168797. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új 4-hidroximetil-1-ftalazon-származékok előállítására

7 168797 8 2. A találmány szerinti vegyületek kifejezetten gátolják a ciklusos AMP foszfodiészterázt nyulak aortafalában és emberi vérlemezkéken. Tunica médiát és intimát nyulak aortafalából, illetve vérlemezkékben gazdag emberi plazmát homogenizáltunk, centrifugáltunk, majd a felülúszó részt triciummal jelzett ciklusos AMP-vel és különféle mennyiségű vizsgált vegyülettel inkubáltuk. A kezelt keveréket oszlopkromatografálással tisztítottuk. A nukleotidokat tartalmazó frakciók mennyiségi analízisét folyadékszcintillációs számlálóval végeztük. 10 A 2. táblázatban a vegyületek ciklusos AMP foszfodiészterázt gátló hatását mutatjuk be. A táblázatban közölt számadatok a ciklusos AMP foszfodieszteráz 50%-os gátlásához szükséges vegyületmennyiséget jelentik. Mint a 2. táblázatból kitűnik, a találmány szerinti vegyületek sokkal erősebben gátolják a foszfodiészterázt, mint a teofillin, a koffein vagy az ismert vegyületek. Ez azt jelenti, hogy a találmány szerinti vegyületek jelentősen fokozzák a ciklusos AMP koncentrációját a vérlemezkéken és az aortafalon. 2. táblázat Iso

Gumói) Vegyület emberi vérlemezke aortafal nyúl tunica nyúl tunica intima media 7-Etoxikarbonil-4-hidroximetil-1-ftalazon (kontroll) 57 52 144 Teofillin (kontroll) 91 127 155 Koffein (kontroll) 350 -460 6,8-Dimetil-7-etoxikarbonil-4-hidroximetil-1 -ftalazon (találmány szerinti vegyület) 4,1 1,6 24 35 A kísérletet H. Hidaka és M, Shibuya „A New Assay of Cyclic Nucleotide Phosphodiesterase and its Application to Humans" című, a Biochemical Medicine-ben megjelent cikkében ismertetettek szerint hajtottuk végre. 3. A találmány szerinti vegyületeknek egyedülálló vérnyomáscsökkentő hatásuk van a spontán magas vérnyomású patkányokra. A spontán hipertenziós patkányokhoz (SH patkányok) spontán magas vérnyomású patkányok szelektív tenyésztésével és hipertenziós hímekkel folyatott beltenyésztéssel jutottunk, ezért ezeket genetikusan hipertenziósoknak tekinthetjük. Az SH-patkányok hipertenziója feltűnően hasonlít az emberi hipertenzióhoz, ezért is alkalmaztunk patkányokat ennek a kóros állapotnak a vizsgálatára. Az ismert 4-hidroximetil-l-ftalazon és a 7-etoxi-40 karbonil-4-hidroximetil-l-ftalazon nem fejtettek ki szignifikáns vérnyomáscsökkentő hatást egészen 50 mg/kg intraperitoneális végy perorális adagig. A találmány szerinti vegyületekkel viszont feltűnő vérnyomáscsökkentő hatást értünk el 45 0,78-50 mg/kg intraperitoneális vagy perorális adaggal, mint az kitűnik a 3b. táblázatból. A vérnyomási próbákban 210-250 g súlyú 13—15 hetes SH-patkányokkal dolgoztunk, a vizs-50 gált vegyületeket intraperitoneálisan adtuk be. A 3a. és 3b. táblázat számadatai 3—3 patkányon végzett kísérlet középértékei. 3a. táblázat Vegyület (adag: 50 mg/kg) 4-Hidroximetil-l -ftalazon 7-Etoxikarbonil-4-hidroximetil-1 -ftalazon 183 178 Vérnyomás (Torr) 3 6 24 178 165 179 176 180 180 182 179 48 óra 184 184 4