169321. lajstromszámú szabadalom • Eljárás biológiailag aktív kondroitinszulfát előállítására porctartalmú szervekből

169321 5 O 1. táblázat Sertés-gégéből nyert kondroitinszulfát készítmények összehasonlítása Előállítás módja Enzimes Frakcionáló Frakcionáló kezeléssel kioldással kioldással kezdve kezdve kezdve 20 Anson 20 Anson 20 Anson E + E + E + 300 000 SKB 300 000 SKB 28 000 SKB Ea Ea Ea Termelés, g/kg szerv N/S [nitrogén/kén] Uronsav, %b Hexozamin, %c Elnyelés 800 nm/850 nm Viszkozitás ' (intrinsic) Forgatás (a)o° Biológiai aktivitás0

: lipoproteinlipáz, E Fibrinolízis, E 7,5 0,64 0,27 -19 0 2,7 19,5 0,58 0,25 -20 1,2 8,5 12,0 0,35 0,42 1,03 30,5 31,7 30,7 23,4 25,1 24,0 0,63 0,80 -23 0,7 6,0 a 1

kg sertésgége subtilis eredetű amiláz aktivitása. feldolgozásánál alkalmazott B. 40 enzimkészítmények proteáz és b Meghatározás Bitter és Muir szerint [Analyt. Bióchem., 4, 330 (1962)]. 45 c Meghatározás Boas módszerével [J. Biol. Chem., 204, 555 (1955)]. d A biológiai aktivitás mérése 2,5 - 3,5 kg testsúlyú hím nyulakon történt a készítmények fiz. sós. oldatának i. v. beadásával. Dózis: 80 mg/testsúly kg. Vérvétel a beadás előtt és után 4 órával. A szérum-mintákban lipoprotein-lipáz aktivitást Wilson és mt. módszerével [J. Lipid. Res., 14, 124 (1973)] mértük. A fíbrinolitikus aktivitás mérése 1%-os nem hőkezelt fibrinlemezen történt (rétegvastagság 1-1,2 mm) [Arch. Bioch. Biophys., 40, 346 (1952)]. 1 E-nyi az a lipoprotein-lipáz aktiválás, amely 72 órás, 37 C -on történt inkubálás során 1 mm szélességű feltisztulási gyűrűt eredményez az agar gélen. A fibrinolízis szempontjából az aktivitás az elfolyósítótt fibrinkorong átmérőjét jelzi mm-ben kifejezve. 50 55 60 65 A találmány szerinti eljárás további jelentős előnye, hogy a sós-vizes kivonatolással megoldható a lesózással konzervált szervek feldolgozása is. Az eljárás további előnye, hogy a sós-vizes kivonatolás során a szervekben található és tisztítással el nem távolítható zsír élesen elkülönül és a kivonat tetején tömörülve könnyen leválasztható. Az eljárás szerinti frakcionáló kivonatolás körülményei között a bakteriális fertőzés és bomlás veszélye nagymértékben csökken, és előzetesen Seitz lapon átszűrt enzim alkalmazása esetén biztonságosan készíthető a VI. Magyar Gyógyszerkönyvi előírásnak megfelelő csíraszámú készítmény. Az eljárással nyert termék biológiai értékét jelzi, hogy beadását követően - bizonyos időbeni eltolódással - olyan lipoprotein-lipáz aktivitás jelenik meg a vérben, mint az ismert heparin hatására. A heparinhoz képest előnye, hogy fibriiiolízist fokozó hatása is van. A termék gyakorlatilag atoxikus, mivel 5 g/testsúly kg dózisban intraperitoniálisan beadva sem okoz toxicitásra utaló tüneteket. A találmány szerinti eljárás foganatosítására az alábbi kiviteli példákat adjuk meg. 3