166653. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új pirimido (5,4-d) pirimidinek előállítására
5 166653 6 A vizsgálati anyagok inkubálását, amelyek térfogata 5 ml, zárt polietiléncsövekben (50 ml befogadóképesség és levegő atmoszféra) egyenletes rázás közben (40 percig) 37 ±0,1 C°-os vízfürdőn végeztük. A négy órás inkubációs idő alatt a vizsgálandó anyagok pH-értékét 15—30 percenként precíziós pH-mérővel ellenőriztük, és 0,3 n nátriumhidroxid-oldat, illetve 0,3 n sósav hozzáadásával ±0,02 pH-egység maximális eltéréssel 7,34 pH-n tartottuk. A pH-érték ilyen pontos ellenőrzése szükségesnek bizonyult, mivel a 2,3-DPG anyagcsere rendkívül érzékeny a pH-érték legkisebb változásaira. A 4 órás inkubációs idő kezdetén, illetve végén 4 ml anyagot 0 C°-on azonos térfogatú 1,2 n perklórsawal extraháltunk. A káliumhidroxid-oldattal semlegesített kivonatokban a 2,3-DPG-t, az ATP-t és szervetlen foszfátot papírkromatográfiás szétválasztási műveletekkel mennyiségileg meghatároztuk, és az intraeritrocitáris koncentrációkat a kettős meghatározásnál mért hematokrita értékek alapján kiszámítottuk. A következő táblázat feltünteti a 2,3-DPG koncentráció spontán csökkenésének gátlását emberi eritrocitákban (középértékek 3 kísérlet alapján): Vegyület Koncentráció, mól/liter Gáüás, % F F 5•10-4 5 • 10-5 98 ±10 13 ± 3 Kiegészítésképpen utalunk arra, hogy a találmány szerinti vegyületeknek csekély akut toxicitásuk van, például az A vegyület akut toxicitása egereken az alábbi: LD50 egéren intravénásán 133 mg/kg, LD50 egéren perorálisan >• 3 g/kg. A találmány szerinti vegyületek az összes ismert bázisosan szubsztituált pirimido-pirimidinekkel szemben váratlan új hatást mutatnak. Az összes ismert pirimido-pirimidin az artériás vérnyomást csökkenti, ezzel szemben az I általános képletű vegyületek beadása után vérnyomásnövekedés tapasztalható. Ez az A vegyületnél a legerősebb, és ezt a vegyületet farmakológiailag részletesebben megvizsgáltuk. Kitűnt, hogy a perorális és parenterális beadásnál fellépő hosszantartó vérnyomásnövekedés a szimpatikus keringési központok befolyásolásán alapszik. Különösen előnyös az egyidejű pszichomotorikus, illetve központi izgató hatás hiánya. Az I általános képletű vegyületeket gyógyászati felhasználásra adott esetben egyéb hatóanyagokkal kombinálva a szokásos gyógyszerkészítményekké, például tablettákká, drazsékká, kúpokká, ampullákká vagy oldatokká dolgozhatjuk fel. Az intravénás egyszeri adag 2—15 mg, előnyösen 5—10 mg, a perorális adag 25—200 mg, előnyösen 50—100 mg. A következő példák szemléltetik a találmány szerinti eljárást. A hőmérsékleti adatokat Celsius-fokban adjuk meg. 1. példa 2,6-Bisz(2-hidroxi-etil)-(2-metoxi-etil)-amino]-4,8--dipiperidino-pirimido[5,4-d]pirimidin 5 11,0 g (0,03 mól) 2,6-diklór-4,8-dipiperidinO-pirimido[5,4-d]pirimidint 50 g (2-hidroxi-etil)-(2-metoxi-etil)-aminnal 3 óra hosszat körülbelül 200°-on melegítünk. A narancsszínű reakcióoldatot ezután vízben feloldva 10 . a 2,6-bisz[(2-hidroxi-etil)-(2-metoxi-etil)-amino]-4,8-dipiperidino-pirimido[5,4-d]-pirimidin gyantaszerű csapadékként kiválik. A vizes fázis leöntése után 0,2 n sósavból 2 n ammóniaoldattal leválasztjuk, ismételt dekantálás, vizes mosás és szárítás után 13,6 g (85%) 15 terméket kapunk. Mézszínű gyanta; Rf -értéke: ~0,5 (vékonyrétegkromatográfiás kovasavgél F kész fólián, Macherey Nagel cég; kifejlesztőszer: etilacetát). c H N (532,6) a C26 H 44 N 8 0 4 képlet szerint számított: talált: 58,62 58,60 8,33 8,29 21,04 21,41 A cím szerinti vegyületet analóg módon 2-klór-6--klórszulfonil-4,8-dipiperidino-pirimido[5,4-d]pirimidin-30 nek (2-hidroxi-etiI)-(2-metoxi-etil)-aminnal való 4—5 órás melegítésével körülbelül 200°-on is előállíthatjuk. 2. példa 35 2,6-Bisz[(2-hidroxi-etil)-(2-metoxi-etil)-amino]-4,8--dipiperidino-pirimido[5,4-d]pirimidin 2,3 g (0,005 mól) 2,6-bisz[(2-hidroxi-etil)-(2-metoxi-40 -etil)-amino]-4,8-bisz(metiltio)-pirimido[5,4-d]pirimidint (op. 126—128°) 50 ml piperidinnel piperidin-hidroklorid jelenlétében zárt csőben 4 óra hosszat körülbelül 200°-on melegítünk. A kapott reakcióoldatot vákuumban bepároljuk. A kapott maradékhoz körülbelül 100 ml 45 vizet adva a cím szerinti vegyület gyantaszerű anyagként kiválik. Tisztítás céljából 0,2 n sósavból 2 n ammóniaoldattal leválasztjuk. Kitermelés 1,8 g (68%) mézszínű gyanta. A cím szerinti vegyületet analóg módon 4,8-bisz(ben-50 ziltio)-2,6-bisz[(2-hidroxi-etil)-(2-metoxi-etil)-amino]-pirimido-[5,4-d]pirimidinből (op. 131—133°), illetve 2,6--bisz[(2-hidroxi-etil)-(2-metoxi-etil)-amino]-4,8-bisz-(feniltio)-pirimido[5,4-d]pirimidinből (op. 160—163°) 2—3 óra hosszat 200°-on nyomás alatt piperidinnel való me-55 legítéssel is előállíthatjuk. 3. példa 60 2,6-Bisz[(2-hidroxi-etil)-(2-metoxi-etil)-amino]-4,8--dipiperidino-pirimido[5,4-d]pirimidin 1,0 g (0,002 mól) 2,6-bisz(klórszulfonil)-4,8-dipiperidino-pirimido[5,4-d]pirimidint (op. 207—209°, bomlik), 65 illetve 0,9 g (0,002 mól) 2,6-bisz(metilszulfonil)-4,8-di-3
