169326. lajstromszámú szabadalom • Eljárás peptidek előállítására aktivészteres módszerrel katalizátorok hozzáadása útján
15 169326 í 16 4. példa Z-Phe-Val-OMe a) 1-hidroxi-benzo-triazol és Z-Phe—OPcp 5 ekvivalens mennyiségének felhasználásával 0,92 g (5,5 mmol) H-Val-OMe • HCl, 0,72 ml N-etilmorfolin és 675 mg (5 mmól) 1-hidroxi-benzo-triazol 10 ml dimetilformamidban készült olda- 10 tához 2,75 g (5 mmól) Z-Phe-OPcp-t adunk. 5 percig keverjük, nagyvákuumban bepároljuk, a maradékot etilacetát és 2n nátriumkarbonát oldat között megosztjuk, egyszer 5%-os káliumhidrogénszulfát-oldattal, háromszor 2n nátriumkarbonát-ol- 15 dattal és egyszer vízzel kirázzuk, vízmentes nátriumszulfát felett megszárítjuk, bepároljuk és a maradékot petroléterrel eldörzsöljük. Hozam 2,08 g, olvadáspont 99-104 C°. Etilacetát-petroléter elegyből történő átkristályosítás után a hozam 20 1,7 g (83%), olvadáspont 112-114 C°. b) 0,1 ekvivalens mennyiségű 1-hidroxi-benzo-triazol és Z-Phe-OTcp felhasználásával 25 0,92 g (5,5 mmól) H-Val-OMe • HCl, 0,72 ml N-metilmorfolin és 67,5 mg (0,5 mmól) 1-hidroxi-benzo-triazol 10 ml dimetilformamidban készült oldatához 2,4 g (5 mmól) Z-Phe-OTcp-t adunk. A keveréket 5 percig keverjük és a) szerint feldől- 30 gozzuk. Hozam 1,66 g (81%), olvadáspont 112-114C0. c) Ekvivalens mennyiségű 1-hidroxi-benzo-triazol-nátriumsó és Z-Phe—ONp felhasználásával 35 0,92 g (5,5 mmól) H-Val-OMe • HCl 10 ml dimetilformamidban készült oldatához 865 mg (5,5 mmól) 1-hidroxi-benzo-triazol-nátriumsót és 2,1 g (5 mmól) Z-Phe-ONp-t adunk. A reakció- 40 elegyet 5 percig keverjük és a) példa szerint feldolgozzuk. Hozam 1,65 g (80%), olvadáspont 116 C°. 45 5. példa Z-Val-Val-OMe szintézise 0,92 g (5,5 mmól) H-Val-OMe -HCl 10 ml dimetilformamidban készült oldatához 865 mg (5,5 mmól) 1-hidroxi-benzo-triazol-nátriumsót és 50 1,87 g (5 mmól) Z-Val-ONp-t adunk. Az elegyet 5 percig keverjük, majd 4 a) példa szerint feldolgozzuk. Hozam 1,66 g (91%), olvadáspont 108-110 C°. 55 6. példa Z-Leu-GluíOBuVAsníMbrO-TyKBuO-OH szintézise (Inzulin-A-lánc szekvencia) 60 I. Z-Leu-GHOBu^-AsníMbrO-TyríBu^-OH 1,53 g (2 mmól) H-GlutOBuVAnsíMbh)-TyKBu^-OH és 270 mg (2 mmól) 1-hidroxi- 65 -benzo-triazol 5 ml dimetilformamidban készült oldatához 1,5 g Z-Leu-OPcp-t (2,2 mmól) adunk, az elegyet 10 percig állni hagyjuk és nagyvákuumban bepároljuk. A maradékot 2 n nátriumkarbonát-oldattal eldörzsöljük. A nátriumkarbonát-oldatot dekantáljuk és a maradékot vízzel eldörzsöljük. Ezután a vízzel eldörzsölt maradékot leszívatjuk, a szűrt terméket 2,5%-os káliumhidrogénszulfát-oldat és etilacetát között megosztjuk. Az etüacetátos oldatot megszárítjuk és bepároljuk. A maradékot éter/petroléter (1 :1) elegyével eldörzsöljük és leszívatjuk. Hozam 1,8 g (89%), olvadáspont 174-176 C°. A kapott vegyület vékonyréteg-kromatográfiai analízis alapján azonos az olyan mintával, amely analóg módon Z-Leu-OSu-val lett előállítva. A reakcióidő 24 óra, a hozam 84%. Fentivel azonos eredményre jutunk, ha 1-hidroxi-benzo-triazol helyett a) 3-hidroxi-4-oxo-3,4-dihidro-kinazolint, b) l-hidroxi-5,6-dimetil-benzo-triazolt vagy c) 1-hidroxi-piridont használunk. II. H-GluíOBu^-AsnOlbh^-TyríBu^-OH kiinduló anyag előállítása a) Z-Asn(Mbh)-Tyr(Bu*)-OH 100 g Z-Asn(Mbh)-Tyr(Bu*)-OMe-t (0,138 mól) [Chem. Ber. 103, 2041-2051 (1970)] 770 ml dioxán és 200 ml víz elegyében szuszpendálunk. 37C°-on lassan 138 ml In nátriumhidroxidot csepegtetünk hozzá (indikátorként timolftaleint használunk). A reakció befejezése után az elegyet 300 ml 2 n citromsawal megsavanyítjuk. A kivált terméket leszívatjuk és vízzel mossuk. Metanol/víz segítségével oldás kicsapás útján tisztítjuk. Hozam 88 g (90%), olvadáspont 212-213 C°, [a]D = +7,6° (c = 1, dimetilformamidban). b) H-Asn(Mbh)-Tyr(Bu')-OH 87,5 g (0,123 mól) Z-AsníMb^-TyKBu^-OH jégecetben készült oldatán, amely kevés Pd(OH)2/ /BaS04 -katalizátort tartalmaz, hidrogéngázt vezetünk keresztül, míg a széndioxid fejlődés megszűnik. A reakcióelegyet bepároljuk és a maradékot telített nátriumacetát oldattaji alaposan eldörzsöljük. Az elegyet leszívatjuk, foszforpentoxid felett szárítjuk, majd tetrahidrofurán/petroléter segítségével oldás-kicsapás útján tisztítjuk. Hozam 63,5 g (90%), olvadáspont 207-209C°, [a]D = +11,1° (c= 1, jégecetben). c) Z-GluíOBu^-AsníMbh^TyríBu'í-OH 63,0 g (0,109 mól) H-AsníMbh^TyríBu^-OH 250 ml dimetilformamidban készült oldatához szobahőmérsékleten 47,4 g (0,109 mól) Z-Glu(OBu*)-OSu-t adunk és az elegyet 20 óra hosszat szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Ezután az anyagot víz hozzáadásával kicsapjuk, foszforpentoxid felett szárítjuk, majd etilacetát/petroléter 8
