169449. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7béta-(D-2-amino-2-fenil- acetamido)- 3-metil-3-cefem-4-karbonsav előállítására
169449 konyrétegkromatográfia) módszerrel, a referencia anyaghoz viszonyítva, igazoltuk. A biopotenciál adatok azt bizonyítják, hogy a termék 90%-osnál tisztább. A korábbi kutatásaink szerint előállított kissé gyengébb minőségű cefalexint könnyen átkristályosítottuk (70%-os termeléssel) analitikailag tiszta, vízben viszonylag oldhatatlan monohidráttá a pH 25 C -on történő beállításával 1-butanol/víz elegyben. A találmány tárgyát képező eljárást a következő példák mutatják be, anélkül, hogy az oltalmi kört korlátoznák. A hőmérsékleti adatokat C -bán adjuk meg. 1. példa Penicillin V átalakítása dezacetoxi-cefalosporin, V-vé Pen-V-szulfoxid-metoximetiléterből gyűrű nyitással A) Pen-V-szulfoxid-metoximetil-észter (PVSOMM E) (metoximetil-6-fenoxiacetamido-penicillinát-szulfoxid) előállítása 45 ml trietilamint adunk 109,8 g (0,285 mól) penicillin-V-szulfoxidmonohidráthoz (3 544 581 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalom) 500 ml diklórmetánban, 0 és 5 C közötti hőmérsékleten. Ezután elegendő mennyiségű molekulaszitát (Linde Type 4A) adunk a hidrát-víz megkötésére. A keveréket 20 percig keverjük, majd 30 ml klórmetil-metilétert adunk a reakciókeverékhez. Az így nyert keveréket 0 és 5 C közötti hőmérsékleten 2 órán keresztül keverjük. A molekulaszitát szűréssel eltávolítjuk és az oldatot kétszer mossuk 100-100 ml hideg vízzel. A szerves oldatot csökkentett nyomáson kb. 300 ml-re betöményítjük, majd 1000 ml-re hígítjuk n-heptánnal. így csapadék keletkezik. A szuszpenziót 2 órán keresztül 0 és 5 C közötti hőmérsékleten keverjük, szűrjük, és az így előállított sárga szilárd anyagot újra feloldjuk 500 ml 2-propanolban 40-50 C°-on, heptánnal 2000 ml-re hígítjuk és lehűtjük, 0-5 C -on tartjuk 3 órán keresztül. A szilárd anyagot kiszűrjük, 600 ml 50/50 2-propanol heptán eleggyel mossuk és 35 C -on 18 órán keresztül szárítjuk. 107 g (93%-os kitermelés) fehér, kristályos-PVSOMME-t (op.: 113,5-114,5 C°) állítunk elő, amelynek vékonyrétegkromatogramja egy foltos, infravörös és NMR spektrum alapján tiszta, és az adott szerkezetnek megfelel. B) Pen-V-szulfoxid-metoximetilészter (PVSOMME)-ből dezacetoxicef-V-metoximetilészter (DACVMME) (metoximetü-7-fenoxi-acetamido-3--metilcef-3-ém-4-karboxilát) előállítása gyűrűnyitással.. 1. módszer 20 g (0,050 mól) PVSOMME-t,' 10 g porított molekulaszitát (Linde type 4A) és 2,5 g szilárd p-toluolszulfonsav-piridinsót 200 ml dioxánba adagolunk, a keveréket keverjük és visszacsepegés hőmérsékletére hevítjük 5 órán keresztül. Lehűlés után szűrjük, a keveréket csökkentett nyomáson bepároljuk olajjá, majd felvesszük 400 ml diklórmetánban. Ezt az oldatot háromszor mossuk 5 200-200 ml vízzel, aktív szénen szűrjük, és a szűrletet szárítjuk, majd csökkentett nyomáson bepárolva 15 g habos szilárd anyagot állítunk elő* A vékonyrétegkromatográfia alapján a termék főtermékként dezacetoxi-cef-V-t tartalmaz, tekintélyes mennyiségű dekarboxilált anyag és csekély mennyiségű át nem alakult PVSOMME mellett. Ebből a szilárd anyagból a gyűrűzárás körülményei között 72%-os kémiai tisztaságú 7-ADCA keletkezik 15 32%-os kitermeléssel. 2. módszer Az 1. módszer szerinti körülményeket ismételjük meg, 2 g piridin-tozilát sót használva, 4 órás reakcióidő mellett. A-szűrés és bepárlás után a metilénkloridos oldatot sorra 100 ml vízzel, 100 ml pH = 7-es puffer oldattal és 100 ml vízzel mossuk. A szárított szerves oldatot bepárolva 18 g sárga habos szilárd anyagot állítunk elő. A vékonyrétegkromatográfia kb. 65% DACVMME-t mutat. Egy 100 mg-os mintát 10 ml 50/50 aceton és pH = 7-es pufferoldatban oldunk, DACV biológiai méréssel 6100 mcg/ml hatást mutat. A habos szilárd anyagból 2 g mintát 60 ml diklórmetánban oldunk 25 C -on és 30 percig reagáltatjuk 1 g meta-klórbenzoesawal. Az oldatot 30 ml vízzel mossuk és 30 ml pH = 7-es pufferoldattal. A szerves fázist szárítjuk, bepároljuk olajjá, és az olajat aceton tartalmú éterrel trituráljuk. Az így előállított szilárd kristályokat szűrjük, szárítjuk. 1,1 g (52%-os kitermelést) dezacetoxicefalosporin-V-szulfoxid-metoxi-metilésztert állítunk elő, amely minden tekintetben azonos az autentikus anyaggal. 20 25 30 40 3. módszer Az előző módszerhez hasonló módon, 5 g .. PVSOMME, 50 ml dioxán, 7,5 g molekulaszita és 0,5 g metánszulfonsavpiridin-só keverékét 2 órán keresztül visszacsepegés hőmérsékletén hevítjük. Szűrés és bepárlás után az előállított olajat 50 ml diklórmetánban vesszük fel. Ezt az oldatot kétszer 50 mossuk 30-30 ml pH = 7-es pufferoldattal, majd 30 ml hideg vízzel, aktív szénnel kezeljük, szárítjuk és bepároljuk. így 3,5 g sárga habos szilárd anyagot állítunk elő. Tisztítás után 0,75 g 7-ADCA-t alítunk elő (27%-os kitermelés) amelynek hatóanyag-55 tartalma 870 meg kémiai analízissel mérve. 4. módszer 0,25 g piridin-tozilátot 10 g PVSOMME-hoz g« adunk 100 ml 1,2-diklóretánban. Az így előállított keveréket 12 órán keresztül visszacsepegés hőmérsékletén hevítjük. Vékonyrétegkromatográfia alapján a reakció nem ment végbe teljesen. 0,5 g katalizátor hozzáadása után a visszacsepegést foly-65 tatjuk még 4 órán keresztül. Lehűlés után a keveréket kétszer 50 ml hideg savas (pH =1,5) vízzel 3
