168696. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új noapeptidamid-származékok előállítására
13 16869& 14 b) IBOC-Arg(N02)-Pro-pirrolidin készítése 30 térfogatrész trifluorecetsavban feloldunk 6,96 súlyrész IBOC-Pro-pirrolidint és az oldatot 30 percig szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Ezután vízmentes étert adunk az oldathoz. A kivált olajat dekantálással elkülönítjük és nátriumhidroxidot tartalmazó szárítószekrényben szárítjuk. Eközben, 7,98 súlyrész IBOC-Arg(NOz)-OH-t oldunk 40 térfogatrész acetonitrilben és az oldatot 0 °C-ra hűtve, ahhoz 4,0 súlyrész dinitrofenolt és 4,6 súlyrész DCC-t adunk, majd az oldatot 2 órán át keverjük. A melléktermékként keletkezett DC-karbamidot kiszűrjük és a szürlethez hozzáadjuk a fenti módon kapott olajat. A keveréket 0 °C-ra hűtjük és cseppenként 2,5 térfogatrész N-etil-morfolint adunk hozzá. A rendszert szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük. Az acetonitrilt ledesztilláljuk és a maradékot 100 súlyrész szilikagélből készített oszlopon adszorbeáljuk, majd arról 5%-os vizes metanollal leoldjuk. E tisztítás után az oldószert elpároljuk, amikoris 6,0 súlyrész por alakú terméket kapunk. A kitermelés 54,5%; op.: 190—193 °C (boml.); [x]% = -59,7° (c = l, metanolban). Elemzés a C26H43 0 6 N 7 képlet alapján: számított: C= 56,82, H=7,88, N = 17,84; talált: C =57,00, H=8,26, N = 17,51. c) IBOC-Leu-Arg(N02 )-Pro-pirrolidin készítése 30 térfogatrész trifluorecetsavban oldunk 5,49 súlyrész IBOC-Arg(N02)-Pro-pirroIidint és az oldatot 30 percig szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Ezután vízmentes étert adunk hozzá és a kivált csapadékot szűrés után gondosan megszárítva, por alakú terméket kapunk. Eközben 3,95 súlyrész IBOC-Leu-OH-t feloldunk 20 térfogatrész dioxánban. Az oldatot 0 °C-ra hűtjük, 1,52 súlyrész N-hidroxi-szukcinimidet és 2,7 súlyrész DCC-t adunk hozzá és a keveréket 2 órán át keverjük. A melléktermékként keletkezett DC-karbamidot szűréssel eltávolítjuk. A szürlethez hozzáadjuk a fenti módon készített por alakú terméket, majd 10 térfogatrésztetrahidrofuránt is. A keveréket 0 °C-ra hűtjük és cseppenként 1,4 térfogatrész trietilamint adunk hozzá, majd a rendszert egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Az oldószert ezután desztillációval eltávolítjuk és a maradékot etilacetáttal kivonatoljuk. A kivonatot 5%-os vizes nátriumhidrogénkarbonát oldattal és 10%-os vizes citromsav oldattal, majd vízzel mossuk és vízmentes nátriumszulfáton szárítjuk, víztelenítjük. Az etilacetátot desztillációval eltávolítjuk, a maradékot petroléterben felvesszük, majd etilacetát-petroléter elegyből újból kicsapjuk. A kitermelés 5,8 súlyrész; op.: 185—186 °C (boml.); [ag,3 = - 53,6° (c= 0,98, metanolban). Elemzés a C32 H J4 0 7 N 8 • H2 0 képlet alapján: számított: C = 56,45, H = 8,29, N = 16,46; talált: C= 56,97, H=8,17, N = 15,25. d) 50 térfogatrész metanolban feloldunk 0,22 súlyrész IBOC-Leu-Arg(N02 )-Pro-pirrolidint és az oldatot palládiumkorom jelenlétében 8 órán át hidrogenolízisnek vetjük alá. A metanolt elpároljuk és a maradékot éterrel kezeljük. A kapott port feloldjuk 5 térfogatrész trifluorecetsav és 1 térfogatrész 2 n HCI-ecetsav elegyben és az oldatot 40 percig szobahőmérsékleten hagyjuk állni. A trifluorecetsavat kiűzzük és a maradékhoz vízmentes étert adunk. A kivált csapadékot szűrjük és gondosan szárítjuk. Ezt a port (0,153 súlyrész) 0,24 súlyrész H-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-OH-hidrokloriddal együtt feloldjuk 3 térfogatrész DMF-ben, majd az oldathoz 0,0742 súlyrész DCC-t, 0,0644 súlyrész HONBI-t és 0,084 térfogatrész N-etil-mörfolint adunk. A keveréket 0 °C-on 5 órán át, majd egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. A melléktermékként keletkezett DC-5 -karbamidot szűréssel eltávolítjuk és a szürlethez etilacetátot adunk. A kivált csapadékot szűrjük. Mennyisége 0,26 súlyrész. E termékből 0,2 súlyrészt Amberlite XAD-2 oszlopon adszorbeálunk, ahonnan 5%-os vizes etanol (180 térfogatrész)-50%-os vizes etanol lineáris 10 gradiensű rendszerrel oldjuk le. A TLC-(vékonyrétegkromatográfia) során (szilikagél) jól kimutatható zónákat adó frakciókat gyűjtjük, majd liofilizáljuk. A kitermelés 0,02 súlyrész. [«]%= -91,0° (c= 0,5, 5%-os ecetsavban); papírkromatogránás vizsgálat: Rf = 0,72 15 (n-butanol-piridin-ecetsav-víz 30: 20: 6: 24). Aminosavelemzés: His 1,09 (1); Arg 0,96 (1); Ser 0,82 (1); Glu 1,00(1); Pro 0,96 (1); Gly 1,00(1); Leu 1,00(1); Tyr 0,96 (1). 20 5. példa H-(Pyr)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-NLe-Arg-Pro-NHC2H 5 előállítása 25 a) Z-NLe-Arg(N02)-Pro-NH-CH2 CH 3 készítése 4 térfogatrész 25%-os Br-ecetsav elegyben feloldunk 0,4775 súlyrész Z-ArgíNO^-Pro-NHQHj-öt és az oldatot 30 percig szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Ezután 50 térfogatrész vízmentes étert adunk a reakciókeverék-30 hez, a kivált csapadékot szűrjük, éterrel alaposan kimossuk és csökkentett nyomáson nátriumhidroxidon szárítjuk. Eközben, 2 térfogatrész etilacetát és 12 térfogatrész dioxán elegyében feloldunk 0,2653 súlyrész Z-NLe-OH-t. Az oldatot 0°C-ra hűtjük, 0,197 súlyrész 35 HONBI-t és 0,226 súlyrész DCC-t adunk hozzá és a keveréket 3 órán át keverjük. A kivált DC-karbamid mellékterméket szűréssel eltávolítjuk és a szűrletet hozzáadjuk a fenti módon kapott csapadék 1 térfogatrész DMF-ben készített oldatához. Az oldathoz ezután 40 cseppenként adunk 0,28 térfogatrész trietilamint. A reakciókeveréket ezután egy éjszakán át keverjük. Ezután kiűzzük az oldószert és a maradékot 100 térfogatrész kloroformmal kivonatoljuk. A kivonatot 5%-os vizes nátriumhidrogénkarbonát-oldattal, vízzel, 0,5 n sósavval 45 és vízzel mossuk, majd vízmentes magnéziumszulfáton szárítjuk. A kloroformot elpároljuk, a maradékot éterrel kezeljük, végül etanol-éter elegyből újból kicsapjuk. A kitermelés 0,41 súlyrész; op.: 109—111 °C (boml.); MD = - 50,4° (c = 0,5, etanolban). 50 Elemzés a C27 H 42 0 7 N 8 • 1/2H2 0 képlet alapján: számított: C = 54,07, H = 7,22, N = 18,68; talált: C= 53,79, H=7,09, N = 18,24. 2 térfogatrész 25%-os HBr-ecetsav elegyben feloldunk 0,155 súlyrész Z-NLe-Arg(N02 )-Pro-NHC 2 H r öt és az 55 oldatot szobahőmérsékleten 30 percig állni hagyjuk. A reakcióelegyhez ezután 50 térfogatrész vízmentes étert adunk. A kivált csapadékot szűrjük, gondosan mossuk éterrel és csökkentett nyomáson nátriumhidroxidon szárítjuk. 60 A száraz anyagot most feloldjuk 2 térfogatrész DMF-ben, az oldatot 0 °C-ra hűtjük és sorrendben 0,19 súlyrész H-(Pyr)-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-OH-hidrokloridot, 0,09 súlyrész HONBI-t, 0,103 súlyrész DCC-t és 0,1 térfogatrész N-etil-morfolint adunk hozzá. A keveréket 65 0 °C-on 5 órán át, majd szobahőmérsékleten 10 órán át 7
