168580. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3-acetoxi-metil-7-amino-cef-3-em- 4-karbonsavszármazékok előállítására
9 168580 10 7. példa N-dodekanoilcefalosporin C 300 ml vákuumban betöményített fermentlé szűrletéhez 300 ml acetont adunk, a fermentlé 5,12 g cefalosporin C-t tartalmaz. Az elegy pH-ját nátriumhidroxid oldattal 7,7-re állítjuk. Keverés közben 30C°-on 24 g dodekanoilkloridot tartalmazó 50 ml acetont adunk mintegy 3 órás időtartam alatt az elegyhez, miközben a pH-t nátriumhidroxid oldat segítségével 7,7-en tartjuk. Az elegyet egy további óra hosszat 7,0 pH értéken tartjuk, majd csökkentett nyomáson az acetont elűzzük, és a dodekánsav feleslegét szűréssel eltávolítjuk. A szűrlethez 100 ml benzolt adunk, a vizes fázist 5 n sósavval 2 pH értékre savanyítjuk. A benzolos fázist elkülönítjük, majd a vizes fázist további 100 ml benzollal extraháljuk. A benzolos extraktumokat egyesítjük és egy éjjelen át 7 C°-on tartjuk. A keletkező csapadékot leszűrjük és csökkentett nyomáson szárítjuk, ily módon 5,3 g N-dodekanoilcefalosporin C-t kapunk. A termék tisztasága 97,5%, a hozam 80%. A terméket vékonyréteg kromatográfiás vizsgálattal ellenőrizzük (GF 254 szilikagél 5,8 pH-jú foszfátpufferral telítve, oldószer: metanol-izopropanol-5,8 pH-jú foszfátpuffer, 125/25/6,5 arányú elegye, indikátor: jód/NaN, hőmérséklet: 110C°) Rf=0,70-nél fehér foltot kapunk, amelynek olvadáspontja 132-134 C°. Ultraibolya spektrum: Amax . 260 nm-nél, Amin. 233 nm-nél. E}%m = 110 260 nm-nél (0,1 n nátriumhidrogénkarbonát oldatban mérve) infravörös spektrum: 3270, 2920, 1755, 1725, 1645, 1530, 1380, 1235, 1032 cm_1 -nél. 8. példa 7-aminocefalosporánsav előállítása M-dodekanoilcefalosporin C-ből 3,6 g, a 7. példa szerint előállított N-dodekanoilcefalosporin C-t szuszpendálunk 25 ml metilénkloridban, majd 2,55 ml trietilamint és 1,92 ml N,N-dimetilanilint adunk a szuszpenzióhoz. Az elegyet 5 C°-ra hűtjük le, majd lassan 2,85 ml dimetilklórszilánt adagolunk hozzá. Ezt követően az elegyet 2 óra hosszat 28 C°-on keverjük. A reakcióelegyet —60 C°-ra lehűtjük és 3,75 g foszforpentakloridnak 30 ml metilénkloriddal készült oldatát és 3 ml N,N-dimetilanilint adunk hozzá. Az elegyet 2 óra hosszat —40 C°-on kezeljük. A hőmérsékletet —60 C°-ra csökkentjük, ekkor lassan 0,4 ml N,N-dimetilanilint tartalmazó 20 ml metanolt adunk hozzá. Az elegyet további 2 óra hosszat -40 C°-on keverjük. 20 ml melegvizet adva a reakcióelegyhez, a vizes fázist elkülönítjük, a szerves fázist 10 ml vízzel extraháljuk. A vizes extraktumokat egyesítjük, a pH-t ammóniumhidroxid oldattal 3,7-re állítjuk, és az így kapott oldatot hűtés közben egy éjjelen át állni hagyjuk. A képződött csapadékot szűréssel elkülönítjük, vízzel és acetonnal mossuk, csökkentett nyomáson szárítjuk, ily módon 1,20 g 90,2%-os 7-aminocefalosporánsavat kapunk. (A meghatározást ultraibolya spektrofotométerrel vé-5 gezzük.) Hozam: 67,5%. 9. példa N-dodekanoilcefalosporin C mono-nátriumsó 10 2600 ml 2750 7/ml cefalosporin C-t tartalmazó fermentlevet azonos térfogatú acetonnal kezelünk. A képződött csapadékot szűréssel elkülönítjük, majd a szűrlet pH-ját nátriumhidroxid oldattal 7,8-ra állítjuk. 15 3 órás időtartam alatt 48,2 g dodekanoilkloridot adunk a szűrlethez, eközben az oldatot erélyesen keverjük, a hőmérsékletet 30 C°-on, és a pH-t nátriumhidroxid oldat segítségével 7,8-on tartjuk. Fél óra elteltével a pH értékét 7,0-ra állítjuk, az 20 acetont csökkentett nyomás alatt elűzzük, majd a dodekánsavat szűréssel elkülönítjük. Az oldatot 5 n sósavval 6,0 pH értékre állítjuk, majd 200 ml benzollal extraháljuk, ily módon a maradék dodekánsavat elkülönítjük. Az így kapott oldatot 5 n sósavval 2 pH-ra állítjuk, majd 300 ml etilacetáttal négy részletben extrahálunk. Az egyesített szerves extraktumokat 100 ml jeges vízzel mossuk, vízmentes nátriumszulfáttal szárítjuk, majd csökkentett nyomás alatt 30 25 C°-on 100 ml-re betöményítjük. A betöményített oldatot 1 n 2-etilhexánsav-nátriumsóval (metilizobutilketonnal) kezeljük, ily módon a pH értékét 3,5-re állítjuk, majd hűtés közben állni hagyjuk az oldatot. A keletkező csapadékot szűréssel elkülö-35 nítjük, csökkentett nyomáson beszárítjuk, így 5,4 g N-dodekanoilcefalosporin C mono-nátriumsót kapunk. Az így kapott termék kromatográfiás és spektrofotográfiás jellemzői a 7. példában kapott termék jellemzőivel azonosak. 10. példa 7-aminocefalosporánsav előállítása N-dodekanoilcefalosporin C-mono-45 -nátriumsóból A 9. példában előállított N-dodekanoilcefalosporin C-mono-nátriumsó 1,2 g-ját a 8. példa szerint reagáltatjuk. így 0,27 g 7-aminocefalosporánsavat 50 kapunk, amelynek tisztasága 88,5% (spektrofotometriásán). Szabadalmi igénypontok: 55 1. Eljárás az I általános képletű 3-acetoximetil-7-amino-cef-3-em-4-karbonsav származékok és e vegyületek sóinak, előnyösen alkálifémsóinak és észtereinek, előnyösen szililésztereinek előállítására, 60 ahol Ajelentése CH3 COCH 2 CO- vagy R-CO-csoport, ahol R jelentése egyenes vagy elágazó, telített vagy telítetlen 9—15 szénatomos alifás szénhid-65 rogéncsoport, 5
