167658. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a metanobaktériumos fermentáció B12-vitamin hozamának növelésére
g 167658 10 tamint tartalmaz. A biológiailag értékes III. faktorral kiegészített érték: 29400 fxg/1. A fermentlé Bia-vitamintartalom növekedése a kiindulási 11 250 /ig/1 szinthez viszonyítva 215,1%. Mg/l Bij-vitamin. A Bi2 -vitaminnal egyenlő biológiai értékű faktorokkal kiegészített érték 31930 jug/1. A fermentlé Bi 2 -vitamin tartalom növekedése a kiindulási 10640 jug/1 szinthez viszonyítva 248,7%. 3. példa 10 literes kísérleti üvegfermentorba 9300 ml 10640 jug/1 Bla -vitamintartalmú, a 159.356 lajstromszámú magyar szabadalmi leírás szerinti félfolyamatos 10 eljárással készített, az 1. példában megadott mezofil metántermelő vegyes mikropopulációt tartalmazó üzemi fermentlevet töltünk. A fermentléhez 100 ml 28-30 C°-os, az alábbi táptalajkomponenseket tartalmazó csapvizet adunk: 15 ammóniumhidrogénkarbonát 6g ammóniumhidroxid 24%-os 2 ml diammóniumhidrogénfoszfát 0,6 g ammóniumszulfát 2,0 g sörélesztőhidrolizátum 20%-os 1 ml 20 kobaltklorid 0,01 g borostyánkősav 0,006 g o-xilidin 0,02 g magnéziumklorid 0,1 g metanol 90 ml 25 A fenti összetételű táptalajba folytatólag a 159.356 lajstromszámú magyar szabadalmi leírás szerint előzetesen 0,006 g 5,6-dimetilbenzimidazolból és 9 g kukoricalekvárból előállított vízoldható komplexet adagolunk be. A fenti táptalaj lényegében 30 ammónium-nitrogénben és metanol-szénben kifejezett nitrogén-szén súlyaránya 1:13. A továbbiakban az 1. példa szerint járunk el: a fermentléhez naponta 100 ml 28-30 C -os csapvízben a fenti táptalajkomponenseket tartalmazó tápta- 35 lajt adagolunk. A hetedik napon a fermentációt félfolyamatossá alakítjuk át oly módon, hogy a fermentlé alapos felkeverése után össztérfogatának 1/10 részét elvesszük. Az elvett fermentlé aliquot részéből mégha- 40 tározzuk annak összes nitrogén és összes széntartalmát. Az elemzés alapján a fermentlé összes nitrogéntartalma (Npg) 2755 mg/l, az összes széntartalma (CFÖ) 8125 mg/l. 45 Az elvett fermentlével megegyező térfogatú csapvízbe az alábbi tápanyagokat oldjuk fel: ammóniumhidrogénkarbonát 6 g ammóniumhidroxid 24%-os 2 ml diammóniumhidrogénfoszfát 0,6 g 50 ammóniumszulfát 2,0 g sörélesztőhidrolizátum 20%-os l,0ml kobaltklorid 0,025 g borostyánkősav 0,006 g o-xilidin 0,02 g 55 magnéziumklorid 0,1 g metanol 100 ml A táptalajhoz folytatólag 0,015 g 5,6-dimetilbenzimidazolból és 9 g kukoricalekvárból előzetesen előállított vízoldható komplexet adunk. Az összes 60 táptalajkomponens beadagolása után a táptalaj ammónium-nitrogénben és metanol-szénben kifejezett aránya 1:14. A továbbiakban az 1. példában leírt módon járunk el. 65 A fermentáció hetedik napján vett mintából meghatározzuk a Bi 2 -vitamin tartalmat, amely 25870 4. példa 70 m3 -es állóhengeres üzemi fermentorba 40 m 3 11950 jug/1 Bu-vitamin tartalmú, a 159.356 lajstromszámú szabadalmi leírás szerinti félfolyamatos eljárással készített, az 1. példában megadott mezofil metántermelő vegyes mikropopulációt tartalmazó üzemi fermentlevet táplálunk. A fermentléhez 2 m3 28-30 C°-os az alábbi táptalajkomponenseket tartalmazó csapvizet adagolunk be: ammóniumhidrogénkarbonát 15 kg ammóniumhidroxid 24% 5 kg diammóniumhidrogénfoszfát 1,5 kg ammóniumszufiát 8 kg sörélesztőhidrolizátum 20%-os 5 kg borostyánkősav 30 g kobaltklorid 50 g o-xilidin 100 g magnéziumklorid 500 g metanol 4501 A fenti összetételű táptalajba folytatólag a 159.356 lajstromszámú magyar szabadalmi leírás szerint előzetesen 30 g 5,6-dimetilbenzimidazolból és 24 kg kukoricalekvárból előállított vízoldható komplexet adagolunk. A fenti táptalaj lényegében ammónium-nitrogénben és metanol-szénben kifejezett nitrogén-szén súlyaránya 1:13. A továbbiakban az 1. példa szernt járunk el, naponta 2 m3 28-30 C -os csapvízben a fenti táptalajkomponenseket tartalmazó táptalajt adagolunk. A hetedik napon a fermentációt félfolyamatossá alakítjuk át oly módon, hogy a fermentlé össztérfogatának 1/10 részét elvesszük és helyébe ugyanolyan térfogatú, a fenti táptalajkomponenseket tartalmazó táptalajt adunk. A fermentlé aliquot részéből meghatározzuk annak összes nitrogén és összes szén tartalmát. Az elemzés alapján a fermentlé összes nitrogén tartalma (Npö) 2250 mg/l, az összes szén tartalma (Cpö) 8270 mg/l.. Az elvett fermentlével megegyező térfogatú csapvízbe az alábbi tápanyagokat mérjük be: ammóniumhidrogénkarbonát 30 kg ammóniumhidroxid 24%-os 10 kg diammóniumhidrogénfoszfát 2,0 kg ammóniumszufiát 15 kg sörélesztőhidrolizátum 20%-os 5 kg borostyánkősav 30 g kobaltklorid 100 g o-xilidin 100 g magnéziumklorid 500 g metanol 5001 A táptalajba folytatólag beadagolunk 60 g 5,6-dimetilbenzimidazolból és 24 kg kukoricalekvárból előzetesen előállított vízoldható komplexet. Az összes táptalajkomponens beadagolása után a táptalaj ammónium-nitrogénben és metanol-szénben kifejezett aránya 1:14. A továbbiakban az 1. példa szerint járunk el. A hetedik napon meghatározzuk a fermentlé Bi2 -vitamin tartalmát, amely 25950 jxg/1 Bu-vitamin. A 5
