168152. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1,3-bisz-(béta-etilhexil)- 5-amino-5-metil-hexahidro-pirimidin- piridin-3-karboxilát előállítására
168152 Az elegyet két és fél óra hosszat 50 C° hőmérsékleten keverjük, majd szobahőmérsékletre lehűtjük, a kristályokat leszűrjük. Hozam: 65-70%. 8. példa a) A bázis felszabadításához 1 mól 80%-os (nyers) hexetidin-nikotinátot alkalmazunk. A sót 1000 ml n nátriumhidroxid-oldathoz adjuk. Az j n oldathoz 40—80 C° közötti forráspontú petrolétert adunk, majd a só teljes oldódása után a szerves fázist elkülönítjük, vízzel mossuk, és szárítjuk. Ezt követően a szerves fázist vákuumban 5—10 Torr nyomáson 40 C°-on be pároljuk. A tiszta hexetidin 15 hozama 50-60%. b) 1 mól 80%-os (nyers) hexetidin-nikotinátot felesleges mennyiségű vizes 1 n nátriumhidroxid-oidatban szuszpendálunk, majd az oldathoz 1000 ml benzolt adunk. A só feloldódása után a szerves- 2 C fázist elkülönítjük, vízzel mossuk, nátriumszulfáttal szárítjuk, majd az oldószert vákuumban (5-10 Torr) 50 C°-on bepároljuk. A tiszta hexe* tidin hozama 60-70%. c) 1 mól 80%-os (nyers) hexetidin-nikotinátot 25 felesleges mennyiségű 3%-os ammónia oldathoz adjuk, majd a felszabaduló hexetidin bázist 50 ml dietiléterben feloldjuk. A szerves fázist elkülönítjük, vízzel mossuk, nátriumszulfáttal szárítjuk, az oldószert vákuumban (5-10 Torr) 50C-on 30 bepároljuk. A tiszta hexetidin hozama 70%. d) 1 mól 80%-os nyers hexetidinből előállított hexetidin-nikotinátot felesleges mennyiségű 1 n nátriumhidroxid-oldattal kezeljük és a kapott bázist 60,0 ml petrolétefben (40/80) felvesszük. A szerves 35 fázist elkülönítjük, nátriumszulfáttal szárítjuk, majd az oldószert vákuumban 5—10 Torr nyomáson 50 C° hőmérsékleten ledesztilláljuk. A tiszta hexetidin hozama: 80%. e) 1 mól 80%-os nyers hexetidin-nikotinátot 40 felesleges mennyiségű 5%-os vizes nátriumkarbonát oldattal kezeljük, majd 40-80 C° közötti forráspontú petroléterrel elegyítjük. A szerves fázist elkülönítjük, szárítjuk. Az oldószert vákuumban 5—10 Torr nyomáson 50 C° hőmérsékleten ledesz- 45 tilláljuk. A tiszta hexetidin hozama mintegy 60%. f) 1 mól 80%-os (nyers) hexetidin-nikotinátot n káliumhidroxid-oldattal elegyítünk, majd 40,0 ml dietilétert adunk hozzá. Az elegyet addig keverjük, míg a só teljesen feloldódik, ezt követően a szerves 50 fázist elkülönítjük, és nátriumszulfáttal szárítjuk. Az oldószert vákuumban 5-10 Torr nyomáson 40 C° hőmérsékleten ledesztilláljuk. Hozama: 60%. g) 1 mól 80%-os (nyers) hexetidin-nikotinátot felesleges mennyiségű 3%-os ammóniaoldathoz 55 adunk, majd a hexetidint 40,0 ml petroléterrel extraháljuk. Az oldószert vákuumban 5-10 Torr nyomáson 40 C° hőmérsékleten bepároljuk. A tiszta hexetidin hozama: 65%. 60 Az a)-d) példák szerint előállított hexetidin tisztasága 99,92-99,98%. A tiszta termék törésmutatója: [nß° = 1,4652. A kapott, tiszta hexetidinből nikotinsawal az 1-7. példák szerint, sót képezünk. Ily módon 65 magas hozammal, igen tiszta hexetidin-nikotinátot kapunk. A vizsgálatok során a táblázatban feltüntetett LDS0 értékeket kaptuk. Táblázat Vizsgálati anyag p. 0. (mg/kg) i.p. (mg/kg) hexetidin 960 (519-1776) 33 (20-55) hexetidin-oxalát 970 (561-1678) 23 (19-29) hexetidín-cinnamát 1740 (1543-1963) 54 (35-83) hexetidin-nikotinát 1830 (1331-2516) 63 (46-86) A bakteriosztatikus hatás vizsgálatához hexetidin, hexetidin-oxalát és hexetidin-nikotinát oldatot alkalmazunk. Az oldatok összetételét az alábbi táblázat tünteti fel. Vizsgálati oldat hexetidin-oldat hexetidin-oxalát-oldat hexetidin-nikotinát-oldat összetétele 100 mg hexetidin/1Q0 ml 113,2 mg hexetidin-oxalát, (100 mg hexetidin/100 minek felel meg) 136,2 mg hexetidin-nikotinát (100 "mg hexetidin/100 ml: nek felel meg) A fertőzéshez szuszpenziót készítünk. Steril, standard tápagart tartalmazó petricsészét törzstenyészettel (Escherichia coli, Proteus vulgaris, Pseudomonas aeruginosa) oltunk le. A tenyészetet 24 óra hosszat 30 C°-on inkubáljuk, majd felhasználjuk, illetőleg 4 C°-on tároljuk. A petricsészékben levő csírákat 5 ml fiziológiás konyhasó-oldattal felvesszük, majd 50 ml konyhasóoldattal hígítjuk. (1 : 10) A táptalaj-oldat beoltását a következőképpen végezzük: 60 g/liter koncentrációjú tioglikolát oldatot 100 csepp (mintegy 5 ml) fenti, 1:10 arányban hígított baktérium-tenyészettel fertőzünk, majd az elegyet rázogatással homogenizáljuk. 10 (100 ml-es) reagens üvegben hígítási sorozatot készítünk. Az oldatok koncentrációja a következő: Hexetidin koncentráció: 1000, 500, 250, 125, 62,5 ~ 31, ~ 16, ~8, ~4~27ml. Minden egyes reagens üvegbe 5 ml, mikroorganizmussal beoltott tiççlikolat táptalajt viszünk. A vizsgálati edéay«ket 30 C°-on 24-72 óráig inkubáljuk, majd ezt követően értékeljük. 3
