169437. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szedatív hatású peptidek előállítására
21 b) H-D-Phe-Lys(Boc)-PPA-hidroklorid 168437 22 H-Met(-*0)-Glu-His-D-Phe-Lys-PPA-acetát Rf x = 0,19 H-Met(-*)2 )-Glu-His-D-Phe-Lys-PPA-acetát Rfx = °>21 xR f Bu : Py : Ac : víz rendszerben [4 : 3/4 : 1/4 : 1], szilíciumdioxidon. 6. Hasonlóképpen eljárva állítjuk elő az alábbi acetátokat: H-Met-Glu-His-D-Phe-Lys-PEA-acetát 10 15 20 Az a) lépésben előállított dipeptidamid 9,07 g-ját feloldjuk 100 ml tisztított dimetilformamidban és 4 ml 4n sósavban. 0,9 g, 10% palládiumot tartalmazó aktív szén hozzáadása után az elegyen hidrogéngázt buborékoltatunk át 4 órán át, majd az elegyet szűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk. Rf Bu : Ac : víz rendszerben (4:1:1) = 0,60, szilíciumdioxidon. c) Boc-Met-Glu(OtBu)-His-D-Phe-Lys(Boc)-PPA 2,34 g Boc-Met-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 -ot az 1. a) példa szerinti módon eljárva aziddá alakítunk. Ezután az azid oldatához annyi oldószert adunk, hogy a térfogat pontosan 40 ml legyen (4 mmól azidot tartalmazó oldat). Az azidos oldat 10 ml-éhez hozzáadjuk a b) lépés szerinti módon előállított peptid-származék 1 mmól mennyiségét 10 ml dimetilformamidban, majd a pH-t N-etilmorfolinnal 6,9 - 7,0-ra alítjuk be. Az elegyet 70 órán át keverjük, majd a keletkező csapadékot leszűrjük és a szűrletet vákuumban száiazra pároljuk. A maradékot vízzel elkeverjük és szárítjuk. A keletkező peptid-származékot meleg etilacetátból kristályosítjuk. Rf To : EtOH (8:2) = 0,37, szilíciumdioxidon. d) H-Met-Glu-His-D-Phe-Lys-PPA-acetát A c) lépésben kapott peptid-származék 0,5 g mennyiségéről az l.b)példa szerinti módon eltávolítjuk a védőcsoportokat. A trifluoracetátot acetát-alakban levő DowexX-8 segítségével a megfelelő acetáttá alakítjuk. Rf Bu:Py:Ac:víz rendszerben [2:3/4:1/4: : 1] = 0,40, szilíciumdioxidon. 40 e) H-Met-Glu-His-D-Phe-Lys-PPA-acetát oxidációja A 2. példa szerinti módon eljárva a metionin-szulfoxid és a -szulfon analógokat kapjuk. 45 Mindkét terméket Craig-féle ellenáramú megosztás segítségével tisztítjuk Bu : Ac : víz rendszerrel (4:1: 1). 25 30 35 50 55 60 Dam-Glu-His-D-Phe-Lys-Amf-acetát Dam(-K))-Glu-His-D-Phe-Lys-Amf-acetát Dam(-+02 )-Glu-His-D-Phe-Lys-Amf-acetát Rf x =0,48 Rf xx =0,42 Rfxx = 0,44 H-Met-Glu-His-D-Phe-Lys-Amf-ocetát Rf x =0,40 65 xR f Bu : Py : Ac : víz rendszerben [4 : 3/4 : 1/4 : 1], szilíciumdioxidon. xxR f Bu : Ac : víz rendszerben (4:1 : 1), szilíciumdioxidon. 12. példa N-Acetil-Met-Glu-His-D-Phe-Lys-Phe-OH-acetát A kiindulási anyagok előállításánál az A) 1. pontban ismertetett módon N-acetil-Met-N2 H 3 -ot H-Glu(OtBu)-His-OMe-dihidrokloridhoz kapcsolunk az „azid-kondenzáció" módszerével, majd a kapott peptidésztert az ugyancsak a kiindulási anyagok előállításánál az A) 2. pontban ismertetett módon a megfelelő hidraziddá konvertáljuk. Ezt a hidrazidot azonnal feloldjuk dimetilformamidban, majd a 8. f) példában ismertetett H-D-Phe-Lys(Boc)-Phe-OH pepiidhez kapcsoljuk a 8. g) példában ismertetett módon. Az így kapott védett pepiidről ezután a védőcsoportokat a 8. h) példában ismertetett módon lehasítjuk, amikor is a cím szerinti peptid-acetátot kapjuk. Kitermelés: 35% (akiindulási N-acetil-Met-N2 H 3 -ra vonatkoztatva). Rf Bu : Py : Ac : víz rendszerben [4 : 3/4 : : 1/4 :1] = 0,30, szilíciumdioxidon. 13. példa Gyógyászati készítmények a) Szilárd gyógyászati készítmény (tabletta) 2,5 mg karboximetilcellulózból, 20 mg keményítőből és 68,5 mg laktózból granulátumot készítünk, majd a granulátumhoz 7,5 mg H-Mef-Glu-His-D-Phe-Lys-Phe-OH-acetátot, 1 mg talkumot és 0,5 mg magnéziumsztearátot keverünk, ezután pedig a kapott keveréket közel 100 mg súlyú tablettává sajtoljuk. b) Kompozíció injekcióhoz A H-Met(-K)2 )-Glu-His-D-Phe-Lys-Phe-OH-acetát peptidből 100 mg-ot feloldunk 10 ml olyan vízben, amelyet nitrogéngázzal telítettünk és pH-ját sósavval 4-re beállítottuk. A kapott oldatot membrán-, szűrés útján sterilizáljuk. A steril oldatból 0,5— - 0,5 ml-t ezután 20 db 2 ml térfogatú ampullákba töltünk, majd liofilizáljuk az oldatot. 11
