168797. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új 4-hidroximetil-1-ftalazon-származékok előállítására

5 168797 6 tes mennyiségére vonatkoztatva 0,1 és 80% között változtathatjuk. Tehát bármely kívánt koncentrációt alkalmazhatunk napi 1 és 100 mg/testsúly-kg beadására. A hordozó vagy hígító valamilyen farmakológiailag elfogadható folyadék vagy szilárd anyag lehet, „hordozón" a járulékos anyagokat is értjük. Folyékony hordozó lehet például injekció céljára szolgáló desztillált víz, izotóniás sóoldat, Ringer-oldat, Locke-oldat, polietilénglikol, etilalkohol, propilénglikol, glicerin és növényi olajok. Szilárd hordozó lehet például nátriumklorid, glukóz, laktóz, keményítő, szacharóz, cetilalkohol, kakaóvaj és spermaceti. Fiziológiai próbák 1. A találmány szerinti vegyületek in vitro kifejezetten gátolják az adrenalin vagy ADP (adenozindifoszfát) által kiváltott emberi vérlemezke aggregációt. Vérlemezkében gazdag citrált emberi plazmamintákat 37C°-on 200 másodpercig a vizsgálandó vegyületből különböző mennyiségeket tartalmazó 1/10 térfogatnyi sóoldattal inkubáltunk. Utána a keverékhez 3 Mmól ADP-t vagy 1 /ug/ml adrenalint adtunk. Az elsődleges és másodlagos aggregáció intenzitását vérlemezke-aggregációmérővel (Chrono-Log, Model 300) mértük. Az ADP, illetve adrenalin okozta aggregáció intezitását minden esetben összehasonlítottuk a csak sóoldattal inkubált azonos mintáéval. Az arányt a vegyülettel kezelt minta aggregációs intenzitásának a sóoldattal kezelt minta aggregációs intenzitására vonatkoztatott százalékértékével fejeztük ki. Az eredményeket az 1. táblázatban foglaljuk össze. Az elsődleges és másodlagos vérlemezkeaggregációs intenzitást H. Yamazaki, T. Sano és mások „Platelet Functions in Thromboembolic Disorders" című, a Thrombosis et Diatheses Haemorrhagica kiadványban megjelenő cikkében és az abban referált közleményekben ismertetett eljárással mértük. Az 1. táblázatból kitűnik, hogy a találmány szerinti vegyületek az ADP, illetve az adrenalin által kiváltott elsődleges aggregációt a 787 138 számú belga szabadalmi leírás szerinti 4-hidroximetil-l-ftalazonnal és a 787 139 számú belga szabadalmi leí-20 rás szerinti 7-etoxikarbonil-4-hidroximetil-l-ftalazonnal körülbelül azonos aktivitással gátolják. Azonban a találmány szerinti vegyületek a másodlagos aggregációt sokkal hatásosabban gátolják, mint az említett ismert vegyületek. Vagyis a találmány szerinti 25 vegyületek az ADP, illetve az adrenalin által kiváltott másodlagos aggregációt 1—2/ig/ml koncentrációban már statisztikailag értékelhető mértékben gátolják, míg a 7-etoxikarbonil-4-hidroximetil-l-ftalazonnal a gátló hatás csak 5—10/tg/ml koncent-30 rációnál mutatkozik. 10 15 1. táblázat Emberi vérlemezke aggregációt in vitro gátló hatás aránya ADP 3 jumól Adrenalin 1 Mg/ml Vegyület /«/ml Esetek Esetek száma elsődleges másodlagos elsődleges másodlagos acetilszalicilsav 300 10 108,9 + 3,6 75,5 + 5,9 10 107,5 ± 2,6 62,7 ± 10,7 (kontroll) 80 10 95,7 ± 1,8 70,2 ± 10,1 10 95,6±5,2 46,6 ±7,9 40 10 98,9 ±3,4 78,0 ± 9,9 10 105,7 ± 3,3 45,0 ±7,8 4-hidroximetil-l-300 10 84,5 + 2,0 68,3 ± 3,8 10 85,4 ±3,1 60,2 ±8,0 ftálazon 80 10 82,4 ±3,2 64,9 + 6,7 10 92,3 ± 6,0 69,2 ± 7,2 (kontroll) 40 10 86,2 ± 2,5 72,0 ± 6,8 10 98,8 ±5,9 85,9 ± 10,1 7-etoxikarbonil-80 10 62,9 ± 5,0 15,7 ±0,4 10 81,9 ±6,5 33,0 ±7,1 -4-hidroximetü-l-20 14 77,0 ±5,1 58,6 ± 7,6 10 92,9 ± 16,9 71,7 ± 13,5 -ftálazon 10 14 81,9 ±5,2 67,1 ± 6,3 10 97,0 ±4,1 82,1 ±9,5 (kontroll) 5 14 90,5 ±5,6 84,9 ±6,3 10 105,8 ±6,9 80,8+13,9 6,8-dimetil-7-40 10 68,5 ±5,2 41,9 ±2,2 _ — — -etoxi-karbonil-20 10 93,1 ± 8,2 56,2 ± 6,3 10 97,5 ± 7,5 99,6 ±13,2 -4-hidroxi-metil-10 10 90,6 ±3,8 49,9 ± 6,9 10 89,1 ±7,3 57,1 ± 16,0 -1-ftálazon 5 12 93,3 ± 8,9 59,8 ±11,3 10 82,4 ±3,0 52,4 ± 7,3 (találmány 2,5 10 91,7 ±8,3 96,0 ±8,7 10 88,5 ±3,1 52,8 ± 7,5 szerinti vegyület) a vegyülettel inkubált vérlemezkében gazi dag citrált plazma füo+l A nn4Áo o*ó«^// aggregációs intenzitása sóoldattal inkubált vérlemezkében gazdag citrált plazma aggregációs intenzitása