169158. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszichofarmakológiailag hatásos peptidek előállítására - antidepresszáns
27 169158 28 7. példa 8. példa A-Glu-His-Phe-D-Lys-Phe-OH előállítása 1: Boc-|3-Ala-Glu(OtBu)-His-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-OtBii 4millimól Boc-ß-Ala-Glu(OtBu)-His-N 2H 3 hidrazidot [D) 2. példa] 25 ml dimetil-formamidban oldunk. Az oldatot -5 C° hőmérsékletre hűtjük és 4 ml 3 n tetrahidrofurános hidrogén-klorid oldatot adunk hozzá, majd az elegyet lehűtjük -20C°-ra és 0,55 ml izoamil-nitritet adunk hozzá. A reakcióelegyet -20 C° hőmérsékleten 7 percig keverjük, majd az így kapott azid-oldat felét hozzáadjuk 1,2 g H-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-OtBu [P) 4. példa] 10 ml dimetil-formamiddal készített és -10 C hőmérsékletre lehűtött oldatához. Az elegy pH-értékét trietilamin hozzáadásával 7,3-ra állítjuk, majd 0 C° hőmérsékleten 71 óra hosszat keverjük a reakcióelegyet. Ezután az elegyet vízbe öntjük, a képződött csapadékot pedig szűréssel elkülönítjük. Az így 62%-os hozammal kapott nyers peptidet etilacetát és petroléter elegyéből háromszor átkristályosítjuk. A kapott védett peptid bomlás közben 193C°-on olvad, Rf-értéke 0,51 (szilikagélen, a toluol-etanol 8 : 2 rendszerbén). 10 15 20 H-0-Ala-Glu-His-Phe-D-Lys-Gly-OH előállítása 1. Boc-j3-Ala-Glu(OtBu)-His-Phe-D-Lys-(Boc)-Phe-Gly-OtBu A 7. példa 1. bekezdésében leírt', módon előállított azid-oldat ott fel nem használt másik felét alkalmazzuk kiindulási anyagként és ezt az azidot a 7. példában leírttal egyező módon 2 millimól H-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-Gly-OtBu [előállítva a O) példa 4. bekezdésében leírt módon] védett pep tiddel kondenzáljuk, majd a kapott kondenzációs terméket elkülönítjük. Rf 0,53 (szilikagélen, benzol-etanol 8 :2 rendszerben). 2. A védőcsoportok eltávolítása 2. A védőcsoportok eltávolítása Az előző bekezdésben leírt módon kapott védett peptidről az 1. példában leírt eljárással 25 eltávolítjuk a védőcsoportokat és így acetát alakjában a >H-/3-Ala-Glu-His-Phe-D-Lys-Phe-Gly-OH peptidet kapjuk, amelynek Rf -értéke 0,19 (szilikagélen, butanol-piridin-ecetsav-víz 4 : 0,75 :0,25 : 1 rendszerben). 30 A fenti módon kapott védett peptidet az 3. További hasonló peptidek előállítása 1. példa 2. bekezdésében leírt módon kezeljük. így 75%-os hozammal kapjuk a H-ß-Ala-Glu-His-Phe-D - Ly s-Phe-OH-acet át j át. Rf -érték 0.21 (szilikagélen, butanol-piridin-ecetsav-viz 4 : 0,75 : 0,25 : 1 rendszerben). 3. A fent leírttal egyező módon állítjuk elő a megfelelő kiindulási anyagok egyenértékű menynyiségeiből az alábbi peptideket acetát alakjában: A fent leírttal egyező módon állítjuk elő a megfelelő kiindulási anyagok egyenértékű meny-35 nyiségeinek felhasználásával az alább felsorolt peptidek acetátjait: 40 Peptid: Kiindulási Rf anyagokat 4 ismertető példák H-Met-Glu-His-Phe-D-Lys-Phe-Gly-OrJ-acetát H-(a-Me)Ala-Glu-His-Phe-D-Lys-Phe-Gly-OH-acetát Dezamino-Met-Glu-His-Phe-D-Lys-Phe-Gly-OH-acetát Rf = 0,28 Rf = 0,26 Rf = 0,31 H-Met-Glu-His-Phe-D--Lys-Phe-OH H-Val-Glu-His-Phe-D-Lys-Phe-OH Deza mino-Met-Glu-His-Phe-D-Lys-Phe-Ofl H-Met-Gln-His-Phe-D-Lys-Phe-OH 0,38 A.2.+ P.4. 0,35 C.2.+ P.4. 0,24 F.3-+P.4. 0,25 G +P.4. A fenti Rf értékek meghatározása - a dezamino-Met-származék kivételével - a butanol-piridin-ecetsav-víz 2 : 0,75 :0,25 : 1 arányú oldószer-rendszerrel, a dezamino-Met-származék esetében pedig a butanol-piridin-ecetsav-víz 4 :0,75 :0,25 : 1 arányú oldószer-rendszerrel, valamennyi esetben'szilikagélen történt. 50 55 60 65 A fenti Rf -értékek meghatározása szilikagélen, a butanol-piridin-ecetsav-víz 2 : 0,75 : 0,25 : 1 rendszerben történt. 9. példa H<a-Me)Ala-Glu-His-Phe-D-Lys-fenilalkil-amidok 1. Boc-(a-Me)Ala-Giu(OtBu)-His-Phe-D-Lys(Boc)-PPA 0,96 g Boc-(a-Me)Ala-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 hidrazidot - amelyet az F.2. példában leírt módon állítunk elő - 10 ml dimetil-formamidban oldunk, majd 3 ml tetrahidrofurános n sósavoldat és 0,13 ml izoamil-nitrit hozzáadásával, az előző példákban leírt módon a megfelelő aziddá alakítjuk 14
