169317. lajstromszámú szabadalom • Eljárás glükoamiláz előállítására encomycopsis bispora tenyészetből
5 169317 6 űrtartalmú rázott lombikba viszünk, amely 100 ml 5 pH-jú vizes szuszpenziót tartalmaz. A szuszpenzió 2% (50% szárazanyagtartalmú) kukoricalekvárt, 0,5% KH2 P0 4 -ot és 1% kukoricakeményítőt tartalmaz. A szuszpenziót 24 órán át 25 C° hőmérsékleten rázzuk (200 fordulat/perc). Ebből a micélium alakban jelenlevő előtenyészetből 1 ml-t 500 ml űrtartalmú rázott lombikba adunk, amelyben 100 ml ugyancsak 5 pH-ra beállított 2% kukoricalekvárt, 3% repceolajat, 1% kukoricakeményítőt és 0,5% KH2 P0 4 -ot tartalmazó vizes szuszpenzió van. A szuszpenziót 5 napig rázzuk (200 fordulat/perc). Az 1. táblázatban a tenyésztés folyamán elért glükoamiláz-aktivitásokat a 60 536 számú NDK és az 1 380 854 számú francia szabadalmi leírásokban ismertetett eredményekkel hasonlítjuk össze. 2. példa Az 1. példa szerint járunk el, azzal a különbséggel, hogy az alkalmazott táptalaj 3%, kukoricacsíraolaj kinyeréséből származó friss olajpogácsát tartalmaz. A tenyésztés során elért glükoamiláz-aktivitások a következők: 2. táblázat -4> c H 2 c Nemzetközi egységek/ml repceolaj hozzáadása nélkül 3% repceolaj adalékkal 3% olajpogácsa-adalékkal 4 5 35,0 42,5 119,0 156,6 118,5 158,5 3. példa Nemzetközi egységek/ml 3% repceolaj-3% repce3% repcerepceolaj adalék olajolaj._H hozzákimutatadalék adalék *0> ••-• e adása ható peroxidperoxidCO 4-» t-l nélkül peroxidszam szám í C9 •4-» SO száni 0,7 1,6 tS S nélkül 4. példa 8 hetes Endomycopsis bispora ferdeagar tenyészetből „kacs" segítségével kb. 1 mm3 mennyiségű 5 micéliumrészt 20 ml Wickerham-féle táptalajba viszünk és 100 órán át 25 C°-on inkubáljuk. A képződő micéliumszuszpenziót egy 2 literes lombikba -amelybe előzőleg 400 ml táptalajt helyeztünk (a táptalaj összetétele: 1% kukoricalekvár, 1% ku-10 koricakeményítő, 0,5%o KH 2 PO 4 , pH = 5)- visszük és 24 órán át 28 C° hőmérsékleten egy rázóasztalon inkubáljuk. Végül a lombik tartalmával 20 liter termelő táptalajt oltunk be. A termelő táptalaj üvegből készült fermentációs edényben 15 van. A termelő táptalaj összetétele: 1% kukoricalekvár, 1% keményítő, 1% repceolaj^ 0,5% KH2 P0 4 : pH-értéke 5,3, hőmérséklete 30 C . Levegőztetés: 1:1, kettőskeverő fordulatszáma 340 fordulat/perc. Az alábbi aktivitásokat mutattuk ki: 20 25 30 35 40 Az 1. példa szerint járunk el. Az alkalmazott táptalaj 3%, kimutatható peroxidszám nélküli repceolajat, az összehasonlításul felhasznált táptalaj egyike 0,7 peroxidszámú repceolajat, a másik 1,6 peroxidszámú repceolajat tartalmaz. 45 A tenyésztés során elért glükoamiláz-aktivitásokat: 3. táblázat 50 55 60 4. táblázat Az inkubáció időtartama Glükoamiláz-aktivitás nap IE/ml 1 2 3 4 5 6 6,5 23 71 103 115 158 209 225 30,0 46,7 28,0 29,5 5. példa Az 1. példa szerint járunk el, azzal a különbséggel, hogy a táptalaj 3% disznózsírt tartalmaz, amelyhez előzőleg 1 g zsírra számítva 1000 ng tokoferolt adunk. A tenyésztés során elért glükoamiláz-aktivitások: 5. táblázat Tenyésztési időtartam Glükoamiláz-aktivitás 73 4 '5 38,0 48,0 112,8 62,2 185,2 84,4 61,8 88,2 65 110 162 3
