168188. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7béta-amino-cefém-3-on- 4-karbonsav-származékok előállítására
39 168188 40 nyomáson bepároljuk. A maradékot kétszer egymás után 1 : 1 arányú kloroform-toluol elegyben felvesszük és szárazra pároljuk, majd 5 g szilikagélen (5% víztartalom) kromatografáljuk. 30-50% acetont tartalmazó metanollal az amorf 3-metoxi-7/3- 5 -fenilacetilamino-3-cefem-4-karbonsavat eluáljuk, majd dioxánból liofilizáljuk. UV-abszorpciós spektrum (95%-os vizes etanolban): Xmax=259mju (e = 4970) és 265 mfi (e = 4950). IR-abszorpciós spektrum (metilénkloridban): jellemző sávok 3,03, 10 5,60, 5,74, 5,92, 6,24 és 6,67 /i-nál. 23. példa 15 0,312 g 3|-hidroxi-70-fenilacetil-amino-cefam-4£-karbonsav-difenilmetilészter 15 ml piridinnel és 7 ml ecetsavanhidriddel készített oldatát 16 órán át 0°-on állni hagyjuk, majd 50 ml toluol hozzáadása után vákuumban bepároljuk. A maradékot etil- 20 acetátban felvesszük, a szerves fázist telített vizes nátriumhidrogénkarbonát-oldattal és telített vizes nátriumklorid-oldattal mossuk, nátriumszulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot preparatív vékonyrétegkromatográfiával 25 tisztítjuk, 100 cm hosszú szilikagéles lemezeket használunk, és futtatószerként toluol-etilacetát 1 :1 rendszert alkalmazunk. Rf = 0,47 értékkel a 3íj-acet i 1 o xi-70-fenilacetilamino-cefam-4£-karbonsav-difenilmetilésztert kapjuk, mely metilénklorid és pentán 30 elegyéből átkristályosítva 162-164°-on olvad. [a]l° = +55° ±1° (c = 0,492, kloroformban). UV-abszorpciós spektrum (95%-os vizes etanolban): Xmax=253nvi(e = 700), 258 mfi (e = 820) és 265 m/i (e = 660). IR-abszorpciós spektrum (meti- 35 lénkloridban): jellemző sávok 2,96, 5,77, 5,97, 6,28 és 6,71 /H-nál. 0,150 g 3£-acetiloxi-7|3-fenilacetilamino-cefam-4£-karbonsav-difenilmetilészter és 5 ml metilénklorid 40 elegy éhez 0,1 ml trietilamint adunk és a reakcióelegyet 16 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. A reakcióelegyet ezután 100 ml metilénkloriddal hígítjuk, a szerves fázist 50 ml 2 n sósavval és 50 ml telített vizes nátriumklorid-oldattal mos- 45 suk, magnéziumszulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot preparatív vékonyrétegkromatográfiával (2 db 20 cm hosszú szilikagéles lemezen, futtatószerként toluol-etilacetát 3 : 1 rendszert használva) tisztítjuk. 50 Rf=0,36 értéknél sárgás olajat kapunk, melyet metilénklorid és hexán elegyéből kristályosítunk ki. A termék a 161-163° olvadáspontú 7/3-fenilacetilamino-3-cefem-4-karbonsav-difenilmetilészter. [aß0 = +30° ± 1° (c = 0,968, dioxánban). Vékony- 55 rétegkromatogram (szilikagélen, előhívás UV-fényben és jódgőzzel): Rf=0,55, toluol-aceton 4:1 rendszerben, Rf=0,35, toluol-aceton 9 : 1 rendszerben és Rf = 0,40 toluol-etilacetát 4 : 1 rendszerben. UV-abszorpciós spektrum: Xmax = 258 mju (e = 6100) 60 és Xmin =240mju(e. = 5250) (metilénkloridban) és Xmax = 259 m/i (e = 6050) és ^min = 239 m/i(e = 4950) 95%-os vizes etanolban). IR-abszorpciós spektrum: jellemző sávok 2,90, 5,57, 5,76, 5,91, 6,09, 6,66, 7,13, 8,12, 8,63,65 9.07, 10,43 és 12,22 ju-nál (metilénkloridban) és 3,01, 5,60, 5,82, 6,04, 6,08 (váll), 6,51 és 7,31 /x-nál (ásványi olajban). 1,94 g 7j3-fenilacetilamino-3-cefem-4-karbonsav-difenilmetilészter 100 ml abszolút metilénkloriddal készített oldatát -15°-ra hűtjük, majd 3,86 ml abszolút piridint és 31,6 ml 8%-os metilénkloridos foszforpentaklorid-oldatot adunk hozzá, és a reakcióelegyet 30 percig -10°-on, majd további 30 percig -5°-on keverjük. Az aranysárga oldatot -20°-ra hűtjük, és 26,8 ml abszolút metanolt adunk hozzá olyan sebességgel, hogy a belső hőmérséklet -10°-fölé ne emelkedjék. A reakcióelegyet egy órán át -10°-on keverjük, majd további egy órán át 25-30° hőmérsékleten állni hagyjuk, és erős keverés közben 80 ml 0,5 mólos vizes káliumdihidrogénfoszfát-oldatot adunk hozzá. A kétfázisú reakcióelegy pH-ját 20%-os foszforsavoldat hozzácsepegtetésével 2-re állítjuk, 20 percig szobahőméréskleten keverjük, és a fázisokat elválasztjuk. A vizes oldatot kétszer metilénkloriddal mossuk, az egyesített szerves fázisokat 2 x 20 ml vízzel mossuk és vízmentes magnéziumszulfát felett szárítjuk. Az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk, az olajos maradékot 100g szilikagéllel töltött oszlopra (5% víztartalmú) visszük fel. Metilénkloriddal eluálva a fenilecetsavmetilésztert, és 3% ecetsavmetilésztert tartalmazó metilénkloriddal a 7/3-amino-3-cefem-4-karbonsav-difenilmetilésztert eluájuk, melyet kis mennyiségű metilénkloridban oldunk, és az oldathoz melegen dietilétert adva a termék kikristályosodik, a terméket hideg dietiléterrel mosva és szárítva 153-154° olvadáspontú tűs kristályokat kapunk. Vékonyrétegkromatogram: (szilikagélen) Rf=0,50 toluol-aceton 4:1 rendszerben, Rf=0,65 toluol-aceton 2 : 1 rendszerben, Rf = 0,40 toluol-etilacetát 1 :1 rendszerben és Rf = 0,33 toluol-etilacetát 1 : 1 rendszerben. UV-abszorpciós spektrum: Xmax 257 m/u (e=8150) és Xmin = 245 in (e =.7730) (metilénkloridban) és A.m ax = 25"5 iryu (e = 5500) és ^min = 236 m// (e = 4650) (95%-os etanolban). IR-abszorpciós spektrum: jellemző sávok 2,91, 2,97, 5,61, 5,78, 6,11, 7,14, 8,15, 8,29, 9,14 és 9,83ju-nál (metilénkloridban) és 2,99, 5,65, 5,77, 6.08, 7,14, 7,74, 7,84, 8,18, 8,53, 9,14, 9,85 és 10,35 /u-nál (ásványi olajban). 0,380 g 7j3-amino-3-cefem-4-karbonsav-difenilmetilészterhez 2 ml anizolt és 8 ml abszolút trifluorecetsavat adunk, a tiszta oldatot 10 percen át szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd körülbelül 20 ml abszolút toluolt adunk hozzá. Az elegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, a maradékot toluollal kétszer szárazra pároljuk, majd 5 ml metanol, 5 ml dietiléter és 0,5 ml víz elegyében szuszpendáljuk. A szuszpenzió pH-értékét 5%-os metanolos trietilamin-oldat hozzáadásával 3,5-értékre állítjuk, majd a reakcióelegyet 30 percen át állni hagyjuk, a finom csapadékot megfelelő üvegszűrőn leszűrjük. Az enyhén sárgás színű szüredéket metanol és metilénklorid elegy ével, majd dietiléterrel mossuk, és csökkentett nyomáson 35° hőmérsékleten szárítjuk. Az ily módon finom mikrokristályos porként kapott 7|3-amino-3-cefem-4-karbonsav bomláspontja 215°, vékonyréteg-20
