169116. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antigén, haptén vagy antitest kimutatására és meghatározására

MAGTAB NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1971. XII. 28. (OA-483) Hollandiai elsőbbsége: 1970. XII. 28. (70.18383) Közzététel napja: 1976. IV. 28. Megjelent: 1978.1.31. 169116 Nemzetközi o: G 01 N 33/16 Feltalálók: Dr. Schuurs Antonius Hermanus Wilhelmus Maria vegyész, Van Veemen Bauke Klaas vegyész, Ooss, Hollandia Tulajdonos: N.V. Organon, Oss, Hollandia Eljárás antigén, hapten vagy antitest kimutatására és meghatározására 1 : A találmány tárgya eljárás antigén, hapten és/vagy antitest kimutatására és kvantitatív meghatározására. Antigénnek tekintjük a HCG-t (emberi korion gonadotrop-hormon) és az inzulint [lásd Nature 5 219. kötet, 186-189. oldal (1968), J. of Allergy, 34. kötet, 142-154. oldal (1963)]. Hapténeknek tekintjük az alábbi vegyületeket: ösztradiol, ösztriol, ösztron vagy kortizol [Principles of Competitive Protein-Binding Assay, Odell és társai, Lip- 10 pincott, Philadelphia (1971)]. Antitestek többek között az anti-inzulin, illetve a kortizol-antitest. A találmány szerinti eljárást úgy végezzük, hogy a) valamely antigén vagy hapten kimutatására 15 és/vagy kvantitatív meghatározására a meghatározandó antigén vagy hapten oldatához ismert mennyiségű antitestet és egy enzimnek, előnyösen olyan enzimnek, amelynek aktivitása kolorimetriásan mérhető, a meghatározandó antigénnel vagy 20 hapténnel előzőleg elkészített ismert mennyiségű konjugátumát, majd egy szilárd állapotú, oldhatatlan anti-antitestet adunk, a szilárd fázist az oldattól elkülönítjük, és az ehzimaktivitást az oldatban és/vagy a szilárd fázisban meghatározzuk, 25 vagy b) valamely antitest kimutatására és/vagy kvantitatív meghatározására a meghatározandó antitest oldatához feleslegben egy enzimnek, előnyösen olyan enzimnek, amelynek aktivitása kolorimetriá- 30 san mérhető, egy antigénnel vagy hapténnel előzőleg elkészített ismert mennyiségű konjugátumát, majd szilárd állapotú oldhatatlan anti-antitestet adunk, ezt követően a szilárd fázist elkülönítjük, és az enzimaktivitást az oldatban és/vagy a szilárd fázisban meghatározzuk. Ismeretes az, hogy egy antitest és egy antigén, hapten vagy antitest között végbemenő reakcióban résztvevő egyik komponens kimutatható és meghatározható úgy, hogy az egyik említett komponenst egy jelzővegyülettel megjelöljük és olyan reakciókeverékben inkubáljuk, amelyik legalább az egyik komponenst is tartalmazza. A jelzett komponens elválasztása, vagyis a kötőpartnerrel nem kapcsolódó vegyület elválasztása után a két frakció közül legalább az egyikben a jelzővegyület meghatározható. A jelzett komponensek a két frakció közötti megoszlása szolgál a mintában levő meghatározandó anyag mennyiségének mértékéül. [Principles of Competitive Protein Binding Assay, Odell és társai, Lippincott, Philadelphia (1971)]. A 159 630 számú magyar szabadalmi leírás reagin-IG meghatározására ismertet egy eljárást, ahol a reagin-IG-vel szemben egy radioaktív jelzésű antitestet alkalmaznak. A Nature 219. kötetében, a 186-189. oldalon (1968) az antigén meghatározására egy eljárást ismertetnek, ahol a komponensek egyike oldhatatlan antitest. 169116