168121. lajstromszámú szabadalom • Eljárás aminoglikozid-antibiotikumok előállítására
13 168121 14 A JI-20A és JI-20B antibiotikumok laboratóriumi kísérleti állatokban, például egerekben előidézett patogén bakteriális fertőzésekkel szemben bakrériumölő hatásúak. Védőhatásukat egerekben vizsgáltuk. Az antibiotikumot 0,5% karboximetilcellulózt tartalmazó vizes közegben szuszpendálva vagy oldva, két adagban adtuk be; az egyiket röviddel a baktériummal való intraperitoneális fertőzés előtt, a másikat 4 órával utána. A fertőzött, de kezeletlen (kontroll) egerek általában 18 órán belül elpusztultak. A kezelt csoport túlélési arányát a fertőzés után 48 órával állapítottuk meg. Az adatokat pontos szabványeljárásokkal elemeztük, hogy a PD50 értékeket 95%-os megbízhatósági határok között határozhassuk meg. Az eredményeket a 7. táblázat tartalmazza. 7. táblázat In vivo antiabkteriális hatás Fertőző baktérium Staphylococcus aureus Gray 979 Streptococcus pyogenes C2V Pseudomonas aeruginosa 413 1516-7 Escherichia coli 626 11775 Salmonella sp. S. C. Védőhatás egéren, PD 50 (mg/kg) JI-20A JI-20B antibiotikum antibiotikum 2,9 14,0 3,0 2,8 40,0 40,0 50,0 50,0 50,0 50,0 15,0 15,0 4,0 . 8,0 3,0 4,5 A 8. táblázatban az intravénásán beadott JI-20A és JI-10B antibiotikumok toxikusságát szemléltetjük. 8.táblázat Toxicitás LDS0 (mg/kg) JI-20A 115 JI-20B 115 A JI-20A és JI-20B antibiotikumokat és savaddíciós sóikat egyedül vagy detergensekkel és/vagy más baktériumölő szerekkel együtt a velük szemben érzékeny mikroorganizmusok, különösen a fent említettek növekedésének gátlására vagy számuk csökkentésére használhatjuk. így az antibiotikumok mosóoldatokban egészségügyi célokra, például laboratóriumi üvegedények és felszerelések tisztítására használhatók. Ezenkívül mosásra, például laboratóriumi munkaruhák bakteriosztatikus öblítőszereként is használhatók. Magát a gentamicint, JI-20A és JI-20B antibiotikumokat tartalmazó komplexet is lehet a fent említett célokra használni. Ezáltal feleslegessé válhat az antibiotikumkeverék szétválasztása komponenseire. „... Az antibiotikumok Schiff-bázis-oxazolidin-származékait olajokban és zsírokban, például olajalapú festékekben, fúróolajokban, kenőzsírokban stb. bakteriosztatikus szerként lehet használni. A következő példák közelebbről szemléltetik a találmányt, mégpedig az 1. és 2. példák a Micromonospora purpurea JI-20 (speciálisan az NRRL 5467 törzsnek megfelelő tenyészetet alkalmazzuk) tenyésztését és a .JI—20 antibiotikum-kompex és komponensei előállítását szemléltetik;'a 3. és 4. példák az antibiotikumtermék elkülönítését és a JI-20 komplex komponenseire való felbontását ismertetik, míg az 5-12. példák a speciális származékok előállítását közlik. A 13-16. példák a gyógyszerkészítmények előállítását írják le. 1. példa 30 Törzstenyészet előállítása A) Első szakasz 300 ml-es steril rázólombikba betöltjük a következő összetételű steril táptalajt: húskivonat 0,3 g 35 tripton 0,5 g élesztőkivonat 0,5 g oldható keményítő 2,4 g dextróz 0,1 g kalciumkarbonát 0,1 g 40 víz 100,0 ml Mindegyik lombikot tű vagy kacs segítségével beoltjuk Micromonospora. purpurea JI-20 tenyészettel, és a lombikokat 28 C°-on 2-3 napig keverés közben inkubáljuk. 45 B) Második szakasz 3 literes steril lombikokba az A) szakaszban leírt összetételű 1 liter steril táptalajt töltünk. Steril körülmények között hozzáadunk 50-100 ml A) szakasz szerint előállított fermentált keveréket, és 28 50 C°-on keverés közben 2-3 napig inkubáljuk. A fermentléket steril körülmények között egyesítjük, centrifugáljuk, és a felülúszó folyadékot eltávolítjuk. A sejtmicéliumot tartalmazó üledéket steril vízzel mossuk, és a sejtmicéliumot a benne maradt vízzel 55 együtt törzstenyészetként megtartjuk. A törzstenyészetet 0 C°-nál alacsonyabb hőmérsékleten tartjuk el. 2. példa A) Oltóanyag előállításának első szakasza 60 Az 1. példa A) szakaszában leirt összetételű 1 liter steril táptalajt 3 literes steril rázólombikba töltünk, steril körülmények között beoltjuk az 1 példa szerint készült 50 ml törzstenyészettel, és 2-3 napig 28 C°-on percenként 280 fordulatú keverővel keverve 65 inkubáljuk. 7
