170334. lajstromszámú szabadalom • Eljárás mikroorganizmusok tenyésztésére
11 170334 12 4. példa A JMS 72 jelű vegyes tenyészet folyamatos tenyésztése 4,2 liter hasznos térfogatú 7 literes fermentorba 4,0 g/l metanolt tartalmazó DCR2 táptalajt töltünk, és 100 ml, előzetesen 1 napig 42 C°-on inkubált JMS 72 tenyészettel oltunk be. A tenyészet pH-ját 6,8 értéken, szobahőmérsékletét pedig 42 C°-on tartjuk. A tenyészetet 1000 fordulat/perc sebességgel keverjük, és 1 liter/óra sebességgel levegőztetjük. A fermen-10 tációt szakaszosan indítjuk be. Amikor a tenyészet optikai sűrűsége eléri az 1,5 (625 nm) értéket, 0,05-0,66/óra hígítási arányokkal megkezdjük a folyamatos tenyésztést. Minden egyes hígítási aránynál (a 0,66/óra érték kivételével) a nyugalmi állapotot legalább 2 napig tartjuk fenn, és a tenyésztést összesen több mint 700 órán át végezzük. A 4. táblázatban feltüntetjük az egyes hígítási arányokhoz tartozó hozamadatokat (g száraz biomassza/g metanol) és a kapott biomassza fehérjetartalmát. 4. táblázat Hígítási arány l/óra Hozam (száraz biomassza, g/metanol, g) Fehérjetartalom, % 0,31 76,25 0,40 79,37 0,43 77,50 0,49 79,37 0,46 76,88 0,47 80,60 0,45 78,75 0,507 68,12 0,537 66,88 kimosódik 0,065 0,162 0,232 0,319 0,364 0,426 0,545 0,589 0,638 0,66 A fenti kísérletet ismételjük meg úgy, hogy az EN jelű, metanolt hasznosító mikroorganizmust egyedül, 35 illetve FG jelű, metanolt nem hasznosító mikroorganizmussal együtt tenyésztjük. E kísérletek eredményeit az 5. táblázatban közöljük. 5.táblázat Hígítási arány Hozam (g száraz biomassza/g metanol) EN EN + FG 0,06 0,10 0,12 0,13 0,16 0,19 0,24 0,29 0,29 0,30 kimosódik 0,35 0,35 0,35 kimosódik A 4. és 5. táblázat adatainak összevetéséből kitűnik, hogy az EN jelű mikroorganizmus az alaptenyészetben található négy metanolt nem hasznosító mikroorganizmussal együtt tenyésztve nagyobb hozamot (g biomassza/g metanol) nyújt, mint az EN jelű mikroorganizmus tiszta tenyészete, illetve az EN jelű mikroorganizmus mellett csak egy metanolt nem hasznosító mikroorganizmust tartalmazó vegyes tenyészet. Itt tehát a JMS 72 jelű vegyes tenyészet alkalmazásakor az eljárást nagyobb hígítási arányok-60 kai is végrehajthatjuk. A JMS 72 jelű vegyes tenyészet, illetve az EN jelű mikroorganizmus tiszta tenyészete által termelt biomassza aminosav-összetételét a 6. táblázatban közöl-65 jük. o