170464. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3-helyettesített 7béta-(D-5-amino-5- karboxivaleramido)- 7-metoxi-cef-3- em-4- karbonsav-származékok előállítására
7 170464 8 az alábbi adatok jellemzik: Vékonyréteg-kromatográfia: 75%-os vizes acetonitrilben, Cellulóz-lemezen Rf -érték 0,2, a 842A antibiotikum dinátrium-sójának Rf-értéke ugyanilyen körülmények között 0,3. Ibolyántúli színkép: Xmax 263 mÜlimikron, molekuláris kioltási együttható kb. 3500 (elméleti érték: 8000). 1 Infravörös színkép: nujolban abszorbció 1780 cm értéknél (béta-laktám-gyűrű jelenlétét mutatja). A termék pozitív ninhidrin-próbát mutat, ami egy alfa-amino-adipoil-oldallánc jelenlétét mutatja. Biológiai értékmérés: a termék különféle mikroorganizmusokkal szemben az alábbi táblázatban megadott átmérőjű gátlási zónákat mutat a szokásos korong-módszerrel vizsgálva, a táblázatban megadott (a kétféle antibiotikum esetében azonos) koncentrációban: Mikroorganizmus A 842A dinátrium sója 70-(D-5-amino-5-karboxivaleramido)-3-(aminometil)-7-metoxi-cef-3-em4-karbonsav Vibrio percolans MB-1272 Salmonella gallinarum MB-1287 Pseudomonas stutzeri MB-1231 18 27 21 20 (5 mcg/ml) 21 (100 mcg/ml) 21 (100 mcg/ml). 3. példa 7/3-(D-5-amino-5-karboxivaleramido)-3-metil-7--metoxi-cef-3-em-4-kar bonsav Maradékként 528 mg 7j3-(D-5-amino-5-karboxivaler-30 amido)-3-metil-7-metoxi-cef-3-em-4-karbonsavat (az elméleti hozam 52,8%-a) kapunk. 35 10%-os palládiumos aktívszén-katalizátort 80 ml vízben szuszpendálunk és e szuszpenziót hidrogénnel kezeljük. Ezután a katalizátort szűréssel elkülönítjük és 2,67 g katalizátort 50 ml vízben szuszpendálunk, majd az előhidrogénezett katalizátor ily módon elkészített szuszpenziójához 1,0 842A-nátriumsó 10 ml vízzel készített oldatát adjuk. Az elegyet szobahőmérsékleten 24 óra hosszat rázatjuk. A katalizátort ezután kiszűrjük és vízzel mossuk, a mosófolyadékot (50 ml) egyesítjük a szűrlettel, majd ezt az elegyet bepároljuk szárazra. 40 45 50 A fenti módon kapott 7)3-(D-5-amino-5-karboxivaleramido)-3-rnetil-7-metoxi-cef-3-em-4-karbonsavat vékonyréteg-kromatográfiai módszerrel összehasonlítottuk a termék előállításához alkalmazott kiindulóanyaggal. Erre a célra szilikagél-lemezeket alkalmaztunk, 4 rész n-butanolt, 1 rész ecetsavat és 4 rész vizet tartalmazó rendszerben. A kapott hidrogenolízis-termék két foltot mutatott, a kiindulóanyagénál nagyobb Rf -értékkel. Ezeket a foltokat ninhidrinnel, valamint ibolyántúli fluoreszencia alapján mutattuk ki. A 842A antibiotikum nátriumsója és a 7j3-(D-5--amino-5-karboxivaleramido)-3-metil-7-metoxi-cef-3--em-4-karbonsav között a fenti módszereket és biológiai értékméréssel talált különbségeket az alábbi táblázatban foglaltuk össze: Mérési mód: 842A-nátriumsó Bioaktivitás 5 mcg/ml Vibrio percolans MB-1272 ellen 25 mm zóna Vékonyrétegkromatográfia kb. 15 meg foltonkint Rf 0,1, ninhidrin pozitív UV pozitív UV-színkép ^mjx 266 nm, El cm 1HZ 7/3-(D-5-amino-5-karboxivaleramido)-3-metil-7-metoxi-cef-3-em-4-karbonsav 25 mcg/ml koncentrációban inaktív (az eredeti aktivitás 2%-ánál kisebb) Rf 0,25, ninhidrin pozitív, UV pozitív Rf 0,35, ninhidrin pozitív, UV negatív 265 nm, E! % 100
