169159. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszichofarmakológiailag aktív peptidek előállítására
3. Z-Phe-Lys(Boc)-PPA 6,39 g fenti módon kapott védett aminosav-származékot 68 ml dimetil-formamidban oldunk, majd ehhez az oldathoz 7,61 g Z-Phe-OMP 20 ml 5 dimetil-formamiddal készített oldatát adjuk. Az elegyet szobahőmérsékleten 20 óra hosszat keverjük, majd az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. A maradékot 170 ml etilacetátban oldjuk, az etilacetátos oldatot vizes 5%-os kálium-karbonát-ol- 10 ' dattal, * majd vizes 30%^os nátrium-klorid-oldattal, azután 0,1 n sósavoldattal, végül ismét vizes 30%-os nátrium-klorid-oldattal mossuk. Az elkülönített etilacetátos fázist, vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk, majd körülbelül 100 ml térfogatra 15 bepároljuk. A betöményített oldatot hűtőszekrényben 3 napig állni hagyjuk, ez alatt a kívánt peptid teljesen kikristályosodik. Az így kapott termék olvadáspontja: 20 134-136C°, Rf-értéke (szilikagélen, a 8 :2 arányú benzol-etanol oldószer-rendszerben): 0,72. Hozam: 9,5 g. 4. H-Phe-Lys(Boc)-PPA 25 9,07 g peptidet, amelyet a fenti 3. szakaszban leírt módon kaptunk, 300 ml dimetil-formamidban oldunk, az oldathoz 4 ml 4 n sósavoldatot és 1,5 g 10%-os palládiumos aktívszén-katalizátort adunk. 30 Az elegyen keresztül hidrogén-gázt buborékoltatunk keverés közben 3,5 óra hosszat, majd a katalizátort kiszűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk. Maradékként gyakorlatilag színtelen olajszerű termék alakjában kapjuk a fenti amidot, amelynek 35 Rf-értéke (szilikagélen, a 4:1:1 arányú Bu-Ac-víz oldószer-rendszerben): 0,63. Hozam: 7,0 g. 5. A fent leírttal egyező módon állítjuk elő a megfelelő kiindulási anyagok felhasználásával az 40 alább felsorolt további hasonló amidokat is: H-Phe-Lys(Boc)-L-Amf Rf -értéke (szilikagélen, a 4:1:1 arányú Bu-Ac-víz oldószer-rendszerben): 0,60. 45 H-Phe-Lys(Boc)-PEA Rf-értéke (szilikagélen, a 4:1:1 arányú Bu-Ac-víz oldószer-rendszerben): 0,65. H-Phe-D-Lys(Boc)-HPEA Rf-értéke (szilikagélen, a 8:2 arányú toluol- 50 —etanol oldószer-rendszerben): 0,29. R) H-Phe-Lys(Boc)-Phe-Gly származékok 1. Z-Phe-Lys(Boc)-N2H3 55 12,0 g Z-Phe-Lys(Boc)-OMe észtert 30 ml metanol és 6 ml hidrazin-hidrát elegyében oldunk. A kapott elegyet 24 óra hosszat állni hagyjuk, majd 0C° hőmérsékleten 2 óra hosszat keverjük. A 60 képződött csapadékot szűréssel elkülönítjük, hideg metanollal mossuk, és megszárítjuk. Hozam: 10,8 g. Az így kapott termék Rf-értéke (szilikagélen, 8:2 arányú benzol-etanol oldószer-rendszerben): 0,12. 65 2. Z-Phe-Lys(Boc)-Phe-Gly-OBzl 5,42 g fenti módon kapott hidrazidot 20 ml dimetilformamidban oldunk. Az oldatot 0 C° hőmérsékletre hűtjük, 2 mólekvivalens sósav tetrahidrofurános oldatát adjuk hozzá, majd az elegyet —20 C° hőmérsékletre hűtjük. Ezen a hőmérsékleten 1,35 ml izoamil-nitritet adunk hozzá, majd -20 C° hőmérsékleten 7 percig keverjük az elegyet. Ezután hozzáadjuk 3,5 g H-Phe-Gly-OBzl • HCl és 4,2 ml trietilamin elegyét (pH = 7). Az elegyet 0 C° hőmérsékleten 70 óra hosszat állni hagyjuk, majd az oldószert ledesztilláljuk, a maradékot etilacetát és víz elegyével felvesszük, azután a szerves oldószeres fázist elkülönítjük, 0,1 n sósavoldattal, utána vizes 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal végül vízzel mossuk. Az etilacetátos fázist elkülönítjük, vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk és az oldószert vákuumban ledesztilláljiík. A maradékként kapott 6,2 g termék Rf-értéke (szilikagélen, a 8:2 arányú benzol-etanol oldószer-rendszerben): 0,71: ' 3. H-Phe-Lys(Boc)-Phe-Gly-OH 1 g fenti módon kapott Z-Phe-Lys(Boc)-Phe-Gly-OBzl peptidet 20 ml 1:1 arányú metanol-víz elegyben oldunk. Az oldathoz 10%-os palládiumos aktívszén-katalizátort adunk, majd 5 óra hosszat ' hidrogén-gázt buborékoltatunk az elegyen keresztül. A katalizátort ezután kiszűrjük és a szűrletet bepároljuk, a maradékot bekeverjük vízmentes éterbe. A kivált 0,7 g termék Rf -értéke (szilikagélen, a 4:1:1 arányú Bu-Ac-víz oldószer-rendszerben): 0,43. S) H-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-Gly-OtBu szintézise 1. Z-D-Lys(Boc)-Phe-Gly-OtBu 10,03g Z-D-Lys(Boc)-ONP észtert hozzáadunk 5,1 g H-Phe-Gly-OtBu 20 ml dimetil-formamiddal készített oldatához, majd az elegyet bepároljuk. A kapott maradékot etilacetátban oldjuk, az oldatot mossuk és ismét szárazra pároljuk. Az így kapott maradékot azután közvetlenül feldolgozzuk a következő műveleti lépésben. A termék Rf-értéke (szilikagélen, a 9 : 1 arányú toluol—etanol oldószer-rendszerben): 0,63. 2. HrD-Lys(Boc)-Phe-Gly-OtBu A fenti módon kapott védett tripeptidnek az előző példákban leírt módon történő hidrogénezése útján, habszerű termék alakjában kapjuk ezt a tripeptidet. Rf-értéke (szilikagélen, a 9:1 arányú toluol-oldószer-rendszerben): 0,24. 3. Z-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-Gly-OtBu 2,18 g Z-Phe-ONP és 2,6 g H-D-Lys(Boc)-Phe-Gly-OtBu 30 ml dimetil-formamidban, 24 órai reakcióidővel lefolytatott reakciója útján kapjuk 12
