169022. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kopolimer hordozóra felvitt vízoldhatatlan fehérje-készítmények előállítására

19 169022 20 9h) példa 10 b) példa 40 lg 10a) példa szerint előállított polimert lb) példával analóg módon penicillin-acÜázzal 33 ml vízben 6,3 pH-értéken reagáltatunk. 45 Eredmény: Enzimatikus aktivitás (NIPAB-teszt): Kiindulási oldat: 107 U so Felülúszó rész és mosóoldatok: 26 U Hordozógyanta a reakció után: 82 U, vagyis a kiindulási aktivitás 77%-a. 55 11 a) példa 70 g tetraetilénglikol-dimetakrilát, 20 g metakrilamid, 10g maleinsavanhidrid, lg azo-izovajsavnitril és 200 ml acetonitril oldatát az 5 a) példával ana- 60 lóg módon benzinben szuszpendáljuk és polimerizáljuk. Hozam: 93 g Térfogatsúly: 2,0 ml/g Duzzadási térfogat vízben: 3,3 ml/g 65 Savtartalom az anhidrjd-csoportok elszappanosítása után= 1,7 milliekvivalens/g. 11b) példa lg 11a) példa szerint előállított polimert az 1 b) példával analóg módon 32 ml vízben penicülin-acilázzal, 6,3 pH-értéken reagáltatjuk. Eredmény: Enzimatikus aktivitás (NIPAB-teszt): Kiindulási oldat: 107 U Felülúszó rész és a mosóoldatok: 42 U Hordozógyanta a reakció után: 33 U, vagyis a kiindulási aktivitás 31%-a. 12 a) példa 60 g tetraetilénglikol-dimetakrilát, 30 g N-metoximetil-akrilamid, 10 g maleinsavanhidrid és 1 g azo-izovajsavnitril 200 ml acetonitrilben készült oldatát 5g glicerin-mono- és -dioleátot tartalmazó 1 liter benzinben szuszpendáljuk és 20 óra hosszat 60 C°-on polimerizáljuk. A gyöngypolimert leszűrjük, etilacetátban háromszor szuszpendáljuk, majd vákuumban 50C°-on szárítjuk. Hozam: 97 g Térfogatsúly: 1,6 ml/g Duzzadási térfogat vízben: 3,5 ml/g Átlagos részecskeátmérő: 0,3 mm. 12 b) példa lg 12a) példa szerint előállított polimert az 1 b) példa szerinti módon 32 ml vízben penicillin-acilázzal 6,3 pH-értéken reagáltatunk. Eredmény: Enzimatikus aktivitás (NIPAB-teszt): Kiindulási oldat: 107 U Felülúszó rész és mosóoldatok: 49 U Hordozógyanta a reakció után: 25 U, vagyis a kiindulási aktivitás 23%-a. 13 a) példa Ha a 2 a) példa szerinti reakcióelegybe N-metoximetil-akriiamid helyett 30 g N-metoximetil-metakrilamidot alkalmazunk, akkor a következő eredményhez jutunk: Hozam: 94 g Térfogatsúly: 2,4 ml/g Duzzadási térfogat vízben: 3,9 ml/g Átlagos részecskeátmérő: ~0,6mm. 1 g 9 a) példa szerint előállított polimert az 1 b) példával analóg módon 32 ml vízben penicillin-acilázzal 6,3 pH-értéken reagáltatjuk. 5 Eredmény: Enzimatikus aktivitás (NIPAB-teszt): 10 Kiindulási oldat: 107 U Felülúszó rész és mosóoldat: 26 U Hordozógyanta a reakció után: 38 U, vagyis a kiindulási aktivitás 36%-a. 15 10 a) példa 50 g tetraetilénglikol-dimetakrilát, 40 g N-vinilpirrolidon, 10 g maleinsavanhidrid és 1 g diciklo- 20 hexil-perkarbonát 200 ml acetonitrilben készült oldatát 5 g glicerin mono- és glicerin-dioleát keverékét tartalmazó 1 liter 100-140 C° forráspontú benzinben szuszpendáljuk és keverés közben először 18 óra hosszat 50 C°-on melegítjük. Ezután 25 1 g iniciátort adunk hozzá és a reakcióelegyet további 8 óra hosszat 60 C°-on melegítjük. A kapott golyó alakú polimert benzollal és petroléterrel alaposan kimossuk, majd vákuumban szárítjuk. Hozam: 54 g átlátszó gyöngyök 30 Térfogatsúly: 1,6 ml/g Duzzadási térfogat vízben: 2,4 ml/g Átlagos részecskeátmérő: ~ 0,3 mm Savtartalom az anhidrid-csoportok elszappanosítása után =3,3 milliekvivalens/g. 35 Nitrogéntartalom: 3,4% = 27% N-vinilpirrolidon 10