167981. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 2-[N-(n-butil)-(terc-butil)-amino]2'-6'-acetoxilidid előállítására
3 167981 4 A következő példa szemlélteti az I képletű vegyület előállítását. Példa 600 g 2-jód-2',6'-acetoxilidid, 643 g N-(n-butil)- 5 (tercbutil)-amin és 4,5 liter benzol keverékét visszafolyató hűtővel és mechanikai keverővel ellátott lombikban 15-16 óra hosszat visszafolyatás közben melegítjük. Az N-(n-butil)-(terc-butil)-amin az irodalomból ismert [J. N. Tilley és A. A. R. Sayigh, J. Org. 10 Chem. 28, 2076 (1963)] és n-butiraldehidből és terc-butilaminból állítható elő. Hűtés után a kivált 482 g N-(n-butil)-(terc-butil)-ammóniurnjodidot kiszűrjük. A szűrletet 4n sósavval extraháljuk. A savas kivonatot szűrjük, és dietiléterrel mossuk, majd 7n 15 vizes nátrium-hidroxid-oldattal meglúgosítjuk, a kivált csapadékot metilénkloridban oldjuk, és a lúgos oldatot ugyanezzel az oldószerrel extraháljuk. Az egyesített metilénkloridos oldatokat nátrium-szulfáton szárítjuk, majd szűrjük, és bepároljuk. A maradékot 20 aceton és víz 7-8:1 arányú keverékéből átkristályosítva, 414 g I képletű terméket kapunk. Olvadáspontja 140-140,5°. A 2-[N-(n-butil-terc-butil-amino]-2',6'-acetoxilididet úgy is előállíthatjuk, hogy (2-terc-butilamino)- 25 2',6'-acetoxilididet n-butilbromiddal reagáltatunk. A cím szerinti vegyület 2-klór-2',6'-acetoxilidid és N-(n-butil)-(terc-butil)-amin reakciójával is előállítható. Biológiai vizsgálat 30 Az alábbi táblázatokban a következő jelzést használjuk: C 2-[-(n-butil)-(terc-butil-amino]-2',6'-acetoxilidid (I képletű vegyület) Az 1. táblázat adatai a patkány ülőideg blokkolása- 35 nak tartalmát mutatják, amikor az érzéstelenítést 0,25-1,0 súly/tf.% C vegyülettel A. F. Truant módszerével [Arch. Int. Pharmacodyn. 115,483-497 (1958)] végeztük. A frekvenciák és tartósságok jók voltak. 40 1. táblázat Patkány ülőideg blokkolása C vegyület. Epinefrin 1:100 000 Időtartam, perc 45 Koncentráció, % Frekvencia Több mérés középértéke 0,25 9/10 174 ± 26 0,5 10/10 200 ±18 50 1,0 10/10 237 A C vegyület toxicitását egerekben, patkányokban és tengerimalacokban vizsgáltuk. Egerekben az intraperitoneális toxicitás (LD50 ) 284 (218-531) mg/kg volt. Patkányokban a szubkután toxicitás 1068 55 (813-1507) mg/kg volt. Az összes szubkután beadás- • sal vizsgált tengerimalac túlélte 646 mg/kg adag hatását. A találmány szerinti vegyület az ismert tetrodotoxin, dezoxitetrodotoxin és szaxitoxin biotoxinokkal 60 kombinálva is használható. A C vegyület és tetrodotoxin (TTX) tartalmú készítmény hatását béka ülőideg blokkolására szintén kipróbáltuk. A kísérletekben a pH 5,6 volt, és a használt módszert alább ismertetjük. 6 5 A C vegyület esetében a kombinált készítmény által előidézett potenciálcsökkenés 94% volt, amikor pedig C vegyületet, illetőleg TTX-et egyedül használtunk, a csökkenés 22%, illetve 15% volt. Ezért a vegyületek egyedüli használatához képest határozott előnyt jelent a két vegyület kombinált alkalmazása (2. táblázat). 2. táblázat A tetrodotoxin (TTX) és a C vegyület együttes jelenlétének hatása az izolált ép béka ülőideg blokkolására 5,6 pH-nál Érzéstele- ., . . . - Potenciál %- Végzett kí-Koncentracio ..., . . , . , nito szer os csökkenése serletek szama C 0,625 mmól 22(10-18) 16 TTX 3-10-7 mól 15(8-) 17 C + TTX mint fent 94(80-100) 17 Kísérleteket végeztünk kutya peridurális érzéstelenítésében szaxitoxin biotoxin és C vegyület kombinációja idegblokkoló hatásának megállapítására. A kísérleti módszer a következő volt: Ivarérett hím kopókat sebészileg úgy készítettünk elő a vizsgálatra, hogy egy ágyéki csigolyába punkciós tűt illesztettünk be, hogy így az érzéstelenítő oldatot be lehessen adni a peridurális térbe. A helyi érzéstelenítő oldat beadása után meghatározott időközökben vizsgáltuk a herezacskó környékén és a hátsó végtagok ujjainál a fájdalommentesség tartósságát. A herezacskó környékén okozott fájdalomingerekre való reagálás által állapítottuk meg az ágyéki 3-4 és keresztcsonttájéki 1-2-3 gerinc-idegvégződések érzéstelenedését. Ezek az idegvégződések vannak legtávolabb az injekció (ágyéki 6) helyétől, és ezért itt legkevésbé valószínű az érzéstelenedés. A felépülés első jele gyakran az, hogy a fájdalomérzés a herezacskóban visszatér, és azt jelzi, hogy az érzéketlenség előre legalább 4 ágyéki és hátra a 2 keresztcsonttájéki területig megszűnt. A kapott eredmények adatait a 3. táblázatban összesítettük. Láthatjuk, hogy a C vegyület 2%-os oldatban az ujj fájdalmával szemben 1—2 napos és a herezacskó fájdalmával szemben 7,5 óránál hosszabb ideig tartó érzéstelenséget idézett elő. Valamennyi állat teljesen felépült. 3. táblázat Kutya peridurális érzéstelenítése szaxitoxin (STX) oldathoz adott C vegyülettel. Az STX koncentrációja 4 /Kg/ml volt. Az injekció térfogata 5 ml volt. Érzéstelenítő Az ujjakban A herezacskóban (koncentráció) okozott fajdalom gátlásának időtartama C 2% 1-2 nap 420 perc, 24 óra Minden oldatban 1 :100 000 arányú epinefrint használtunk. A 2. táblázatban közölt, béka ülőidegekkel végzett in vitro kísérleteket A. F. Truant módszere szerint végeztük [Arch. Int. Pharmacodyn. 115, 483—497. (1958)]. Rana pipiens ülőidegtörzsét gerincagyi tövétől a bokaizületig kiboncolva kipreparáltuk, és ezüst-ezüst-2
