168902. lajstromszámú szabadalom • Eljárás L-triptofán és származékai folyamatos fermentációs előállítására
7 168902 8 „A" oldat: 0,75% CaCl 2 • 2H20 „Bf oldat: 8% KH2P0 4 2,56% K2 HP0 4 „Bk" oldat: 10% KH2P0 4 „C" oldat: 7,88% MgS04 • 7H20 0,11% MnS0 4-H 2 0 0,02% ZnS0 4 • 7H20 10% NaCl „K" oldat: 0,068 g ammónium-molibdát 0,34 g CuS0 4 Az inokulálást és a tenyésztést kb. 6,5 pH-értéken, az 1. példában megadott módon végezzük. Az indolt a táptalajra vonatkoztatva 0,265 vegyes % sebességgel vezetjük be. A tenyészetben 24 óra alatt 3,6 g/l triptofán termelődik (hozam: 78%). Bomlás nem észlelhető. 3. példa A fermentációt nagy indol-adagolási sebesség fenntartásával, szakaszos vascitrát-adagolással, egyébként az 1. példában leírt körülmények között végezzük. Táptalajként a 2. példában ismertetett közeget alkalmazzuk. Az inokulálást és a tenyésztést az 1. példában megadott módon, az 1. példában feltüntetett pH-értéken végezzük. Az indolt a táptalajra vonatkoztatva 0,53 vegyes % sebességgel vezetjük be. 24 óra alatt átlagban 6,8 g/l triptofán keletkezik (hozam: 74%). Ha a fermenflé maradék indol-tartalma fokozódik, a rendszerhez szakaszosan vascitrátot adunk. Az esetenként beadagolt vascitrát-mennyiség a táptalajnak minden esetben megfelelő vastartalmat biztosít. 4. példa A fermentációt folyamatos vascitrát-adagolással, egyébként az 1. példában leírt körülmények között, az ott ismertetett táptalajon végezzük. Az inokulálás és a közeg pH-értéke is azonos az 1. példában megadottal. Az elegyet az 1. példában leírt módon tenyésztjük, azzal a különbséggel, hogy az elegyet 10 liter levegő/óra x liter tenyészet sebességgel levegőztetjük. A kísérletben a vasadagolást úgy állítjuk be, hogy a táptalaj vastartalma körülbelül 2 milliomodrész legyen. Az indolt a táptalajra vonatkoztatva 0,4 vegyes % sebességgel adagoljuk. A tenyésztés során 24 óra alatt átlagosan 5,9 g/l triptofán keletkezik (hozam: 80,5%). A tenyészet stabilizálódása után nem észlelhető bomlás. 5. példa Glicin hatásának vizsgálata A fermentációt az 1. példában leírt körülmények között, az ott ismertetett pH-értéken végezzük. Az inokulálás azonos az 1. példában megadottal. A táptalaj összetétele hasonló az 1. példában ismertetetthez, azzal a különbséggel, hogy a táptalaj 2 milliomodrész Fe2+ -t és 15 g/10 liter glicint tartalmaz. Az elegyet 10 liter levegő/óra x liter tenyészet sebességgel levegőztetjük. 5 Az indolt a táptalajra vonatkoztatva 0,8 vegyes % sebességgel vezetjük be. 24 óra alatt átlagban 10,4 g/l triptofán képződik (hozam: 75%). A tenyésztés során igen kis maradék indol-koncentráció észlelhető. A triptofán bomlása rendkívül kis 10 mértékű, amit az jelez, hogy csak 0,2 g kinurénsav képződik. 6. példa 15 A fermentációt az 1. példában ismertetett körülmények között, az 1. példában leírt összetételű táptalajon végezzük, azzal a különbséggel, hogy a Fe2+ -ionok koncentrációját 2 milliomodrész értéken 20 tartjuk. A beoltást és a tenyésztést az 1. példában közöltek szerint végezzük, és a tenyészet pH-ját az 1. példában megadott értéken tartjuk. A tenyészetet 12 liter levegő/óra x liter tenyészet sebességgel levegőztetjük. 25 Az 5-hidroxi-indolt a táptalajra vonatkoztatva 0,4% sebességgel vezetjük be. A tenyészetben 24 óra alatt átlagban 4,3 g/liter L-5-hidroxi-triptofán termelődik, ami 64%-os hozamnak felel meg. 7. példa A fermentációt az 1. példában ismertetett körül-35 menyek között, az 1. példában leírt összetételű táptalajon végezzük, azzal a különbséggel, hogy a Fe2+ -ionok koncentrációját 2,2 milliomodrész értéken tartjuk. A beoltást és a tenyésztést az 1. példában közöltek szerint végezzük, és a tenyészet 40 pH-ját az 1. példában megadott értéken tartjuk. A tenyészetet 10 liter levegő/óra x liter tenyészet sebességgel levegőztetjük. A 6-metil-indolt a táptalajra vonatkoztatva 45 0,28% sebességgel vezetjük be. A tenyészetben 24 óra alatt átlagban 2,4 g/liter L-6-metil-triptofán termelődik, ami 51%-os hozamnak felel meg. 50 8. példa A fermentációt az 1. példában ismertetett körülmények között, az 1. példában leírt összetételű táptalajon végezzük, azzal a különbséggel, hogy a 55 Fe2+ -ionok koncentrációját 2 milliomodrész értéken tartjuk. A beoltást és a tenyésztést az 1. példában közöltek szerint végezzük, és a tenyészet pH-ját az 1. példában megadott értéken tartjuk. A tenyészetet 9-12 liter levegő/óra x liter tenyészet se-60 bességgel levegőztetjük. Az 5-metoxi-indolt a táptalajra vonatkoztatva 0,28% sebességgel vezetjük be. A tenyészetben 24 óra alatt átlagban 2,55 g/liter L-5-metoxi-triptofán 65 termelődik, ami 57%-os hozamnak felel meg. 4
