167369. lajstromszámú szabadalom • Eljárás lazac kalcitonin és származékai savaddiciós sóinak előállítására
9 167369 10 A maradékot 500 ml dioxán és 100 ml víz elegyében oldjuk, és palládiumkatalizátor jelenlétében 20°on és atmoszférikus nyomáson hidrogénezzük. Ezután leszűrjük, szárazra pároljuk, a maradékot éterrel mossuk, és megszárítjuk. H-Thr-Tyr-Pro-Oh-t kapunk. Olvadáspontja 180° (bomlik), [aß0 =-31° (c=l, 95%-os ecetsavban). b) Z-Leu-Gln-OMe 70 g Z-Gln-OH-t feloldunk 1,5 liter dioxánban, és addig folyatunk hozzá éteres diazometán oldatot, amíg az oldat sárga színe megmarad. Ezután az oldatot bepároljuk, és a fehér maradékot éterrel kezeljük. Z—Gin—OMe-t kapunk. Olvadáspontja 136°, [a]y =-21° (c=l, dimetilformamidban). 71 g észtert feloldunk 1,7 liter metanolban, majd 5g 10% palládiumot tartalmazó palládiumszenet 59 ml 4 n sósavban szuszpendálunk, és hozzáadjuk az oldathoz. Ezután 3 óra hosszat szobahőmérsékleten atmoszférikus nyomáson hidrogénezzük. Eközben az elméletileg szükséges hidrogénnnek kb. 83%-a fogy. A katalizátort szűréssel eltávolítjuk, és a szűredéket teljesen bepároljuk, mire H-Gln-OMe • HG-t kapunk sűrű olaj alakjában. 64 g Z-Leu-OH-t 200 ml acetonitrilben oldunk, hozzáadunk 27,7 g N-hidroxiszukcinimidet, és lehűtjük -10°-ra. Ezután hozzáönjtük 50 g diciklohexükarbodiimidnek 100 ml acetonitrillel készült oldatát. 30 perc múlva leszűrjük a diciklohexilkarbamidról. A szüredékhez dimetilformamidban oldott 47,3, g H-Gln-OMe • HO-t adunk, és ugyanakkor 100 g N-metilmorfolint is. Négy óra hosszat állni hagyjuk, bepároljuk, a maradékot etilacetátban oldjuk, és egymás után 5%-os nátriumhidrogénkarbonát oldattal, n sósavval és vízzel mossuk. A szerves fázist nátriumszulfáton megszárítjuk, és vákuumban bepároljuk. Metanolból és éterből való átkristályosítás után Z-Leu-Gln-OMe-t kapunk. Olvadáspontja 179°, [a]l° =-16° (c=l, dimetilformamidban). c) Z-Lys(BOC)-Leu-Gln-OMe 42 g Z-Leu-Gln-OMe-t feloldunk 1500 ml metanolban. Ezután 16 g 10% palládiumot tartalmazó palládiumszenet 25,8 ml 4 n sósavban szuszpendálunk, és az oldathoz adjuk. Nyolc óra hosszat szobahőmérsékleten és közönséges nyomáson hidrogénezünk. Eközben az elméletileg szükséges hidrogénnek 95%-a fogy. A katalizátort szűréssel eltávolítjuk, és a szüredéket bepároljuk. H-Leu-Gln-OMe • HCl-t kapunk hab alakjában. Ezt feloldjuk 300 ml dimetilformamidban, hozzáadunk 34 g Z-Lys(BOC)-OCP-t és 8,4 ml trietilamint. összerázás után 16 óra hosszat állni hagyjuk. Ezután a reakciókeveréket vákuumban bepároljuk, a maradékhoz vizet adunk, majd a víztől szűréssel elválasztjuk. Kevés metanolban oldjuk, és éterrel kicsapjuk. Szűrés és szárítás után Z-Lys(BOC)-Leu-Gln-OMe-t kapunk. MD0 = -21° (c=l, dimetilformamidban). d) Z-His-Lys(BOC)-Leu-Gln-HN-NH2 38 g Z-Lys(BOC)-Leu-Gln-OMe-t feloldunk 300 ml dimetüformamidban, hozzáadunk 15 g 10% 5 palládiumot tartalmazó palládiumszenet, atmoszférikus nyomáson és szobahőmérsékleten hidrogénezzük, és a katalizátort szűréssel eltávolítjuk. A szüredékhez 25,2 g Z-His-NHNH2 -ből előállított Z-His-N3 -at adunk, 20° -on 5 óra hosszat állni 10 hagyjuk, bepároljuk, a maradékot etilacetátban oldjuk, az oldatot vízzel mossuk, nátriumszulfáton megszárítjuk, bepároljuk, és a maradékot éterrel mossuk. Z-His-Ly<BOC)-Leu-Gln-OMe-t kapunk. Olvadáspontja 120° (bomlik), [a]fj°= -19° 15 (c = 1, dimetilformamidban). 33 g Z-His-Lys(BOC)-Leu-GLn-OMe-t feloldunk 330 ml metanolban, hozzáadunk 7,5 ml hidrazinhidrátot, 2 napig 25°-on állni hagyjuk, majd szárazra pároljuk. A maradékot dimetiífor-20 mamidban oldjuk, bepároljuk, és addig ismételjük ezt a kezelést, míg hidrazinhidrát nyomok sem mutathatók ki. A maradékot éterrel, majd vízzel, és ismét éterrel mossuk, megszárítjuk, és így Z-His-Lys(BOC)-Leu-Gln-NH-NH2 -t kapunk. 25 Olvadáspontja 199°, [a]f>° = -22° (c=l, metanolban). e)Z-His-Lys(BOC-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-OH 30 40 g Z-His-Lys(BOC)-Leu-GLn-NH-NH2 -t feloldunk 400 ml dimetilformamidban, az oldatot —20°-ra hűtjük, hozzáadunk 75 ml 2 n dioxános hidrogénklorid oldatot, majd utána 6 ml terc-butilnitritet, 10 percig -20°-on keverjük, hozzáadunk 35 30 ml trietilamint és 20 g H-Thr-Tyr-Pro-OH-t, és 16 órán át 25°-on reagálni hagyjuk. Ezután szárazra pároljuk, a maradékot sorban éterrel, híg ecetsavval, éterrel és forró etilacetáttal mossuk. Nagyvákuumban megszárítva Z-His-Lys(BOC)— 40 Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-OH-t kapunk. Olvadáspontja 215° (bomlik), [a]l° = 23* (c=l, dimetilformamidban). C 1 részsorozat* 45 Z-His-Lys(BÓc)-Tyr-Gln-Thr-Tyr-Pro-OH a) H-Thr-Tyr-Pro-OH Lásd a C a) részsorozatot. 50 b) Z-Gln-Thr-Tyr-Pro-OH 40,1 g Z-Gln-ONP-t és 38,4 g H-Thr-Tyr-Pro—OH-t feloldunk 500 ml dimetilformamidban, 55 és hozzáadunk 12,2 ml N-metilmorfolint. Az oldatot 16 óra hosszat szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd vákuumban teljesen bepároljuk. A maradékot etilacetát és n-butanoi 10:1 arányú elegyében oldjuk, és az oldatot n kénsav és 30%-os nátriumklorid-60 -oldat 1 :1 arányú elegyével és utána 15%-os nátriumldorid oldattal mossuk. A szerves fázist nátriumszulfáton való szárítás után vákuumban bepároljuk. A maradékot kloroform és metanol 1:1 arányú elegyében oldjuk, és 20-szoros 65 mennyiségű kovasavgélt tartalmazó oszlopon át-5
