167614. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3-helyettesített 1,2-4-triazol-pentofuranozidok előállítására
7 167614 8 ezeket a vegyületeket az alábbi 16. példában említett vírusokkal szembeni hatásosság szempontjából vizsgáltuk, azt tapasztaltuk, hogy lényegileg nincs vírusellenes aktivitásuk, ami feltehetően annak tulajdonítható, hogy a sejtkultúrában jelenlevő enzimek nem képesek foszforilezni az olyan nukleozidokat, amelyekben a glükozid-molekularész nem tartalmaz a 2'-helyzetben transz-állású oxigénatomot. Ezeket a vegyületeket azonban szintetikus úton foszforilezhetjük és így a feltehetően aktív 5'-foszfátokat képezhetjük. Az 5'-foszfátokat alkalmazás előtt ciklizálhatjuk; ebben az esetben a vegyület in vivo végbemenő hasítása adja az aktív 5'-foszfát vegyületet. A foszforilezési eljárás lényegileg ugyanolyan módon folytatható le, amint azt fentebb a ribotid-származékok előállítása esetén ismertettük. A találmány szerinti eljárás gyakorlati kiviteli módjait közelebbről az alábbi példák szemléltetik. E példákban a részekben illetőleg százalékokban megadott értékek súlyszerint értendők; a hőmérsékleti adatokat Celsius-fokokban adtuk meg. A példákban említett bepárlási műveleteket minden esetben rotációs rendszerű bepárlókészülékben folytattuk le, csökkentett nyomáson, 35 C° hőmérsékleten. /. példa 1 -(2,3,5-tri-O-benzoil-0D-ribofuranozil)-1,2,4-triazol-3-karbonsav-metilészter és 1-(2,3,5-tri-0-benzoil-ß-D-ribofuranozil)- 1,2,4-triazol-5-karbonsavmetilészter előállítása (szililezési eljárás) A/ N-(trimetilszilil)- 1,2,4-triazol- 3-karbonsav- metilészter előállítása. 14,0 g (110 millimól) 1,2,4-triazol- 3-karbonsavmetilészter 100 ml hexametil-diszilazánnal készített szuszpenzióját keverés közben, visszafolyató hűtő alkalmazásával az ammónia-fejlődés befejeződéséig forraljuk; ehhez körülbelül 2 órai forralás szükséges. A hexametil-diszilazán feleslegét ezután csökkentett nyomáson elpárologtatjuk; maradékként 20,6 g mennyiségben (az elméleti hozam 100%-a) kapjuk az 1,2,4-triazol- 3-karbonsav-metilészter N-trimetil- szililszármazékát. B/ Ribofuranozil-származék előállítása a cukor halogénszármazékával való reagáltatás útján. 20,6 g (110 millimól) N-(trimetilszilil)- 1,2,4-triazol- 3-karbonsav-metilészter és 52,5 g (100 millimól) 2,3,5-tri- O-benzoil-D- ribofuranozilbromid 300 ml vízmentes acetonitrillel készített oldatát 3 napig 25 C° hőmérsékleten tartjuk. Ezután az oldószert elpárologtatjuk és a maradékot etanolból kristályosítjuk. Az így kapott terméket etilacetát és etanol elegyéből átkristályosítjuk, majd szilikagél-oszlopon kloroformmal kromatografáljuk. Ily módon 25,1 g tiszta l-(2,3,5-tri- O-benzoil-/3-D- ribofuranozil)- 1,2,4-triazol- 3-karbonsav-metilésztert (az elméleti hozam 44,0%-a) kapunk, amely 137 139 C°-on olvad. Elemzési adatok a C30 H 2 5 N 3 0 képlet alapján: számított: C: 63,04%, H: 4,41%, N: 7,35%; talált:C: 62,91%, H: 4,17%, N: 7,10%. A szilikagél-oszlopról nyert, gyorsabban migráló komponenst etanolból átkristályosítottuk. Ily módon 13,2 g l-(2,3,5-tri- O-benzoil- (3-D- ribofuranozil)-1,2,4-triazol- 5-karbonsav-metilsztert (az elméleti hozam 23,1%-a) kapunk, amely 122-124 C°-on olvad. Elemzési adatok a C30H 2 5N3O képlet alapján: számított: C: 63,04%, H: 4,41%, N: 7,35%; talált: C: 63,20%, H: 4,35%, N: 7,12%. 2. példa 1 -(2,3,5-tri-O-benzoil- 0-D-ribofuranozil)-1,2,4-triazol-3-karbonsav-metilészter előállítása (kapcsolási eljárással). 12,7 g (100 millimól) 1,2,4-triazol- 3-karbonsav-metilészter és 55,4 g (110 millimól) l-O- acetil-2,3,5-tri- O-benzoil- (3-D- ribofuranóz elegyét 160—165 C° hőmérsékletű olajfürdőben melegítjük. A cukorszármazék megolvadása után 400 mg bisz-(pnitrofenil)- foszfátot adunk hozzá keverés közben és az elegyet csökkentett nyomáson 15—20 percig melegítjük 160-165 C° hőmérsékleten. A maradékként kapott terméket etilacetát és etanol elegyéből átkristályosítjuk; ily módon 42,5 g l-(2,3,5-tri- O-benzoil-0-D- ribofuranozil)- 1,2,4- triazol- 3-karbonsav-metilésztert (az elméleti hozam 74,5%-a) kapunk, amely 137-139 C°-on olvad. 3. példa 30 1-(2,3,5-tri-0-acetil- j3-D-ribofuranozil)-1,2,4-triazol-3-karbonsav-metilészter előállítása 12,7 g (0,10 mól) 1,2,4-triazol- 3-karbonsav-metilészter és 31,8 g (0,10 mól) 1,2,3,5-tetra- O-acetil- /3-D-ribofuranóz elegyét 160-165 C° hőmérsékletű olaj-35 fürdőben melegítjük a cukorszármazék megolvadásáig. Ezután 25 mg bisz-(p-nitrofenil)-foszfátot adunk hozzá és keverés közben, csökkentett nyomáson, 15-20 percig melegítjük 160-165 C° hőmérsékleten. A maradékként kapott reakcióelegyet forró benzol-40 ban oldjuk, az oldatot leszűrjük és a szűrlethez ciklohexánt adunk. Ennek hatására kristályos alakban kiválik 30,0 g l-(2,3,5-tri- O-acetil- (3-D- ribofuranozil )-l,2,4-triazol- 3-karbonsav-metilésztert (az elméleti hozam 77,8%-a) kapunk, amely 107-109 C°-on 45 olvad. Elemzési adatok a C] 5H19N3O9 képlet alapján; számított: C: 46,75%, H:4,97%, N: 10,91%; talált; C: 46,88% , H: 5,03%, N: 10,64%. 50 4. példa 1- (|3-D-ribofuranozil)- 1,2,4-triazol-3-karbonsav-metil-55 észter előállítása 25,0 g (43,8 millimól) l-(2,3,5-tri- O-benzoil- j3-D-ribofuranozil)-1,2,4-triazol- 3-karbonsav- metilészter és 400 mg nátrium-metoxid 200 ml metanollal 60 készített oldatát 45 percig forraljuk visszafolyató hűtő alkalmazásával. Az oldatot ezután Bio-Rad AG50-X2(H) készítménnyel semlegesítjük, leszűrjük és a szűrletet szirupsűrűségig bepároljuk. Ezt a maradékot metanol és etilacetát elegyéből kristályosítjuk; 65 ily módon 8,0 g l-(j3-ribofuranozil)- 1,2,4-triazol-3-karbonsav- metilésztert (az elméleti hozam 70,5%-a) kapunk, amely 117-119 C°-on olvad. 4
