170185. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3- (szubsztituált) -metil-7- acilamido- 7-metoxi- cef- 3-em-4-karbonsav származékok előállítására
170185 5 6 = 1) redukálószerrel, például sztanno-kloriddal kezelve alakíthatjuk át a megfelelő redukált származékokká(m = 0). Azokat a (II) általános képletű kiindulási anyagokat, amelyek R helyén D-5-amino-5-karboxi-valeril- 5 csoporttól eltérő acilcsoportot tartalmaznak, úgy állíthatjuk elő, hogy az R helyén védett D-5-amino-5-karboxi-valeril-csoportot tartalmazó (II) általános képletű vegyületeket acilezőszerrel megfelelő oldószerben, mint kloroformban, dioxánban, metilén-klo- 10 ridban, acetonitrilben és hasonló oldószerben, szililvegyület, például trialkil-szilán trifluor-acetamid, így N-trimetil-szilil-trifluor-acetamid vagy hasonló jelenlétében szobahőmérséklet és 50 C° közötti hőmérséklet-tartományban reagáltatjuk. A 7/3-(D-5-amino-5- 15 karboxi-valeril)-csoportot ezután a védőcsoport eltávolításával hasítjuk le. Ezt az eljárást a „Kiindulási anyagok előállítása" c. leírásrészben részletesen ismertetjük. Azokat az (I) általános képletű vegyületeket, ahol 20 X halogénatomot jelent, úgy is előállíthatjuk, hogy az X helyén karbamoü-oxi-csoportot tartalmazó (I) általános képletű vegyületeket halogénezőszerrel, például foszfor-pentakloriddal reagáltatjuk metilén-kloridban vagy hasonló inert oldószerben, 0 C° és szobahőmér- 25 séklet közötti hőfoktartományban. E vegyületek előállíthatók továbbá úgy is, hogy az X helyén hidrogénatomot tartalmazó (I) általános képletű vegyületeket halogénezőszerrel, például N-bróm-szukcinimiddel, N-bróm-acetamiddal vagy hasonlóval reagáltatjuk, inert 30 oldószer, például kloroform vagy széntetraklorid jelenlétében. A 7-(D-5-amino-5-karboxi-valeramido>3-karbamofl-oxi-metil-7-metoxi-cef-3-ern-4-karbonsavat eredetileg a talajból egyedüli kolóniaként elkülönített és 35 ferde agár tenyészeten kifejlesztett törzs segítségével fermentációs eljárással kapták. A vegyületet termelő mikroorganizmus mintáját a Northern Utilization Research and Development Branch of the U.S. Department of Agriculture at Peoria, Illinois, tényé- 40 szetgyűjteményében helyezték tartós letétbe és NRL-3802 számmal jelölték, mely azonos a Merck M.A.-2908 számú letétjével. A 7-0-(D-5-amino-5-karboxi-valeramido)-3-karbamoil-oxi-metil-7-metoxi-3-cefem-4-karbonsavat aerob fermentációval, erre al- 45 kalmas vizes tápközegben termelik ellenőrzött körülmények között Streptomyces lactamdurans (NRRL— 3802) organizmussal történő beoltassál. Erre a célra általában bármely táptalaj megfelel, mely szén- és nitrogénforrást tartalmaz. A szénhidrát és nitrogén- 50 forrás pontos mennyisége a fermentációs közeg egyéb alkotórészeitől függ, bár általában a szénhidrát mennyisége rendszerint a tápközeg 1—6 súlyszázaléka, és a hasznosítható nitrogén, önmagában vagy kombinálva, rendszerint a tápközeg 0,2—6 súlyszáza- 55 léka. A következő összetétel csupán a táptalaj szemléltetésére szolgál, mely alkalmas a vegyület előállítására, de magától értetődő, hogy erre a célra más táptalaj is alkalmas. Tápközeg 60 1 % Blackstrap melasz 1 % National Brewer élesztő 2,5% Difco agár pH 7,-0 vízzel feltöltve A fermentációt 20 C° és 37 C° közötti hőfoktar- 65 tományban folytatjuk le, bár az optimális eredmény 24 C° és 32 C° közötti hőmérsékleten történő fermentálással érhető el. A Streptomyces lactamdurans tenyészet szaporítására és a 7ß-(D-5-amino-5-karboxi-valer-amido)-3-karbamoil-oxi-metil-7-metoxicef-3-em-4-karbonsav termelésére alkalmas táptalaj pH értékének 6,0—8,0 között kell lennie. A fermentléből a 7|S-(D-5-amino-5-karboxi-valeramido)-3-karbamoil-oxi-metil-7-metoxi-cef-3-em-4-karbonsav kinyerésére a szűrt fermentlevet 7,0 pH-n erősen bázikus anioncserélő gyantán folyatjuk át és a terméket 3% ammónium-kloridot tartalmazó 90%-os metanollal eluáljuk, az adszorpciót 7,2-8,0 pH-n megismételjük, 5%-os vizes nátrium-klorid-oldattal eluáljuk, majd az aktív eluátumot 2,0 pH-n szulfonsav típusú erősen savas kationcserélő gyantán adszorbeáljuk, a terméket 2%-os vizes piridinoldattal eluáljuk és a kapott piridinium sót a jól ismert eljárások szerint más sókká vagy szabad savvá alakítjuk. Az alkalmazott R2 védőcsoport az eljárás bármely szakaszában eltávolítható azon vegyület előállítására, melyben R2 jelentése hidrogénatom. így például az észtercsoport lehasításával szabad savat kapunk. Ezek a csoportok a szakember számára jól ismert módon távolíthatók el, például a triklór-etoxi-karbonil-csoport cinkporral vagy kromokloriddal alkohol, például metanol, etanol, propanol, butanol és hasonló alkohol, vagy ecetsav és víz keverékének alkalmazásával. Ezenkívül a védőcsoport, mint a benzhidril-, fenilalkil- vagy tercier butilcsoport eltávolítható hidrogénnel reagáltatva katalizátor, például palládium-csontszén jelenlétében, vagy^erős szerves vagy szervetlen savval, mint sósavval, kénsawal, bór-trifluorid-éteráttal, hangyasawal, trifluor^ecetsavval, triklór-ecetsawal, nitrobenzoesawal és hasonló savval. A következő példák a találmány szerinti új eljárást szemléltetik. Annak ellenére, hogy a példák csak szemléltetésre szolgálnak, a szakember számára nyilvánvaló, hogy azonos eredmény elérésére a következő példákban leírt más reagens hasonlóan alkalmazható. 1. példa 7-Metoxi-3-metoxi-metil-7-(2-tienil-acetamido)-A2 -cefem-4-karbonsav-l-oxid benzhidril észtere A művelet: 3-Karbamoil-oxi-metil-7-rnetoxi-7-(2-tie n il-acetamido)- A 2 -cefem-4-karbonsavbenzhidril észtere 1,0 g 3-karbamoil-oxi-metil-7-metoxi-7-(2-tienilacetamido)-A3 -cefem-4-karbonsav benzhidril észterét benzollal felkevert 20,0 g Florisillel töltött oszlopra visszük fel. Egy éjjelen át az oszlopon 10% etil-acetátot tartalmazó benzolos oldatot csepegtetünk keresztül. Az így keletkezett A2 -izomért 40% etil-acetátot tartalmazó benzollal eluáljuk. Bepárlás után 50% tiszta terméket kapunk, melynek fizikai jellemzői a következők: NMR: (oldószer - CDC1 3) 6 = 6-32 (2-H, d, J AB = 2Hz), 5-10 (4-H, d, JAB = 2Hz), 5-32 (6-H), 3-40 (7-OCH3 ), s), 4-52 (10-H 2 , s), 3-82 (13-H2 ,s). B művelet: 3-Bróm-metil-7-metoxi-7-(2-tienil-acetamido)- A 2 -cefem-4-karbonsav-benzhidril észtere A levegő nedvességének kizárásával (0,0132 mól) 3
