169159. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszichofarmakológiailag aktív peptidek előállítására
21 169159 22 szabad amid Rf-értéke (szilikagélen, az 5:3:2 arányú Am-Py-víz oldószer-rendszerben): 0,23. A két lépés összhozama: 78%. 4. H-Phe-Lys(Boc)-Phe-OH 0,5 g peptid-észtert, amelyet a fenti 2. szakaszban leírt módon állítottunk elő, 6 ml metanolban oldunk, majd 1 mólekvivalens nátrium-hidroxidot adunk az oldathoz. Az elegyet 1 óra hosszat keverjük, majd enyhén megsavanyítjuk, aminek hatására a szabad tripeptid kiválik az oldatból. Az így kapott tripeptid Rf-értéke (szilikagélen az 5:3:2 arányú Am-Py-víz oldószer-rendszerben): 0,18. Hozam: 70%. P) H-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-OtBu 1. Z-D-Lys(Boc)-Phe-OtBu 10,03 g Z-D-Lys(Boc)-ONP észtert 50 ml dimetilformamidban oldunk. Ezt az oldatot —20 C° hőmérsékletre hűtjük és ezen a hőmérsékleten hozzáadjuk 4,1 g H-Phe-OtBu 75 ml dimetil-formamiddal készített oldatához. A reakcióelegyet 0 C° hőmérsékleten 1 óra hosszat, majd 20 C°-on 20 óra hosszat keverjük, azután szárazra pároljuk. A kapott sárga színű maradékot etilacetát és víz elegyében oldjuk, majd az elkülönített etilacetátos oldatot vizes 5%-os kálium-karbonát-oldattal, azután vízzel, majd vizes 5%-os citromsav-oldattal, végül ismét vízzel mossuk. Az elkülönített szerves oldószeres fázist szárítjuk, majd szárazra pároljuk. A maradékot etilacetátban oldjuk és az oldathoz annyi 40-60 C° forráspont-tartományú petrolétert adunk, amennyi elegendő az oldat megzavarosodásának előidézésére. Az elegyet állni hagyjuk és a képződött csapadékot szűréssel elkülönítjük. Hozam: 8,5 g. Az így kapott termék Rf-értéke (szilikagélen, a 9 : 1 benzol-etanol oldószer-rendszerben): 0,64. 2. H-D-Lys(Boc)-Phe-OtBu 3 g fenti módon kapott dipeptidet 60 ml metanolban oldunk. Ezután 10%-os palládiumos aktívszén-katalizátort adunk az oldathoz, majd hidrogén-gázt buborékoltatunk az elegyen keresztül, mindaddig, amíg további széndioxid-fejlődés már nem tapasztalható (ez körülbelül 2 órát vesz igénybe). A katalizátort ezután kiszűrjük, a szűrletet bepároljuk, száraz maradékként habszerű alakban kapjuk a H-D-Lys(Boc)-Phe-OtBu terméket, amelynek Rf -értéke (szilikagélen, a 9:1 arányú toluol—etanol oldószer-rendszerben): 0,21. Hozam: 2,24 g. 3. Z-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-OtBu Z-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-OtBu 2,18 g Z-Phe-ONP észtert 15 ml dimetil-formamidban oldunk. Ehhez az oldathoz 2,24 g fenti módon előállított H-D-Lys(Boc)-Phe-OtBu 30 ml dimetil-formamiddal készített oldatát adjuk, majd az elegyet 20 C° hőmérsékleten 15 óra hosszat keverjük. A sárga színű oldatot bepároljuk, a kapott-maradékot 15 ml etilacetátban oldjuk és 5 50 ml petrolétert adunk az oldathoz. Az elegyet 0 C° hőmérsékleten 8 óra hosszat állni hagyjuk, majd a csapadék alakjában kivált terméket szűréssel elkülönítjük. Az így kapott termék 135-138 C°-on olvad, Rf-értéke (szilikagélen a 9:1 arányú 10 toluol-etanol-oldószer-rendszerben): 0,60. Hozam: 3,1 g. 4. H-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-OtBu 15 2,5 g tripeptidet, amelyet a fenti 3. szakaszban leírt módon állítottunk elő, a 2. szakaszban leírt eljárás szerint hidrogénezünk. Az így kajXítt tripeptid Rf-értéke (szilikagélen, a 8:2 arányú 20 toluol-etanol oldószer-rendszerben): 0,43. Hozam: 2,2 g. Q) H-Phe-Lys(Boc)-fenilalkilamid 25 1. Z-Lys(Boc)-PPA 10,33 g Z-Lys(Boc)-ONP észtert (20,6 millimól) 0 C° körüli hőmérsékleten oldunk 80 ml diklór-me-30 tanban. Ezután a kapott oldathoz 2,7 g 3-fenil-propilamint adunk, majd az elegyet 0 C° hőmérsékleten 1,5 óra hosszat és ezt követően szobahőmérsékleten további 18 óra hosszat keverjük. Az oldószert elpárologtatjuk a reakcióelegyből és a 35 maradékot 200 ml etilacetátban oldjuk. Az etilacetátos oldatot vizes 10%-os nátrium-karbonát-oldattal, majd vizes 30%-os nátrium-klorid-oldattal, 0,1 n sósavoldattal, végül ismét vizes 30%-os nátrium-klorid-oldattal mossuk. Az elkülönített 40 etilacetátos oldatot szárítjuk és körülbelül 80 ml térfogatra bepároljuk. A maradékhoz annyi étert adunk, amennyi elegendő az oldat megzavarosodásának előidézéséhez. Az elegyet hűtőszekrényben állni hagyjuk, majd 2 óra múlva a képződött 45 csapadékot szűréssel elkülönítjük. Az így kapott termék 78-79 C°-on olvad, Rf-értéke (szilikagélen, a 9 : 1 arányú benzol-etanol oldószer-rendszerben): 0,53. Hozam: 9,2 g. 2. H-Lys(Boc)-PPA 8,75 g fenti módon kapott terméket 120 ml 55 metanolban oldunk és az oldathoz 1,2 g 10%-os palládiumos aktívszén-katalizátort adunk. Az elegyen keresztül hidogén-gázt buborékoltatunk keverés közben, 3,5 óra hosszat, majd a katalizátort kiszűrjük. A szűrletet szárazra pároljuk, maradék-60 ként 6,4g gyakorlatilag színtelen olajszerű terméket kapunk, amelyet ebben az állapotban közvetlenül felhasználunk a következő reakciólépésben. A fenti módon kapott termék Rf-értéke (szilikagélen, a 7:2:1 arányú Am-Fo-víz oldószer -65 -rendszerben): 0,58. 11
