168359. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szubsztituált 3-amino-benzo 1,2,4-triazin-di-N-oxid (1,4) származékok, valamint e vegyületeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények és takarmány adalékanyagok előállítására
9 168359 10 az adagolás időtartamától, illetve periódusától függően, így egyes esetekben előfordulhat, hogy már kevesebb hatóanyaggal elérjük a kellő eredményt, míg más esetekben túl kell lépnünk a megadott felső határt is. A szükséges optimális adagolást és a hatóanyag adagolási módját a szakember szaktudása alapján minden egyes esetben könnyen megállapíthatja. A találmány szerinti I általános képletű vegyületek erős mikróbaellenes hatását a következő in vitro és in vivo kísérletek illusztrálják: 1. In vitro kísérletek (I. táblázat) A minimális gátlási koncentráció (MKG) meghatározását a lapocska-teszt segítségével végezzük, a következő összetételű teljes táptalajon: 10 g proteóz-pepton, 10 g borjúhúslé (Veal infúzió), 2 g dextróz, 3 g nátrium-klorid, 2 g dinátrium-hidrogénfoszfát, 1 g nátrium-acetát, 0,01 g adeninszulfát, 0,01 g guanin-hidroklorid, 0,01 g uracil, 0,01 g xantin, 12 g agar-agar 1000 g víz A tenyésztési iiőmérséklet körülbelül 37 °C és a tenyésztési időtartam 24 óra. A mycoplasmákát a sorozathígítási kísérlet (PPLO-közeg) segítségével 37 C°-on végeztük, 18, 24 és 48 órás leolvasások útján. Továbbá az 1., 4. és 6. példák szerinti vegyületek a sorozathígítási kísérlettel, Jenssen-tojás-közeg, 37 C°on 32 y/ml táptalaj minimális gátlási koncentrációt mutattak a Mycobacterium tuberculosis-szal szemben. 2. In vivo kísérletek (II. táblázat) ED50 -ként azt a mg/kg testsúlynyi dózist állapítjuk meg, amelynél a kísérleti állatként alkalmazott fehér egerek 50%-a túléli a 24 órát az intraperitoneális fertőzés után. A hatóanyagot a fertőzés előtt 15 perccel adagoljuk szubkután. II. Táblázat Alábbi EDS0 mg/kg testsúlyban megadva példák kórokozók szerinti vegyüKlebsiella Escherichia coli letek 8085 C165 1 25 25 9 25-— Az I általános képletű találmány szerinti vegyületek előállítási eljárását az alábbi példák - korlátozó jelleg nélkül - illusztrálják: 1. példa (1. képlet) 17,8 g (0,1 mól) 3-amino-benzo-l,2,4-triazin-di-N-oxid(l,4>et és 15,1 g (0,12 mól) dimetil-szulfátot 60 ml dimetil-formamidban szuszpendálunk, illetve oldunk. A reakcióelegyhez csepegtetjük 5,6 g (0,1 mól) kálium-hidroxid 5 ml vizes oldatát. Exoterm reakció zajlik le, miközben a 3-amino-benzo-l,2,4-triazin-di-N-oxid(l ,4) kék színnel feloldódik. A szín egy idő múlva barnává változik és végül narancsszínű kristályok válnak ki az oldatból. 15 g (78%) 3-N-metilamino-benzo-l,2,4-triazin di-N-oxid(l,4)-et kapunk narancsszínű kristályok alakjában. A termék dimetil-for-5 mamid-acetonitrilből átoldva 210 C°-on olvad, bomlás közben. 2. példa (3. képlet) 17,8. g(0,l mól) 3-amino-benzo-l,2,4-triazin-di-N-10 oxid(l,4)-t 100 ml acetonban szuszpendálunk és cseppenként hozzáadunk 12,6 g (0,1 mól) propionsavanhidridet. 4 óra múlva leszívatjuk a sárga kristályos 3 -N-propionil-amino -benzo -1,2,4-triazin-di-N-oxid(l,4)-et, amelynek bomláspontja: 168 °C. Kiter-15 melés:86%. 3. példa (4. képlet) A 2. példával analóg módon reagáltatunk 3-aminobenzo-l,2,4-triazin-di-N-oxid(l,4)-et és diketént, és 20 így kapjuk az I általános képletű vegyületet, melyben A jelentése a -COCH2COCH 3 képletű csoport. Kitermelés: 77%. 4. példa (5. képlet) 25 17,8 g^O.l mól) 3-ammo-benzo-l,2,4-triazin-di-N-oxid(l,4)-et feloldunk 80 ml víz és 4 g (0,1 mól) nátrium-hidroxid keverékében. A kék oldathoz 10,5 g (0,1 mól) benzoil-kloridot csepegtetünk. Enyhén exoterm reakció indul be és barna csapadék válik le. Ezt 30 leszívatjuk és így kapunk 25 g (89%) 3-N-benzoil-amino-l,2,4-triazin-di-N-oxid(l,4)-et sárgásbarna kristályok alakjában; dimetil-formamidban oldva és acetonitrillel kicsapva az op.: 178 °C, bomlás közben. 35 5. példa (6. képlet) Az 5. példával analóg módon reagáltatunk 3-amino-benzo-l,2,4-triazin-di-N-oxid(l,4)-et és sztearinsav-kloridot, és így kapjuk a 3-N-sztearilamino-benzol,2,4-triazin-di-N-oxid(l,4)-et; bomláspont: 148 °C. 40 Kitermelés: 61%. 6. példa (7. képlet) 17,8 g (0,1 mól) 3-ammo-benzo-l,2,4-triazin-di-N-oxid(l,4)-et 100 ml dimetil-formamidban szuszpendá-45 lünk és körülbelül 55 C°-on 2 órán keresztül keverjük 5,7 g (0,1 mól) metilizocianáttal és 2 ml piridinnel. Lehűlés és leszávatás után 15 g (66%) 3-(n-metil-amino-karbonil-amino)-benzo-l,2,4-triazin-di-N-oxid(l,4)-ot sárga kristályok alakjában kapunk. Bomlás-50 pont: 198 °C. 7. példa (8. képlet) A 7. példával analóg módon reagáltatunk 3-amino-benzo-1,2,4-triazin-di-N-oxid (1,4)-et és ciklohexil-izo-55 danátot, és így kapjuk a 3-(N-cikloríexil-aminoJcarbo-nil-amino)-benzo-l,2,4-triazin-di-N-oxid-(l,4)-ot. Bomláspont: 203-206 °C. Kitermelés: 43%. A II általános képletű kiindulási anyag előállítását a következő példa illusztrálja: 60 A példa (A képlet) 13,6 g (0,1 mól) benzofuroxánt szobahőmérsékleten (körülbelül 20 C°-on) 40 ml metanol és 40 ml víz elegyében szuszpendáljuk, majd részletekben hozzáadunk 17,2 g (0,2 mól) dinátrium naanidot. A 65 hőmérséklet eközben körülbelül 50—60 C°-ra emelke-5
