169794. lajstromszámú szabadalom • Eljárás mikrobiális lipáz előállítására

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1973. IX. 17. Japán elsőbbsége: 1972. IX. 20. (94 222/72) Közzététel napja: 1976. VII. 28. Megjelent: 1977. XII. 31. (TA—1269) 169794 Nemzetközi osztályozás: C 12 D 13/10 Feltalálók: TOMODA Katsumi biokémikus, Hyogo NAKAMURA Masahira biokémikus, Osaka, Japán Tulajdonos: Takeda Chemical Industries Ltd. cég, Osaka, Japán. Eljárás mikrobiális lipáz előállítására i A találmány tárgya eljárás egy új típusú mikrobiális lipáz előállítására; a találmány szerint előállított lipáz jellemző tulajdonsága, hogy enzim-aktivitása epe jelenlétében számottevő mértékben megnövekszik. Eddig már különféle típusú mikrobiális lipáz enzi- 5 mek előállítását ismertették a szakirodalomban. így például az Agricultural and Biological Chemistry 30. kötet 6. sz., 576—584 (1966) és az Applied Microbiology 20. kötet 1. sz., 16—22 (1970) közleményei lipáz enzimeknek Candida cylindracea illetőleg Propionibacte- 10 rium shermanii kultúrákból történő előállítását ismertetik. Ismeretes azonban az is, hogy az így előállított lipázok epe jelenlétében elveszítik aktivitásukat. Lipázok állíthatók elő például a Mucor mortierella (433 162 és 439 187 számú svájci szabadalmi leírás, 15 1442 093 számú német szövetségi köztársaságbeli közzétételi irat), a Trichosporon genus (1 489 533 számú francia szabadalmi leírás), a Xanthomonas sp. (1 300 487 számú német szövetségi köztársaságbeli közzétételi irat), a Pseudomonas stutzeri (1 300 487 20 számú német szövetségi köztársaságbeli közzétételi irat) és a Chromobacterium genus (1932 981 számú német szövetségi köztársaságbeli közzétételi irat) tenyésztésével. Ezek a mikroorganizmusok azonban a lipázokat csak alacsony koncentrációban és nyers álla- 25 pótban termelik, így a lipázok nem különíthetők el kristályos enzimek alakjában. A lipáz-termelő mikroorganizmusok vizsgálata során azt találtuk, hogy a Phycomyces fajhoz tartozó mikroorganizmusok olyan lipázt termelnek, amelynek enzim- 30 aktivitása epe jelenlétében számottevő mértékben megnövekszik. A találmány tárgya tehát eljárás olyan mikrobiális lipáz előállítására, amelynek enzim-aktivitása epe jelenlétében számottevően megnövekszik. Az e célra szolgáló, ipari méretekben is jól alkalmazható eljárás mellett kiterjed a találmány az ily módon előállított új típusú lipázt tartalmazó gyógyszerkészítményeknek előállítására is. Az említett új típusú lipázzal poralakú epekészítmény, továbbá adott esetben egyéb digesztív szereket tartalmazó készítmények, valamint az ilyen lipázzal feljavított zsíros élelmiszerkészítmények, például vaj is előállítható. A találmány szerinti eljárásban alkalmazandó mikroorganizmusok a Phycomyces fajhoz tartozó, lipáz termelésére képes mikroorganizmusok. Pontosabban a találmány szerinti eljárás során a Phycomyces fajhoz tartozó 3 species közül kettőt, nevezetesen a Phycomyces nitens és a Phycomyces blakesleeanus specieseket használtuk fel. A nevezett speciesekbe sorolható törzsek számára, elkülönítésére és tulajdonságaira vonatkozó részletes tájékoztatást kaphatunk a Mycologia 51. kötetének 751—770 oldalán (1959). Az általunk alkalmazott rendszertan a fenti irodalmi helyen ismertetett rendszertannak felel meg. Az ilyen mikroorganizmusokat természetes forrásokból különítettük el, beszerezhetők ezek bizonyos mikroorganizmustörzs-gyűjteményekből is, például az Institute of Fermentation, Osaka (IFO), a Centralbureau Voor Schimmelcultures, The Netherlands (CBS), vagy 169794 1