168890. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszichofarmakológiailag hatásos peptidek előállítására
168890 25 D) Dezamino-Met-Glu(OtBu)-Phe-Lys(Boc)-Tra A 2. példa B) lépésében kapott metilésztert dezamino-Met-Glu(OtBu)-His-N2H 3 -má alakítjuk, és 5 e vegyületet a B) lépésben kapott H-Phe—Lys(Boc)—Tra-val kapcsoljuk. A kapcsolási reakciót a C) lépésben leírt módon, azid-módszerrel végezzük. A termék Rf-értéke 0,45 (szilikagél-rétegen, 8 :2 arányú benzol-etanol elegyben). 10 E) A C) és D) lépésekben kapott peptidek védőcsoportjainak eltávolítása A péptideket a 2. példa G) lépésében leírt mó- 15 don trifluorecetsawal kezeljük, majd a trifluoracetát-aniont acetát-formájú Dowex X-8 gyanta felhasználásával acetát-ionra cseréljük. A következő vegyületeket kapjuk: 20 25 Az Rr értékeket szilikagél-rétegen, 30 4 : 0,75 :0,25 : 1 arányú butanol-piridin-ecetsav—víz elegyben határoztuk meg. 26 H-Met-Glu-His-Phe-Lys-Tra Rf = 0,20 H-D-Met-Glu-His-Phe-Lys-Tra Rf = 0,18 H-0-Ala-Glu-His-Phe-Lys-Tra Rf = = 0,17 dezamino-Met-Glu-His-Phe-Lys-Tra Rf = = 0,25 F) Szulfoxidok előállítása 35 45 mg, az E lépésben előállított peptid 2,5 mi ecetsavval készített oldatához 15jul 30%-os hidrogénperoxidot adunk. Az elegyet az 1. példában leírt módon kezeljük. A maradékot 1 :2 arányú butanol-víz elegyben felvesszük, és liofílizáljuk. A 40 következő vegyületeket kapjuk: H-D-Met(-> 0)-Glu-His-Phe--Lys-Tra H-L-Met(H> 0)-Glu-His-Phe-Lys-Tra dezamino-MetO 0)-Glu-His—Phe—Lys-Tra Rf = 0,16 Rf = 0,18 Rf = 0,22 45 Az Rf-értékeket szilikagél-rétegen, 4:0,75 : 5 0 : 0,25 :1 arányú butanol-piridin-ecetsav-víz elegyben határoztuk meg. 55 15. példa H-A-Glu-His-Phe-Arg-Trp-OH általános képletű peptidek előállítása [A = -D-Met-, -Gly-, -Val-, -Ala-, -0-Ala-, -(a-Me)Ala-, dezamino-Met-] 60 A) Boc-Arg(N02 )-Trp-ONB 5,76 g Boc-Arg(N02 )-OH 70 ml dimetilformamiddal és 2,52 ml trietilaminnal készített, 65 -10 C°-os oldatához 2,38 ml klórhangyasav-izobutilésztert adunk, és az elegyet 10 percig -10C°-on keverjük. A kapott oldathoz 6,14 g H-Trp-ONB • HCl 40 ml hideg dimetilformamiddal és 3,01 ml trietilaminnal készített oldatát adjuk. Az elegyet 30 percig -10 C°-on, 3 órán át 0 C°-on és 20 órán át 20 C°-on keverjük, majd az oldószert lepároljuk, és a maradékot 1 :1 arányú etilacetát—víz elegyben felvesszük. A szerves fázist vízzel, 5%-os vizes nátriumhidrogénkarbonát-oldattal és vízzel mossuk, szárítjuk, és vákuumban szárazra pároljuk. 8,5 g olajos terméket kapunk, Rf = 0,79 (szilikagél-rétegen, 8 :2 arányú benzol-etanol elegyben). B) H-Arg(N02 )-Trp-ONB • HCl 1 g, az A) lépésben kapott peptid 20 ml metilénkloriddal készített oldatába hűtés közben sósavgázt vezetünk. Az oldatot 1 órán át keverjük, majd a kivált csapadékot leszűrjük, és vízmentes metilénkloriddal alaposan mossuk. A csapadékot azonnal tovább reagáltatjuk. A kapott termék Rf-értéke 0,66, a kiindulási anyag Rf-értéke 0,93 (szilikagél-rétegen, 5:3:2 arányú amilalkohol-piridin-víz elegyben). Hozam: 0,88 g. C) Z-Phe-Arg(N02 )-Trp-ONB előállítása 3 g, a B) lépésben kapott dipeptid 20 ml dimetilformamiddal készített oldatához 0C°-on 1,12 ml trietilamint és 2,12 g Z-Phe-ONP-t adunk. A reakcióelegyet 2 órán át 0 C°-on és 20 órán át 20 C°-on keverjük, majd vákuumban bepároljuk. Az olajos maradékot 2 :1 arányú etilacetát-víz elegyben oldjuk, és az oldatot az A) lépésben leírt módon feldolgozzuk. A szerves fázist bepároljuk, a maradékot 5 ml metanolban oldjuk, és az oldatot lassú ütemben 100 ml vízmentes éterbe öntjük. A peptid kiválik. 2,9 g terméket kapunk, [a]p2 =-15° (c=l, dimetilformamidban), Rf = 0,48 (szilikagél-rétegen, 8 : 2 arányú benzol-etanol elegyben). D) H-Phe-Arg-Trp-OH 2 g, a C) lépésben kapott peptid 40 ml ecetsavval készített oldatához 1 g 10%-os palládium/csontszén katalizátort adunk, és az elegyet 2 napig Parr-készülékben hidrogénezzük. A katalizátort kiszűrjük, a szűrletet vákuumban bepároljuk, és a maradékot vízmentes éterrel eldörzsöljük. A kissé elszíneződött, habszerű terméket szilárd káliumhidroxid fölött szárítjuk. Az 1,1 mól ecetsavat tartalmazó terméket 98%-os hozammal kapjuk. Rf = 0,17 (szilikagél-rétegen, 5:3:2 arányú amilalkohol—piridin— víz elegyben). E) Boc-D-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-Arg-Trp-OH 1,17 g, a 9. példa A) lépésében előállított Boc-D-Met-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 20 ml dimetilformamiddal készített, 0 C°-os oldatához 3 ml 2 n 13
