169158. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszichofarmakológiailag hatásos peptidek előállítására - antidepresszáns
25 . 5. példa H-Met-Glu-His-Phe-D-Arg-Tra-acetát és H-Met-Glu-His-Phe-D-Lys-Tra-acetát előállítása 1. Boc-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-D-Arg-Tra 2 millimól H-Ph»-D-Arg-Tra-acetátot [N) 2. példa] hozzáadunk az 1. példa 1. bekezdése szerint előállított azidhoz és annyi trietilamint adunk hozzá, amennyi elegendő a 7,2 végső pH-érték beállítására. - Az elegyet 70 óra hosszat keverjük, majd leszűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk. A maradékot száraz etilacetáttal háromszor elkeverjük, majd az így kapott végső maradékot etanolban oldjuk és ezt az oldatot belecsepegtetjük vízmentes etilacetátba. A kapott csapadékot szűréssel elkülönítjük. Az így kapott Boc-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-D-Arg-Tra Rf-értéke 0,25 (szilikagélen, a benzol-etanol 8 :2 rendszerben). 2. Boc-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-D-Lys(Boc)-Tra 2 mülimól H-Phe-D-Lys(Boc)-Tra [M) 2. példa] peptidet hozzáadunk az 1. példa 1. bekezdése szerint előállított azidhoz, majd a 7,2 végső pH-érték beállításához elegendő trietilamint adunk az elegyhez. A reakcióelegyet azután szárazra pároljuk, a maradékot vizes etilacetáttal felvesszük, az etilacetátos oldatot +5 C° hőmérsékleten 3 óra hosszat keverjük, miközben a termék kikristályosodik. 1,2 g Boc-Met-Glu-(OtBu)-His-Phe-D-Lys(Boc)-Tra védett peptidet kapunk, amelynek Rf értéke 0,37 (szilikagélen, a benzol-etanol 8:2 rendszerijén). Ugyanilyen módon állítjuk elő a megfelelő kiindulási anyagok egyenértékű mennyiségeinek kapcsolása útján az alábbi védett peptideket is: Boc-D-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-D-Lys(Boc)-Tra, Boc-/J-Ala-Glu(OtBu)-His-Phe-D-Lys(Boc)-Tra, Dezamino-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-D-Lys(Boc)-Tra. 3- A védőcsoportok eltávolítása Az előző bekezdések szerint előállított védett peptideket az előző példákban leírt módon 90%-os triíluor-ecetsawal kezeljük, az, acetáttá alakított termék oldatához liofilizálás előtt még további ecetsavat adunk a termék oldhatóságának növelése céljából. A fent leírt módon az alább felsorolt peptideket kapjuk acetát alakjában: Peptid: Rf szilikagélen H-Met-Glu-His-Phe-D-Arg* 5 -Tra-acetát 0,18 H-Met-Glu-His-Phe-D-Lys-Tra-acetát 0,23 H-D-Met-Glu-His-Phe-D-Lys-. -Tra-acetát 0,20 10 H-0-Ala-Glu-His-Phe-D-Lys-Tra-acetát 0,19 Dezamino-Met-Glu-His-Phe-D-Lys-Tra-acetát 0,26 15 (A fenti R f -értékek meghatározása butanol-piridin-ecetsav-víz 4 :0,75 :0,25 :1 rendszerben történt.) 20 6. példa A-Glu-His-Phe-D-Arg-Trp-Gly-OH előállítása 25 1. Boc-Val-Glu(OtBu)-His-Phe-D-Arg-Trp-Gly-OH Boc-Val-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 [C) 2. példa] és H-Phe-D-Arg-Trp-Gly-OH-acetát [O) 4. példa] kiin-30 dulási anyagoknak az 1. példában leírt módon történő kapcsolása útján állítjuk elő a fenti heptapeptidet. A reakcióelegyet 0C° hőmérsékleten 70 óra hosszat keverjük, majd vízbe öntjük és további 3 óra hosszat keverjük, ezután a kapott 35 csapadékot szűréssel elkülönítjük. Az így kapott termék Rf -értéke 0,57 (szilikagélen, butanol-piridin-ecetsav-víz 4 : 0,75 : 0,25 : 1 rendszerben). 40 2. A védőcsoportok eltávolítása A fenti módon kapott védett peptid védőcsoportjait az 1. példa 2. bekezdésében leírt módon távolítjuk el. Az így kapott H-Val-Glu-His-Phe-D-45 -Arg-Trp-Gly-OH-acetát Rf -értéke 0,21 (szilikagélen, butanol-piridin-ecetsav-víz 4 :0,75 : 0,25 :1 rendszerben). 3. A fent leírttal egyező módon állítjuk elő acetát 50 alakjában az alább felsorolt peptideket is: Peptid: Rf szilikagélen H-Met-Glu-His-Phe-D-Arg-Trp-Gly-OH 0,17 H-0-Ala-Glu-His-Phe-I)-60 -Arg-Trp-Gly-OH 0,14 Dezamino-Met-Glu-His-Phe-D-Arg-Trp-Gly-OH 0,22 (A fenti pH-értékeket a butanol-piridin-ecetsav-65 -víz 4 :0,75 : 0,25 :1 rendszerben határoztuk meg.) 13
