169326. lajstromszámú szabadalom • Eljárás peptidek előállítására aktivészteres módszerrel katalizátorok hozzáadása útján
17 169326 18 segítségével oldás-kicsapás útján tisztítjuk. Hozam 75,5 g (77%), olvadáspont 166-170C°, [«OD = +1.8 (c = 1, dimetüformamidban). d) H-GluíOBuVAsnCKbty-TyríBu*)-^ 5 74,7 g (83,3 mmol) Z-Glu(OBu*)-Asn(Mbh)-Ty^Bu^-OH-t 400 ml jégecet és 400 ml metanol elegyében feloldunk, majd b) példa szerint katalitikusan hidrogénezzük és feldolgozzuk! Tisztítás 10 céljából az anyagot vízzel egyszer felforraljuk, leszívatjuk és megszárítjuk. Etilacetátos felforralással. az anyag még tovább tisztítható. Hozam 53,4 g (84%), olvadáspont 221-223 C°, [a]D=+33,l, (c= 1, jégecetben). 15 .7. példa Z-Gln-Gly-Leu-Val-NH2 szintézise 20 (Szekretin szekvencia) a) Z-Leu-Val-NH2 13 g (66 mmol) H-Val-NH2 • HBr 180 ml di- 25 metilformamidban készült oldatához 8,91 g 1-hidroxi-benzo-triazolt, 8,6 ml N-etilmorfolint és 30,8 g (60 mmol) Z—Leu-OPcp-t adunk. Az elegyet szobahőmérsékleten 10 percig keverjük, végül nagyvákuumban bepároljuk. A maradékot egymást kö- 30 vetően 2n nátriumkarbonát oldattal, vízzel, 2,5%-os káliumhidrogénszulfát oldattal, végül ismét vízzel elkeverjük, leszívatjuk és 50 C -on foszforpentoxid felett szárítjuk. Azonos eredményhez jutunk, ha a fenti 1-hidr- 35 oxi-benzo-triazol helyett a) 3-hidroxi-4-oxo-3,4-dihidro-kinazolint, b) l-hidroxi-5,6-dimetil-benzo-triazolt vagy c) 1-hidroxi-piridont használunk. 40 b) H-Leu-Val-NH2 • HCl 21, g (57,8 mmol) Z-Leu-Val-NH2 200 ml dimetilformamid és 200 ml metanol elegyében ké- 45 szült szuszpenziójához Pd(OH)2/BaS0 4 -katalizátort adunk. Keverés közben a reakcióelegyen hidrogént vezetünk keresztül, miközben 1 n metanolos sósav oldat becsepegtetéssel önműködő titrálóberendezés segítségével 5 pH-értéket tartunk fenn. Miután több 50 HCl oldatot az elegy már nem vesz fel, a katalizátort leszívatjuk és a szűrletet bepároljuk. A maradékot éterrel eldörzsöljük; leszívatjuk és 50C°-on szárítjuk. A hozam 15,4 g (100%), olvadáspont 138—140 C°. A vegyület vékonyréteg-kromatog- 55 ráfiai elemzéssel egységes. [Szilikagél, futtatószer : butanon/piridin/víz/ecetsav (70 :15 :15,2)]. c) Z-Gly-Leu-Val-NH2 roljuk. A maradékot 2n nátriumkarbonát oldattal jeldörzsöljük, leszívatjuk és vízzel alaposan mossuk. A reakcióelegyet foszforpentoxid felett szárítjuk, majd eülacetátban felforraljuk. Tisztítás céljából a terméket tetrahidrofurán-petroléter felhasználásával oldás-kicsapás útján tisztítjuk. Hozam 21,8 g (90%), olvadáspont 184-186 C°, [a]D = -12,8 (c= 1, dimetilacetamidban). d) H-Gly-Leu-Val-NH 2 -HCl 20,0 g (47,6 mmol) Z-Gly-Leu-Val-NH2-t b) szerint 1 :1 arányú 200 ml metanol-dimetilformamid elegyben katalitikusan hidrogénezünk, majd feldolgozunk. A termék kevéssé higroszkópos, így tisztítás céljából metanol/éter eleggyel kezelve kicsapjuk. A tisztított terméket foszforpentoxid és paraffinforgács felett szárítjuk. Hozam 13,5 g (88%), olvadáspont 209-211 C°. e) Z-Gln-Gly-Leu-Val-NH2 3,23 g (10 mmol) H-Gly-Leu-Val-NH2 • HCl, 1,3 ml N-etilmorfoliri és 1,35 g (10 mmol) 1-hidroxi-benzo-triazol 20 ml dimetüformamidban készült oldatához 4 g (10 mmol) Z-Gln-ONp-t adunk és 10 percig állni hagyjuk. Gélszerű csapadék válik ki. Ezt éterrel felhígítjuk és a kicsapott anyagot leszívatjuk. Ezután rövid ideig szárítjuk és 2 n nátriumkarbonát oldattal keverjük. Vízzel, 5%-os káliumhidrogénszulfát-oldattal, majd ismét vízzel mossuk, foszforpentoxid felett szárítjuk és etilacetáttal felforraljuk. Az elegyet szobahőmérsékletre hagyjuk lehűlni, leszívatjuk és etilacetát és petroléter felhasználásával utómosásnak vetjük alá. A terméket 40—50 C közötti hőmérsékleten foszforpentoxid és paraffinforgács felett szárítjuk. Hozam 5 g (91%), olvadáspont 242-244 C, [a]è2 = -25,2 (c = 1, jégecetben). Fentiekkel azonos eredményhez jutunk, ha a fenti 1-hidroxi-benzo-triazol helyett a) 3-hidroxi-4-oxo-3,4-dihidro-kinazolint, b) l-hidroxi-5,6-dirnetil-benzo-triazolt vagy c) 1-hidroxi-piridont használunk. 60 15,4 g (57,8 mmol) H-Leu-Val-NH2 • HCl-t 7,52 ml N-etilmorfolinnál és 7,88 g 1-hidroxi-benzo-triazollal együtt 120 ml dimetüformamidban feloldunk. Az oldathoz 22,5 g Z-Gly-OTcp-t adunk, 5 percig állni hagyjuk, majd nagyvákuumban bepá- 65 8. példa Z-Pro-Ile—Gly-NH2 szintézise a) Z-Ile-Gly-NH2 44,4 g (0,1 mól) Z-Ite-OTcp-t és 11 g (0,1 mól) H-Gly-NH2 • HCl-t 1,6 g (10 mmól) 3-hidroxi-4-oxo-3,4-dihidro-kinazolinnal és 130 ml N-etilmorfolinnal együtt 700-800 ml dimetüformamidban feloldunk. Ezután a reakcióelegyet nagyvákuumban bepároljuk, a maradékot telitett nátriumhidrogénkarbonát oldattal eldörzsöljük, leszívatjuk, vízzel mossuk, szárítjuk és további tisztítás céljából dimetüformamidban feloldjuk, éter/petroléter 1 : 1 arányú elegyét felhasználva kicsapjuk. Hozam 28,5 g, olvadáspont 202 C°, [a]D = +8,1 (c= 1, dimetilacetamidban). 9
