168188. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7béta-amino-cefém-3-on- 4-karbonsav-származékok előállítására
41 168188 42 kromatogram (szilikagélen, előhívás jóddal): Rf = 0,12 n-butanol-ecetsav-víz 67 :10 : 23 rendszerben, Rf=0,28 n-butanol-piridin-ecetsav-víz 40 : 24 : 6 : 30 : rendszerben és Rf = 0,21 etilacetát-n-butanol-piridin-ecetsav-víz 42 : 21 : 21 : 6 : 10 rendszerben. IR-abszorpciós spektrum: (ásványi olajban) jellemző sávok 3,12, 3,80, 4,12 (váll), 4,92, 5,54, 6,05 (váll), 6,19, 6,55, 7,05, 7,42, 8,23, 8,79, 9,55, 12,08, 12,69 és 13,04ju-nál. 0,070 g 7j3-amino-3-cefem-4-karbonsav 2 ml abszolút metilénkloridos szuszpenziójához 0,031 g trietilamin 0,35 metanollal készített oldatát adjuk, a szuszpenziót 5 ml abszolút tetrahidrofuránnal hígítjuk és 30 percen át ultrahangfürdőn keverjük. 0,102 g terc-butiloxikarbonil-D-a-fenilglicint 5 ml abszolút metilénkloridban oldunk, 0,040 g 4-metilmorfolint adunk hozzá és 10 ml acetonitrillel hígítjuk. Az elegyet —20°-ra hűtjük és keverés közben 0,060 g klórhangyasav-izobutilésztert adunk hozzá, miközben a reakciót 30 percig -15°-on végezzük. Az elegyet ismét — 20°-ra hűtve a 7/3-amino-3 -cefem-4-karbonsav-trietilammóniumsój ának tejszerű szuszpenzióját adjuk hozzá. A reakcióelegyet 30 percig —15°-on, további 30 percig pedig 0°-on, végül két órán át szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet leszűrjük, acetonitrillel, metilénkloriddal és dietiléterrel utánamossuk, szárítjuk, majd szárazra pároljuk. A maradékot etilacetátban és vízben felvesszük, és az elegyet erős keverés és jéggel történő hűtés közben 5 mólos vizes foszforsavoldattal pH = 2 értékre savanyítjuk. A szerves fázist elválasztjuk és négyszer kevés telített vizes nátriumklorid-oldattal mossuk. A vizes mosófolyadékokat kétszer etilacetáttal visszaextraháljuk, az egyesített szerves extraktumokat magnéziumszulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot 10 g szilikagélen (oszlop, 5% vízadalék) kromatografáljuk. Először metilénkloriddal és emelkedő mennyiségű acetont tartalmazó metilénkloriddal a reagálatlan terc-butiloxikarbonil-D-a-fenilglicint, majd ezt követően a 70-(D-a-terc-b util oxikar boni lamino-a-fe nilacetilaminoj-3-cefem4-karbonsavat eluáljuk, mely utóbbit amorf alakban kapjuk. UV-abszorpciós spektrum (95%-os etanolban): Xmax=252nyi (e = 5100). IR-abszorpciós spektrum (metilénkloridban): jellemző sávok 5,61, 5,85 és 6,12 ju-nál. Vékonyrétegkromatogram: (szilikagélen, előhívás jódgőzzel) Rf = 0,6-0,7 n-butanol-ecetsav-víz 44 : 12 :44 rendszerben. 0,02 g 7j3-(D-a-terc-butiloxikarbonilamino-a-fenil-acetilamino)-3-cefem-4-karbonsav 3 ml tiszta trifluorecetsawal készített oldatát szobahőmérsékleten 15 percig állni hagyjuk. A keletkezett oldatot forgó bepárlón bepároljuk, a maradékot a trifluorecetsav teljes eltávolítására kétszer 1 : 1 arányú kloroform-toluol eleggyel szárazra pároljuk, majd 16 órán át 0,0001 Hgmm nyomáson szárítjuk. A 7/3(D-a-fenilglicil-amino)-3-cefem-4-karbonsavat sárgás amorf porként kapjuk, ha a keletkezett trifluoracetátsó metanolos és vizes oldatához egyenértéknyi mennyiségű trietilamint adunk, az elegyet bepároljuk és a maradékot metilénkloriddal digeráljuk. Vékonyrétegkromatogram: (szilikagélen, előhívás jódgőzzel) Rf=0,29 n-butanol-piridin-ecetsav-víz 40 : 24 : 6 : 30 rendszerben. UV-abszorpciós spektrum (vízben): Xmax = 250 mp (e = 4300). 5 24. példa 0,5 g 3-n-butiloxi-7/3-(D-a-terc-butiloxikarbonil-10 amíno-a-feniIacetilamino)-3-cefem-4-karbonsav-difenilmetilészter, lml anizol és 15 ml trifluorecetsav elegyét 15 percig 0°-on tartjuk, majd 200 ml hicleg toluollal hígítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot dietiléterrel elkeverjük és a 15 por alakú színtelen maradékot leszűrjük, dietiléterrel mossuk és nagyvákuumban szárítjuk. Ily módon a 3-n-butiloxi-7j3-(D-a-fenilglicilamino)-3-cefem-4-karbonsav trifluoracetátját kapjuk, melyet 5 ml vízben oldunk. Az oldatot kétszer 10 ml etilacetáttal 20 mossuk, és a vizes fázis pH-értékét metanolos trietilaminoldattal 5-re állítjuk. Ezután az oldatot csökkentett nyomáson bepároljuk, a maradékot kis mennyiségű acetonban felvesszük és zavarosodásáig dietiléterrel hígítjuk. A keletkezett 3-n-butiloxi-25 -7j3-(D-a-fenilglicilamino)-3-cefem-4-karbonsav belső sóját, mely kristályos csapadékként keletkezik, leszűrjük. Op.: 141 — 142°. Vékonyrétegkromatogram (szilikagélen): Rf=0,21 etilacetát-piridin-ecetsav-víz 62 : 21 : 6 : 11 rendszerben. UV-abszorpciós 30 spektrum (0,1 n vizes nátriumhidrogénkarbonát-oldatban): Amax = 267 mju (e = 7300). 25. példa 35 2,70 g 3-etoxi-7j3-(D-a-terc-butiloxikarbonilamino-a-fenilacetilamino)-3-cefem-4-karbonsav-difenilmetilészter, 6,7 ml anizol és 67 ml hangyasav elegyét egy órán át szobahőmérsékleten keverjük, 200 ml 40 toluollal hígítjuk, majd csökkentett nyomáson bepároljuk és a maradékot nagyvákuumban szárítjuk, dietiléterrel digeráljuk és leszűrjük. A barna porként keletkezett 3-etoxi-7|6-(D-a-fenilglicilamino)-3--cefem-4-karbonsav formiátot, mely barna porként 45 keletkezik, 8 ml vízben oldjuk, as vizes fázist 2 n vizes sósavoldattal megsavanyítjuk, 10 ml etilacetáttal mossuk, 10%-os metanolos trietilaminoldattal az oldat pH-ját 5-re állítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot kis mennyiségű meta-50 nolban felvesszük, és az amorf, enyhén sárga 3-etoxi-7/3-(D-a-fenilglicilamino)-3'Cefem-4-karbonsav belső sót metilénklorid és dietiléter hozzáadásával kicsapjuk. Vékonyrétegkromatogram (szilikagélen): Rf = 0,17 _etilacetát-piridin-ecetsav-víz 62 : 21 :6 :11 55 rendszerben. UV-abszorpciós spektrum (0,1 mólos vizes nátriumhidrogénkarbonát-oldatban): X = 263 mu (e = 5500). 60 26. példa 4,6 g 3-benziloxi-7j3-(D-a-terc-butiloxikarbonilamino-a-fenilacetilamino)-3-cefem4-karbonsav-difenilmetilészter, 10 ml anizol és 100 ml trifluor-65 ecetsav elegyét 15 percen át 0°-on keverjük, majd IX
