 388, 393, 403, 443. G) Más l-N-(amino-alkil)-sziszomicinek Az 1 .F) példában leírtakhoz hasonló módon a sziszomicin kénsavaddíciós sóját vizes dimetilformamidban nátrium-cianobórhidriddel és 3-ftálimido-propanallal reagáltatjuk. A reakciót az 1.A) példában leírtakhoz hasonló módon végezzük, és a kapott terméket az ott leírt módon izoláljuk és tisztítjuk, s így l-N-(3-ftálimido-propil)-sziszomicint kapunk. 5 Ezt a vegyületet az 1 .F) példában leírt módon etanolos hidrazinhidrát-oldattal kezeljük, és így l-N-(3-amino-propil)-sziszomicint kapunk. [aß6 =+127° (vízben), NMR-spektruma (deutériumoxidban): ő 1,2 (3H, 10 s, -C-CH3 ), 2,5 (3H, s, N-CH 3 ), 3,8 (IH, dd, J = 4, 10,5Hz, H2 ")' 4,0(1H, d, s= 12,5 Hz, H 5 " e), 4,85 (IH, m, -C=CH-), 4,95 (IH, d, J = 4Hz, Ht "), 5,34 (IH, d, J = 2,5 Hz, Ht ')• Tömegspektruma: M+ +1 m/e 504, 160, 202, 15 220, 230, 248, 256, 328, 346, 361, 374, 379, 389, 407, 419 és 429. H) l-N-(2-amino-etil)-sziszomicin és 1-N-(3-amino-propil)-sziszomicin 20 Az 1. példa F) szakaszában leírtakhoz hasonló módon a sziszomicin vizes oldatát, amelyhez 0,1 n kénsavat adtunk, amíg a pH-értéke körülbelül 5 lesz, 2-acetamido-acetaldehiddel, majd szilárd nát-25 rium-cianobórhidriddel kezeljük. A kapott terméket a leírt módon izoláljuk és tisztítjuk. Az l-N-(2--acetamido-etil)-sziszomicint 10%-os vizes káliumhidroxid-oldattal hidrolizáljuk és a kapott terméket az 1. példa F) szakasz 3. pontjában leírt eljárásvál-30 tozat szerint elkülönítjük és tisztítjuk, s így kapjuk az l-N-(2-amino-etil)-sziszomicint. Tömegspektrum: (M+l)+ m/e 491, továbbá 160, 169, 187, 206, 216, 234, 256, 283, 314, 325, 334, 347, 360, 370, 375, 405 és 415. 2. példa 1-N-szubsztituált-gentamicin Cia 40 A) 1-N-etil-gentamicin Cia 5 g gentamicin Cla -hoz 125 ml vízben 1 n kénsavat adunk, amíg az oldat pH-értéke körülbelül 45 5,2 lesz. Ezután 2 ml acetaldehidet adunk az oldathoz, 5 percig keverjük, majd 1 g nátrium-cianobórhidridet adunk hozzá. A reakciókeveréket szobahőmérsékleten meg 30 percig keverjük, az oldatot vákuumban körülbelül 75 ml térfogatra betömé-50 nyitjuk, bázisos ioncserélő gyantát [például Amberlite IRA 401S (OH-)] tartalmazó oszlopon átengedjük, majd liofilizáljuk, a maradék az 1-N-etil-gentamicin Cia . A terméket 200 g szilikagélen kromatografálva 55 tisztítjuk, az eluálást kloroform-metanol 7%-os vizes ammóniumhidroxid 2:1:1 oldószerrendszer alsó fázisával végezve. A megfelelő eluátumokat (vékonyrétegkromatogramon megállapítva) egyesítjük, és a célterméket tartalmazó egyesített eluátumokat 60 vákuumban bepároljuk. így kapjuk az 1-N-etil-gentamicin Cia terméket. A hozam 0,95 g. Az 1-N-etil-gehtamicin Cla -t 100 g szilikagélen kromatografálva tovább tisztítjuk, az eluálást kloroform-metanol 3,5% ammóniumhidroxid 1:2:1 oldószer-65 rendszerrel végezve. A vékonyrétegkromatogramon 11
