166549. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-acilamino-CEF-3-EM-4-karbonsav-vegyületek előállítására
166549 37 38 keverjük, 1 további órán át 25—30°-on állni hagyjuk, majd erős hűtés mellett 80 ml 0,5 mólos vizes káliumdihidrogénfoszfát-oldatot adunk hozzá. A kétfázisú reakciókeverék pH-értékét 20%-os foszforsav cseppenként végzett hozzáadásával 2-re beállítjuk, az elegyet 20 percig szobahőmérsékleten keverjük és a fázisokat szétválasztjuk. A vizes oldatot metilénkloriddal kétszer mossuk, az egyesített szerves oldatokat kétszer 20 ml vízzel mossuk és vízmentes magnéziumszulfáton szárítjuk. Az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk és az olajos maradékot 110 g szilikagélből (5% víztartalmú) álló oszlopra visszük. A fenilecetsavas metilésztert metilénkloriddal és a 7ß-amino-cef-3-em-4--karbonsav-difenilmetilésztert 3% metilacetátot tartalmazó metilénkloriddal eluáljuk, az eluált terméket kismennyiségű metilénkloridban oldjuk, és az oldatot melegen dietiléterrel keverve kristályosítjuk (tű alakú kristályok), hideg dietiléterrel mossuk és szárítjuk. Op. =153—154°; a vékonyrétegkromatogramon (szilikagélen) mért Rf-értékek 0,50 (4 : 1 toluol-aceton), 0,65 (2 : 1 toluol-aceton), 0,40 (1 : 1 toluol-etilacetát) 0,33 (1 : 1 toluol-dietiléter); az ultraibolya abszorpciós spektrum Xmax=257 m[i (e=8150) és ^•min = 245 mji. (s = 7730) (metilénkloridban), és X max = = 255 m[x (s=5500) és Xmin =236 m^ (e=4650) (95%-os etanolban); az infravörös abszorpciós spektrum karakterisztikus sávjai: 2,91, 2,97, 5,61, 5,78, 6,11, 7,14, 8,15, 8,29, 9,14 és 9,83 \i (metilénkloridban) és 2,99, 5,65, 5,77, 6,08, 7,14, 7,74, 7,84, 8,08, 8,53, 9,14, 9,85 és 10,35 JA (ásványolajban). 0,380 g 7ß-amino-cef-3-em-4-karbonsav-difenilmetilészterre 2 ml anizolt és 8 ml abszolút trifiuorecetsavat öntünk, a tiszta oldatot szobahőmérsékleten 10 percig állni hagyjuk, majd kb. 20 ml abszolút toluollal hígítjuk. A keveréket csökkentett nyomáson bepároljuk, a maradékot toluollal együtt még kétszer szárazra pároljuk és 5 ml metanol, 5 ml dietiléter és 0,5 ml víz elegyében szuszpendáljuk. A szuszpenzió pH-értékét trietilamin 5%-os metanolos oldatának cseppenként végzett hozzáadásával 3,5-re beállítjuk, az elegyet 30 percig jeges fürdőben állni hagyjuk, és a finom csapadékot megfelelő üvegszűrőtégelyen leszűrjük. A gyengén beige-színű maradékot metanol és metilénklorid keverékével, majd dietiléterrel mossuk és csökkentett nyomáson 35°-on szárítjuk, az ily módon kapott finom mikrokristályos por, a 7ß-amino-cef-3-em-4-karbonsav 215°-on bomlik; a vékonyrétegkromatogramon mért Rf-értékek (szilikagélen, előhívás jóddal): 0,12 (67:10:23 n-butanol-ecetsav-víz), 0,28 (40: 24: 6: 30 n-butanol-piridin-ecetsav-víz) és 0,21 (42: 21: 6: 10 etilacetát n-butanol-piridin-ecetsav-víz); az infravörös abszorpciós spektrum (ásványolajban) karakterisztikus sávjai: 3,12, 3,80, 4,12, (váll), 4,92, 5,54, 6,05 (váll), 6,19, 6,55, 7,05, 7,42, 8,23, 8,79, 9,55, 12,08, 12,69 és 13,04 [x. 30. példa A 0,250 g 7ß-(D-a-fenilglicil)-amino-cef-3-ern-4-karbonsavat tartalmazó kapszulákat a következőképpen állítjuk elő: Összetétel (100 000 kapszulára): 7ß-(D-a-fenilglicil)-amino-cef-3-karbonsav 25,000 g búzakeményítő 2,500 g magnéziumsztearát 1,000 g A 7ß-(D-a-fenilglicil)-amino-cef-3-em-4-karbonsavat, a búzakeményítőt és a magnéziumsztearátot alaposan összekeverjük és 1. számú kapszulákba töltjük. 31. példa 0,5 g 7ß-(D-<x-fenilglicil)-amino-cef-3-em-4-karbonsavat tartalmazó kapszulákat állítunk elő a következő-10 képpen: Összetétel (2 000 kapszulára): 7ß-(D-a-fenilglicü)-amino-cef-3-em-4--karbonsav 1 000,00 g polivinilpirrolidon 15,00 g 15 kukoricakeményítő 115,00 g magnéziumsztearát 20,00 g A 7ß-(D-a-fenilglicil)-amino-cef-3-em-4-karbonsavat polivinilpirrolidon 95%-os etanolos oldatának 300 miével megnedvesítjük, a keveréket 3 mm lyukbőségű szi-20 tán átnyomjuk és a granulátumot csökkentett nyomáson, 40—50°-on szárítjuk. 0,8 mm lyukbőségű szitán átszitálva, a kukoricakeményítőt és a magnéziumsztearátot hozzáadjuk és a keveréket dugaszolt kapszulákba (0 nagyság) töltjük. 32. példa 0,962 g a-terc-butiloxikarbonil-amino-a-4-hidroxife-30 nil-ecétsav 25 ml abszolút tetrahidrofurános oldatát — 10°-ra hűtjük, 0,365 g 4-metil-morfolin 4 ml abszolút tetrahidrofurános oldatát, majd 0,495 g klórhangyasav-izobutilészter 4,75 ml abszolút tetrahidrofurános oldatát adjuk hozzá, és a reakcióelegyet 25 percig — 10°-on 35 keverjük. 6,00 g 7ß-amino-cef-3-em-4-karbonsav 25 ml abszolút metilénkloridos szuszpenziójához 0,613 g bisz-trimetilszilil-acetamid 6,13 ml metilénkloriddal készített oldatát adjuk és 30 percen át szobahőmérsékleten keverjük. 40 Az átlátszó barnás oldatot ä fenti vegyes anhidrid lehűtött oldatához adjuk, miközben a hőmérsékletet állandóan —10° alatti értéken tartjuk. A hozzáadás befejezése után a reakcióelegyet jéggel történő hűtés közben 20 percig 10°-on, majd 90 percig szobahőmérsékleten 45 keverjük. A kapott elegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, a maradékot víz és etilacetát elegyében felvesszük, és az elegyhez keverés közben 20%-os foszforsavat adva, azt pH 2 értékre savanyítjuk. A vizes fázist elválasztjuk, etilacetáttal háromszor extraháljuk, majd 50 elöntjük. Az egyesített etilacetátos extraktumokat telített vizes nátriumkloridoldattal mossuk, magnéziumszulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A habos maradékot 100 g szilikagélen (sósavval tisztított) oszlopkromatográfiásan tisztítjuk. 9: 1 arányú 55 metilénklorid-ecetsavmetilészter eleggyel eluáljuk a reagálatlan a-terc-butiloxikarbonilamino-a-4-hidroxifenil-ecetsavat, majd 25—30% ecetsav-metilésztert tartalmazó metilénkloriddal a 7ß-(D-a-terc-butiloxikarbonilamino-a-4-hidroxifenil-acetilamino)-cef-3-ém-4-karbon-60 savat. A színtelen habot nagyvákuumban szárítjuk (kitermelés 65%) és tisztítás nélkül tovább felhasználjuk. Vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat (szilikagélen, követés 254 my. hullámhosszú UV-fényben, ninhidrinnel és p,p'-bisz-dimetilamino-bifenillel vagy jódgőzzel): 65 Rf = 0,74 n-butanol-ecetsav-víz 67:10: 23 rendszerben, 19
