168994. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszeudo-di- és triszacharidok előállítására
17 168" 4 18 Az oszlopot 2% metanolt tartalmazó 1 : 1 benzol-éter-eleggyel tovább eluálva keveréket kapunk, ezt kovasavgéllemezeken preparatív vékonyrét eg-kromatografálással, eluensként 1 :2 arányú kloroform-etilacetát-elegyet használva, tovább- 5 tisztítva 150 mg 0-[3,4,6-tri-0-acetil-2-amino-2-dezoxi-2-N-(2,4-dinitro-fenil)-/?-D-glukopiranozil-(1^4)]-2, -0-acetil-l,3,3'-tri-N-karbobenzoxi-gar amint kapunk. Ezt 95%-os vizes etanolból átkristályosítjuk. Olvadáspontja 133-135°. 10 Elemi összetétel (%): a Cs7 H 66 N 6 0 24 képlet alapján számított: C =56,16, H =5,46, N = 6,89, 15 talált: C =56,96, H =5,65, N = 6,79. [a]tí +39,5° (kloroformban) i'max (nujolban): 3448, 3333, 1754-1709, 20 1618,1592,1527 cm-1, ő (CDCI3) t: 1,10 (3H, széles szingulett, 4"-CH3 ), 1,88, 2,03, 2,10 (12H, széles szingulett -OAc), 2,92 (3H, széles szingulett, 3"-NCH3 ), 7,25, 7,28, 7,30, 7,33 (16H, széles szingulett, 25 -CH2 C 6 H 5 és DNP), 8,20 és 9,00 ppm (2H, széles szingulett, DNP). 160 mg 0-[3,4,6-tri-0-acetil-2-amino-2-dezoxi-2--N-(2,4-dinitrofenil)-a-D-glukopiranoziKl->4)]-2'-0--acetil-l,3,3'-tri-N-karbobenzoxi-garamint feloldunk 30 32 ml metanolban, és az oldatot 0°-on ammóniával telítjük. 25° -on való 16 órai állás után az oldatot bepárolva 1,3,3"-tri-N-karbobenzoxi-2'-N-(2,4-dinitrofenil)-gentamicin X2-t kapunk. Ezt feloldjuk 20 ml aceton és 10 ml víz elegyében, és 5 ml 35 hidroxilfázisú Amberlite IRA 400 gyantával 25°-on 16 óra hosszat keverjük. A keveréket szűrőre visszük, a gyantát 100 ml 2:1 arányú aceton-víz-eleggyel mossuk, és az egyesített szüredékeket bepárolva l,3,3"-tri-N-karbobenzoxi-gentamicin X2-t 40 kapunk. Ezt -70°-on (szilárd széndioxid-aceton-fürdőben) feloldjuk 20 ml cseppfolyós ammóniában, és hozzáadunk 230 mg nátriumot. A kék színű oldatot -70°-on 2 óra hosszat keverjük. Ezután vizet csepegtetünk hozzá a kék szín eltűnéséig. 45 Utána az ammóniát elpárologtatjuk, és a maradékhoz 5 ml vizet adunk. A vizes oldatot 0°-ra hűtjük, felvisszük egy Amberlite IRC 50 gyantát tartalmazó oszlopra, és másfél óra hosszat állni hagyjuk. A semleges szennyezéseket 140 ml vízzel eluál- 50 juk, majd 1,5 n vizes ammóniumhidroxiddal eluálva és az eluátumot bepárolva 36 mg gentamicin X2-t kapunk. A reakciótermék azonos az 1. példában kapott termékkel. 55 5. példa 41,7 g 4,6-di-0-acetil-l,2,3-tridezoxi-D-eritro-hex- 60 -1-enopiranózt 1250 vízmentes etilacetátban oldunk, az oldatot átöblítjük vízmentes nitrogénnel, és 0°-ra hűtjük. Hozzáadjuk 25,5 g nitrozilkloridnak 100 ml vízmentes etilacetáttal készült oldatát, és a keveréket -5°-on 2,75 óra hosszat állni hagyjuk, 65 mialatt a reakció a vékonyréteg-kromatogram tanúsága szerint lezajlik. Az oldatot bepárojuk, és a nyúlós maradékot vízmentes éterrel eldörzsöljük, majd vákuumban megszárítva 54 g 4,6-di-O-acetil-2,3-didezoxi-2-nitrozo-D-glukopiranozilkloridot kapunk színtelen üvegszerű termék alakjában. Elemi összetétel (%): a Ci0 Hi 4 N0 6 Cl képlet alapján számított: C =42,94, H = 5,05, N = 5,01, Q = 12,68, talált: C =42,91, H = 5,10, N = 4,83, Cl = 12,75. [á\l6 +75,5° (kloroformban) »'max (kloroformban): 1740, 1220, 1040 cm"1, 6 (CDCI3): 2,10 (6H, szingulett, -OAc), 6,70 és 6,82 ppm (1H, dublett, J = 4 Hz) (3 :2). 7,28 g 5,2\4'-tri-0-acetü-l,3,3'-tri-N-karbobenzoxi-garamint és 4,8 g 4,6-di-0-acetil-2,3-didezoxi-2--nitrozo-a-D-glukopiranozilkloridot feloldunk 200 ml vízmentes frissen desztillált dimetilformamidban, és az oldatot 25°-on 46 óra hosszat állni hagyjuk. A reakciókeveréket jeges vízbe öntjük, a csapadékot szűrőre visszük, szárítjuk, és 160 cm magas és 2,5 cm átmérőjű kovasavgéloszlopon kromatografáljuk eluensként 1% metanolt tartalmazó kloroformot használva. így 4,8 g Ö-[4,6-di-0-acetil-2,3-didezoxi-2-oximino-a-D-glukopiranozil-(l-»4)]-5,2\4'-tri-0-acetü-l,3,3'-tri-N-karbobenzoxi-garamint kapunk színtelen amorf termék alakjában. Olvadáspontja 123-133°. Elemi összetétel (%): a Cs3 H 64 N 4 0 21 képlet alapján számított: C =58,23, H =5,90, N = 5,13, talált: C =58,01, H =5,72, N = 5,02. [a]h6 +117,0° (metanolban) »'max (kloroformban): 3400, 1740, 1710, 1220, 1030, 695 cm-1, 8 (CDCl3 )f: 1,25, 1,37 (3H, széles szingulett, 4"-CH3 ), 1,90, 1,96, 2,01 (15H, széles szingulett, -OAc), 2,83 (3H, széles szingulett, 3"-NCH3 ), 5,07 (6H, széles szingulett, -CH2 C 6 H S ) és 7,28 ppm (15H, széles szingulett, —CH2 C 6 H 5 ). 3,3 g 0-[4,6-di-0-acetil-2,3-didezoxi-2-oximino-a- D -glukopiranozil-( l-»4)]-5,2',4'-tri-0-acetil-l ,3,3 '-tri-N-karbobenzoxi-garamint és 4,9 ml ecetsavanhidridet feloldunk 26 ml vízmentes piridinben, és az oldatot 25°-on 18 óra^ hosszat álni hagyjuk. A reakciókeveréket vízbe öntve 3,2 g 0-[2,4,6-tri-0--acetil-2,3-didezoxi-2-oximino-a-D-glukopiranozil-(1 -*-4)]-5,2',4'-tri-0-acetil-1,3,3'-tri-N-karbobenzoxi-garamin válik ki, ezt szűréssel elválasztjuk és szárítjuk. Az így kapott 3,2 g acetátot feloldjuk 100 ml vízmentes tetrahidrofuránban, és az oldatot 0°-ra hűtjük. Ezután hozzácsepegtetünk 42,3 ml 1 mólos tetrahidrofurános diboránoldatot, és a keveréket 18 óra hosszat 7°-on tartjuk. A reagens feleslegét víznek a pezsgés megszűntéig való hozzácsepegtetésével elbontjuk. Az oldatot bepároljuk, és benzol 9
