168890. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszichofarmakológiailag hatásos peptidek előállítására
19 16889° 20 B) H-Val-Glu-His-Phe-NH 2 Az A) lépésben kapott védett tetrapeptid-amid védőcsoportját a 2. példa G) lépésében leírt módon lehasítjuk. A cím szerinti peptid acetátját kapjuk. 7. példa H-D-Met-Glu-His-(N-fenilalkÜ)-amidok előállítása 1,17 g, a 9. példa A) lépésében előállított Boc-D-Met-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 20 ml dimetilformamiddal készített, 0C°-os oldatához 3 ml 2n tetrahidrofurános sósavoldatot adunk. Az elegyhez -20 C°-on 0,27 ml izoamflnitritet adunk, és az elegyet 7 percig —20 C°-ön keverjük. Az azidvegyület oldatához 3 mmol amint adunk, majd trietilaminnal pH = 7-re semlegesítjük. A reakcióelegyet 70 órán át 0C°-on keverjük, majd vákuumban szárazra pároljuk, és a maradékot vizes etilacetátban oldjuk. A szerves fázist vízzel, hidrogénkarbonát-oldattal és vízzel mossuk, szárítjuk és szárazra pároljuk. A maradékot éter és petroléter elegyével eldörzsöljük és ismét szárítjuk. A kapott termékek védőcsoportjait a 2. példa G) lépésében leírt módon lehasítjuk. A következő H-D-Met-Glu-His-(N-fenilalkil)-amid-acetátokat kapjuk: Rf 4:1:1 arányú amin-csoport: butanol-ecetsav—víz elegyben benzilamin 0,20 feniletilamin (v.o. 5.K. 3. példa) 0,21 1-amfetamin 0,19 p-hidroxi-feniletilamin 0,19 p-metil-benzilamin 0,20 8. példa H-A-Glu-ffis-(N-femlaM)-amidok előállítása (A = Val- vagy 0-Ala-) A) 1,11 g, a 3. példa A) lépésében előállított Boc-Val-Glu(OtBu)-His-OMe 20 ml metanollal készített oldatához 1 ml hidrazinhidrátot adunk, és az elegyet 6 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A metanolt vákuumban lepároljuk, a maradékot vízzel eldörzsöljük és szárítjuk. A száraz maradékot dimetilformamidos oldatban a 7. példában ismertetett azid-módszerrel 1-amfetaminnal (1-fenil-izopropilaminnal) kapcsoljuk. A kapott vegyületet a 2. példa G) lépésében leírt módon kezeljük, és a képződött H—Val—Glu—His—(N-1 -fenil-izopropil)-amid-acetátot liofilizáljuk. A tennék Rf-értéke 0,18, a kiindulási anyag Rr értéke 0,53 (szilikagél-rétegen, 4:1:1 arányú butanol—ecetsav—víz elegyben). B) Az A) lépésben leírt eljárást ismételjük meg 5 azzal a különbséggel, hogy Boc-0-Ala-Glu(OtBu)-His-OMe-ből és benzilaminból indulunk ki. A kapott Boc-/3-Ala-Glu-His-(N-benzfl)-amid Rf-értéke 0,16 (szilikagél-rétegen, 4:1:1 arányú butanol—ecetsav—víz elegyben). 9. példa H-D-Met-Glu-His-Phe-Arg-OH előállítása 15 A) Boc-D-Met-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 3,2 g, a 2. példa A) lépésében előállított Boc-D-Met-Glu(OtBu)-His-OMe 70 ml metanollal ké-20 szített oldatához 3,7 ml hidrazinhidrátot adunk, és • az elegyet 5 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A metanolt vákuumban lepároljuk és a maradékot vízzel eldörzsöljük. A kapott hidrazin-vegyületet szárítás után azonnal tovább reagáltatjuk. A termék 25 Rf-értéke 0,37 (szilikagél-rétegen, 10 :4 :5 arányú amilalkohol—izopropanol—víz elegyben). Hozam: 90%. B) Boc-D-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-Arg-OH 30 1,17 g, az A) lépésben kapott tripeptid-hidrazid 20 ml dimetilformamiddal készített, 0 C°-os oldatához 3 ml 2 n tetrahidrofurános sósavoldatot adunk. Az elegyet -20 C°-ra hűtjük, 0,27 ml izo-35 amilnitritet adunk hozzá, és 6 percig keverjük. Az azidvegyületet tartalmazó oldatot 2 mmól H-Phe-Arg-OH 5 ml dimetilformamid-víz 9 : 1 arányú oldatához adjuk, amelynek pH-ját előzetesen trietilaminnal 7,3-ra állítottuk. 40 A reakcióelegyet 70 órán át 0 C°-on keverjük, majd bepároljuk. A maradékot etilacetáttal eldörzsöljük, és az elegyet bepároljuk. Amorf terméket kapunk, Rf = 0,17 (szilikagél-rétegen, 8:2 arányú benzol-etanol elegyben). Hozam: 65%. 45 C) H-D-Met-Glu-His-Phe-Arg-OH A B) lépésben kapott pentapeptid védőcsoportjait trifluorecetsawal lehasítjuk, majd az aniont 50 Dowex X—8 ioncserélő gyanta (acetát-forma) felhasználásával acetát-ionra cseréljük. A termék Rf-értéke 0,18 (szilikagél-rétegen, 4 : 0,75 :0,25 :1 arányú butanol-piridin-ecetsav-víz elegyben). Hozam: 90%. 10. példa H-Met(-> 0)-Glu-His-Phe-Arg-OH, 60 H-Met(^0)-Glu-His-Phe-Lys-OH és H-D-Met(-* 0)-Glu-His-Phe-Arg-OH előállítása A megfelelő pentapeptidet az 1. példában leírt 65 módon ecetsavas közegben 30%-os hidrogén-10
