168890. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszichofarmakológiailag hatásos peptidek előállítására
21 168890 22 peroxiddal oxidáljuk. A következő vegyületeket kapjuk: H-Met(-* 0)-Glu-His-Phe-Arg-OH H-Met(-> 0)-Glu-His-Phe-Lys-OH H-D-Met(-» 0)-Glu-His-Phe-Arg-OH Rf = 0,18 5 Rf = 0,21 Rf = 0,17 10 Az Rf-értékeket szilikagél-rétegen, 4 :0,75 :0,25 :1 arányú butanol-piridin-ecetsav-víz elegyben határoztuk meg. 11. példa A-Glu-His-Phe-Lys-származékok előállítása (A = a-Met-Ala, /3-Ala vagy dezamino-Met) 15 faljuk, és a Boc-(a-Me)Ala-Glu-(OtBu)-His-Phe-Lys(Boc)-OtBu-t elkülönítjük. Rf= 0,74 (szilikagélrétegen, 8 : 2 arányú benzol-etanol elegyben). A kapott pepiid védőcsoportjait a 2. példa G) lépésében leírt módon lehasítjuk. A cím szerinti vegyületet 63%-os hozammal kapjuk, Rf = 0,18 (szilikagél-rétegen, 4 :0,75 :0,25 :1 arányú butanol-piridin—ecetsav—víz elegyben). E) A C) lépésben kapott peptid-metilésztereket az A) lépésben leírt módon előállított H-Phe-Lys(Boc)-OtBu-val kapcsoljuk. A kapcsolási reakciót a D) lépésben megadott módon végezzük. Ezután a védőcsoportokat a 2. példa G) lépésében leírt eljárással lehasítjuk. A következő peptidek acetátjait kapjuk 60-70%-os hozammal: A) H-Phe-Lys(Boc)-OtBu 20 4,2 g Z-Phe-ONP-t H-Lys(Boc)-OtBu-val kapcsolunk. A terméket viszkózus olaj formájában kapjuk, Rf = 0,57 (szilikagél-rétegen, 9 :1 arányú 2 S benzol-etanol elegyben). Hozam: 79%. A kapott Z-Phe-Lys(Boc)-OtBu-t metanolos közegben, 10%-os palládium/csontszén katalizátor jelenlétében hidrogénezzük. A H-Phe-Lys(Boc)-OtBu-t 95%-os hozammal kapjuk. Rf = 0,41 (szili- 30 kagél-rétegen, 4:1:1 arányú butanol-ecetsav-víz elegyben). B) Boc-(a-Me)Ala-Glu(OtBu)-His-N 2 H 3 35 2,9 g, a. 3. példa E) lépésében előállított Boc-(a-Met)-Ala-Glu(OtBu)-His-OMe-t a 9. példa A) lépésében leírt módon hidrazinhidráttal reagáltatjuk. A kapott hidrazid 218-225 C°-on olvad bomlás közben. 40 C) A B) lépésben leírt eljárással alakítjuk át a 3. példa C) lépésében kapott Boc-Ala-Glu(OtBu)-His-OMe-t, a 3. példa D) lépésében kapott Boc-0-Ala-Glu(OtBu)-His-ÖMe-t és a 45 2. példa B) lépésében kapott dezamino-Met-Glu(OtBu)-His-OMe-t a megfelelő hidraziddá. D) H-(a-Me)Ala-Glu-His-Phe-Lys-OH 50 1 mmól, a B) lépésben kapott peptid-hidrazid 10 ml dimetilformamiddal készített oldatához 0C°-on 3 ml. In tetrahidrofurános sósavoldatot adunk. Az elegyhez —20 Cc -on 0,13 ml izoamilnitritet adunk, és az elegyet 6 percig —20 C°-on 55 keverjük. A kapott azid-oldatot 1 mmól, az A) lépésben előállított H-Phe-Lys(Boc)-OtBu 5 ml dimetilformamiddal készített oldatához adjuk. Az elegyet trietilaminnal pH = 7,4-értékre semlegesítjük, majd 70 órán át 0 C°-on keverjük. A dimetilforma- 60 midot vákuumban lepároljuk, a maradékot vizes etilacetátban oldjuk, és a szerves fázist vízzel, hidrogénkarbonát-oldattal és ismét vízzel mossuk. Az etilacetátos fázist szárítjuk, majd vákuumban bepároljuk. A maradékot szilikagélen kromatogra- 65 H-jS-Ala-Glu-His-Phe-Lys-OH Rf = 0,18 H-Ala-Glu-His-Phe-Lys-OH Rf = 0,20 dezamino-Met-Glu-His-Phe-Lys-OH Rf = 0,24 H-D-Met-Glu-His-Phe-Lys-OH Rf = 0,18 Az Rf-értékeket szilikagél-rétegen, 4 : 0,75 :0,25 :1 arányú butanol—piridin—ecetsav-víz elegyben határoztuk meg. 12. példa A-Glu-His-Phe-NH-(CH2 ) s -NH 2 -származékok előállítása (A = D-Met, Gly vagy dezamino-Met) A) H-D-Met-Glu-His-Phe-NH-(CH3 ) s -NH 2 1,17 g, a 9. példa A) lépésében előállított Boc-D-Met-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 20 ml dimetilformamiddal készített oldatához 0C°-on 3 ml 2n tetrahidrofurános sósavoldatot adunk. Az oldatot -20 C°-ra hűtjük, 0,27 ml izoamünitritet adunk hozzá, majd néhány percig keverjük. A kapott azid-oldatot ezután 2 mmól H-Phe-NH-(CH2 ) s --NH-Boc (a megfelelő Z-Phe-NH-(CH2 ) s --NH-Boc hidrogénezésével előállított termék, op.: 131-133 C°) 5 ml dimetilformamiddal készített oldatához adjuk, és' az elegyet trietilaminnal pH = 7,5-re semlegesítjük. A reakcióelegyet 70 órán át 0C°-on keverjük, majd bepároljuk, és a maradékot etilacetáttal elkeverjük. Az etilacetátot lepároljuk, és a sárgásfehér, amorf, porszerű maradékot a 2. pélcia G) lépésében leírt módor kezeljük. Az acetát-formájú Dowex X-8 gyantával végzett kezelés után H-D-Met-Glu-His-Phe-NH-(CH2 ) s -NH 2 -diacetátot kapunk, Rf-0,35 (szilikagél-rétegen, 2 :0,75 : 0,25 :1 arányú butanol—piridin—ecetsav-víz elegyben). B) H-Gly-Glu-His-Phe-NH-(CH2 ) 5 -NH 2 Az A) lépésben leírt módon Boc—Gly-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 -ból (a megfelelő metilész-11
