169462. lajstromszámú szabadalom • Eljárás Litoralon koncentrátum, vagy keverék előállítására
13 169462 14 elúciós diagram mérése 280 m/i extinkciónál történik. Ha az átáramló folyadékmennyiség térfogatát az extinkció függvényeként határozzuk meg, úgy az elölről számított második csúcs tartalmazza a Litoralont. A gélfiitráció jellemző paraméterei a következők: Kiindulási anyag 5,1 g az 1, példa szerinti anyagból. Oszlopátmérő 4,85 cm, magasság 149 cm. Átáramlási sebesség 0,78 ml/perc. Időtartam 10 perc. Folyadéktérfogat 7,8 ml/cső A abszorpciós csúcshoz tartozó frakció B abszorpciós csúcshoz tartozó frakció C abszorpciós csúcshoz tartozó frakció D abszorpciós csúcshoz tartozó frakció E abszorpciós csúcshoz tartozó frakció F abszorpciós csúcshoz tartozó frakció G abszorpciós csúcshoz tartozó frakció 71-103 csövek 104-128 csövek 129-134 csövek 135-^162 csövek 163-189 csövek 190^217 csövek 248-227 csövek Jelzés Cső Súly mg/ban kifejezve A 9-12 8,4 B 13-17 18,4 C 18-23 64,4 D 24-29 5,2 E 30-36 2,2 F 37-42 0,5 G 43-50 3,1 H 51-57 7,3 I 58-80 Összesen: 6,8 58-80 Összesen: 116,3 (38,6%) 10 15 20 25 30 A hatóanyagot a B frakció tartalmazza. A D és E frakciókban a klorid reakció pozitív. A liofilizált B frakció súlya 0,43 és 0,53 g között változik 5 g anyagból való kiindulás esetén. Gélfiltrációval történő azonosítás: A Sephadex G15 -ön való gélfiltrálás után az anyag az eluátumban (0 67 ± 0,02) x V0 térfogatnál jelenik meg, amennyiben a meghatározás vizes oldatban 280 m/i-nál való abszorpció alapján történik. V0 az a térfogat, melynél a só az eluátumban megjelenik (pozitív klorid-reakció). A B csúcsot egy Dowex 50 x 2-es oszlopon pH 1,8 értéknél frakcionáljuk. 301 mg anyagot 30%-os vizes oldatban felviszünk egy 132 x 1 cm-es Dowex 50 x 2-es 45 oszlopra, melyet előzőleg hangyasav—ecetsav eleggyel pH 1,8-éftékre állítottunk be. Átáramlási sebesség 13 ml/óra. Frakcióméret 4 ml. A frakciókat 280 m/i-nál mért abszorpció alapján határozzuk meg. Ily módon 9 elúciós csúcsot kapunk: A hatóanyag túlnyomó többségét a D, E és F frakciók tartalmazzák (7,9 mg a B csúcs 2,6%-a). Az előbb említett frakciókat Whatman 3 MM papírra visszük fel 22 cm szélességben és pH 1,8 értéknél 1 500 V feszültséggel 90 percen át elektroforézisnek vetjük alá. Anyagterhelés 0,5 mg/2 cm. A puffer összetétel: 40 ml 98%-os hangyasav és 160 ml jégecet desztillált vízzel 2 literre kiegészítve. A hatóanyag reakciója ninhidrinre pozitív és a kiindulási vonaltól egyenletesen vándorol a pozitív pólus irányába (5 cm/90 perc/l 500 V). Az elektroforézissel elkülönített terméket vízzel eluáljuk és megvizsgáljuk biológiai aktivitását. Az izolált termék kitermelése száraz mirigyporra számítva 0,01 - 0,02%. Az ily módon kapott Litoralon koncentrátum biológiai hatékonyságát a következő kísérlettel bizonyítottuk: 3/ig/120g szubkután adagolás esetén patkányokban a vércukortartalom szignifikánsan csökkent, csirkeembriók szemlencséjében a jelzett szulfát beépülés sziginifikánsan fokozódott. 7/ig hatóanyag-tartalmú tabletták napi háromszori adagolás esetén enyhültek, vagy megszűntek a rhino-laryngo-pharingitisben, ozaenában, keratoconjunctivitis siccában, parodontózisban, izohypotóniában szenvedő betegek tünetei. A készítmény adagolása szignifikánsan emelte a szérum A vitamin szintjét. 5. Humán gyógyszerkészítmények a) Litoralon tabletták: 35 Anyagszükséglet 1 000 db tablettához: 40 5!) 60 65 Litoralon 0,01 g* Laktóz -83,99 g PVP 3,00 g (polivinilpirrolidon) Spiritus concentratiss. 4,00 ml Aqua destillata 9,00 ml Talcum 2,00 g Amylum solani 10,00 g Magnesium stearinicum ,1.00g A különböző tisztasági fokú Litoralont tartalmazó koncentrátumokból tablettánként az alábbi mennyiségeket alkalmazzuk hatóanyagként: a vizes liofilizált extraktumból 8-10 mg/tabletta, a fehérjementesített, liofilizált extraktumból 2 ing/tabletta, a gélfiltrált koncentrátumból 0.3 0.5 mg/tabletta. Feldolgozási technológia: I. Granuláló oldat készítése: a poiivinilpirrolidont (PVP) 4 ml alkohol és 6 ml víz elegyében feloldjuk. 7
